Pichia pastoris GS115 (his4; Invitr

Pichia pastoris GS115 (his4; Invitrogens) was transformed
with pPIC9K-CtLIP, pJT3, by electroporation with a Bio-
Rad Gene Pulser (Bio-Rads) following the instructions of
the manufacturer. Before transformation, pJT3 was linearized
by digestion with SalI. As a reference, yeast cells were also transformed with the empty vector (pPIC9K) using the
same method. His1 transformants were recovered on MD
plates. To screen for lipase-producing transformants, the
His1 transformants were spotted on MM-rhodamine B agar
and incubated at 30 1C for 3–7 days. Pichia pastoris transformants
were randomly selected and checked for integration
of the CtLIP gene into the genome by PCR.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Pichia pastoris GS115 (his4 Invitrogens) ถูกแปลงกับ pPIC9K-CtLIP, pJT3 โดย electroporation กับทางชีวภาพแบบPulser ยีน rad (ไบ-Rads) ตามขั้นตอนของผู้ผลิต ก่อนการเปลี่ยนแปลง pJT3 ที่เป็นเส้นตรงโดยย่อยอาหารกับสลี่ อ้างอิง เซลล์ยีสต์ยังแปลงใช้เวกเตอร์ว่างเปล่า (pPIC9K)วิธีเดียวกัน His1 transformants ถูกกู้คืนใน MDแผ่น หน้าจอสำหรับการผลิตเอนไซม์ไลเปส transformants การHis1 transformants ถูกด่างใน agar MM rhodamine Bและ incubated ที่ 1C 30 3 – 7 วัน Pichia pastoris transformantsถูกสุ่มเลือก และตรวจสอบสำหรับการรวมของยีน CtLIP ในจีโนมโดย PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Pichia pastoris GS115 (his4; Invitrogens)
ถูกเปลี่ยนด้วยpPIC9K-CtLIP, pJT3 โดย electroporation กับ Bio-
ราดยีน pulser (Bio-RADS)
ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ก่อนที่จะเปลี่ยนแปลง pJT3
ได้รับการเชิงเส้นโดยการย่อยด้วยสาลี่ เป็นข้อมูลอ้างอิงเซลล์ยีสต์ถูกเปลี่ยนด้วยเวกเตอร์ที่ว่างเปล่า (pPIC9K)
โดยใช้วิธีการเดียวกัน transformants His1 หายใน MD
แผ่น ไปที่หน้าจอสำหรับ transformants ผลิตเอนไซม์ไลเปสที่
transformants His1 เป็นด่างใน MM-rhodamine วุ้น B
และบ่มวันที่ 30 1C สำหรับ 3-7 วัน Pichia pastoris transformants
สุ่มเลือกและการตรวจสอบสำหรับการรวมของยีน CtLIP เข้าไปในจีโนมโดยวิธี PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

pichia pastoris gs115 ( his4 ; invitrogens ) คือเปลี่ยน
กับ ppic9k ctlip pjt3 , โดย electroporation กับ Bio - Rad ยีนพัลเซอร์ ( ไบโอ rads

) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ก่อนการแปลง pjt3 คือช่วง
โดยการย่อยด้วยสาลี่ . เป็นการอ้างอิงเซลล์ยีสต์ก็เปลี่ยนกับเวกเตอร์ที่ว่างเปล่า (
ppic9k ) โดยใช้วิธีการเดียวกันhis1 พลาสมิดที่พบในแผ่น MD
. หน้าจอสำหรับการผลิตเอนไซม์พลาสมิด ,
his1 พลาสมิดอยู่ในมิลโรดามีน บีวุ้น
บ่มที่ 30 ใน 3 - 7 วัน pichia pastoris transformants
สุ่มและการตรวจสอบรวม
ของ ctlip ยีนเข้าสู่จีโนมโดย PCR