G50 strain was found to be dependen

G50 strain was found to be dependent on the carbon source where
they were grown. However, to the best of our knowledge the
resistance to gastrointestinal conditions of Lactobacillus strains
grown in prebiotic carbohydrates has rarely been considered.
Valerio et al. (2006) reported the protective effect of artichokes on
different probiotics strains in the gastrointestinal tract that could
be hypothetically attributed to the presence of prebiotic carbohydrates
and to the physical structure of the vegetable matrix.
Prebiotics are defined as “non-digestible food ingredients that
beneficially affects host by selectively stimulating the growth and/
or activity of one or a limited number of bacteria in the colon”
(Gibson et al., 2004). Some prebiotic carbohydrates are currently
available in the market, such as fructooligosaccharides, lactulose,
inulin and galactooligosaccharides from lactose (GOS-La) (Rastall,
2010). However, currently there is considerable interest in the
discovery of new carbohydrates with potential prebiotic properties.
Among them, galactooligosaccharides from lactulose (GOS-Lu)
have recently been studied (Cardelle-Cobas et al., 2008; Martinez-
Villaluenga et al., 2008). GOS-Lu can be obtained by transgalactosylation
reaction of the lactulose by the action of b-galactosidases
from different bacterial sources (Cardelle-Cobas et al.,
2008; Martinez-Villaluenga et al., 2008). Recently, it has been reported
that GOS-Lu have the ability to promote the growth of
bifidobacteria using in vitro fermentation systems with human
fecal cultures in a similar manner as the more highly recognised
prebiotic GOS-La (Cardelle-Cobas et al., 2009).
Therefore, the aim of this study was to investigate the growth
of six Lactobacillus strains, normally used in fermented food,
with different prebiotics (lactulose, GOS from lactose and GOS
from lactulose) as carbon sources and to determine their resistance
to different gastrointestinal conditions (amylases, low
pH, bile extract and pancreatin). Hydrophobicity as a measure
of potential adhesion of Lactobacillus, as well as lactic and
acetic acid concentrations produced during incubation were also
evaluated.
2. Materials and methods
2.1. Chemicals
Glucose, lactulose, bile extract, pancreatin and a-amylase (1440
units/mg protein) from porcine pancreas, b-galactosidase from
Aspergillus oryzae (8.0 units/mg protein) and n-hexadecane was
purchased from SigmaeAldrich (St. Louis, USA). The bacteriological
growth media supplements were obtained from EMD Chemicals,
Gibbstown, NJ. The galactooligosaccharide from lactose (GOS-La)
was obtained from Vivinal-GOS, kindly provided by Friesland
Foods Domo (Zwolle, The Netherlands). This product has a 73 wt%
dry matter, the composition of which was 60 wt% GOS, 20 wt%
lactose, 19 wt% glucose and 1 wt% galactose, as stated by the
supplier. Duphalac (Solvay Pharma, Brussels, Belgium)was used to
obtain the galactooligosaccharides from lactulose (GOS-Lu).
2.2. Preparation of galactooligosaccharides
In order to purify the GOS-La, the industrial product Vivinal-
GOS was fractionated using size exclusion chromatography,
following the method reported by Hernández et al. (2009) with
some modifications. In brief, 80 mL of Vivinal-GOS (25% w/v) were
injected in a Bio-Gel P2 (Bio-Rad Hercules, CA, USA) column
(90  5 cm) using water as mobile phases, at 1.5 mL min1. Sixty
fractions of 10 mL were collected, after the elution of void volume.
The fractions degree polymerization (DP) was determined by
electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) at positive
mode, ranging from monosaccharides to octasaccharides. Fractions
with DP 3 were pooled and freeze dried.
GOS from lactulose were obtained following the method previously
described (Clemente et al., 2011). A solution (450 g L1) of
lactulose (Duphalac) was dissolved in 50 mM sodium phosphate
buffer and 1 mM MgCl2, pH 6.5, after addition of 8 U mL1 of
b-galactosidase from A. oryzae (Sigma, St. Louis, MO USA), and
incubation at 50 C for 20 h under continuous agitation at 300 rpm.
After incubation, the mixtures were immediately immersed in
boiling water for 5 min to inactivate the enzymes. The DP of initial
GOS-Lu mixture contained from monosaccharides to octasaccharides.
Subsequently, the GOS-Lu mixture was fractionated
using size exclusion chromatography in order to remove monoand
disaccharides, following the previous methodology applied to
Vivinal-GOS.
2.3. Bacterial strains
Lactobacillus bulgaricus ATCC7517 (LB), Lactobacillus casei
ATCC11578 (LC), Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis ATCC4797
(LD), Lactobacillus plantarum ATCC8014 (LP1), L. plantarum WCFS1
(LP2) and Lactobacillus sakei 23K (LS) were purchased in lyophilized
form and maintained at 80 C for long-term storage. All these
strains are considered as probiotics as previously reported in
different studies (Jain et al., 2004; Reid, 2008; Park et al., 2008).
Freeze-dried strains were grown in Lactobacilli MRS broth or
in Lactobacilli MRS agar (EMD Chemicals, Gibbstown, NJ) at 37 C
in an anaerobic chamber (10% CO2: 5%H2: 85% N2) (Coy Laboratory
Products, Ann Arbor, MI) after transfer through an airlock
with two exchanges of N2 gas followed by one exchange of the
oxygen-free mixed gas of the same composition as within the
chamber.
2.4. Growth conditions
Bacteria were grown in MRS basal media carbohydrate free
containing: 10 g L1 protease peptone, 10 g L1 beef extract, 5 g L1
yeast extract, 1 g L1 Tween 80, 2 g L1 ammonium citrate, 5 g L1
sodium acetate, 0.1 g L1 magnesium sulphate, 0.05 g L1 manganese
sulphate, 2 g L1 dipotassium sulphate and 0.5 g L1 cysteine-
HCl. Glucose, lactulose, GOS-La and GOS-Lu were dissolved inwater
(10% w/v) and sterilized by filtration, this solution was added to
MRS basal media to a final concentration of 1% w/v. The incubation
was carried out under anaerobic conditions at 37 C. Inoculum was
prepared from 48 h MRS grown Lactobacillus cells and approximately
1 107 CFU per mL of each Lactobacillus strain (individually)
was added to the MRS basal media containing 1% w/v of glucose,
lactulose, GOS-La or GOS-Lu and incubated under anaerobic
conditions, at 37 C. During 24, 48, 72 and 120 h viable count was
carried out by plating on MRS agar in duplicate. All experiments
were carried out in triplicate.
2.5. Lactic and acetic acid analyses
The incubated samples at 24, 48, and 72 h were centrifuged at
13,000 rpm for 10 min to remove all insoluble particles and the
lactic and acetic acids fermentation products were quantified using
a BioRad HPX-87H HPLC column (Watford, UK) at 50 C, with
a 0.005 mM H2SO4 as the mobile phase, in isocratic mode, at a flow
rate of 0.6 mL min1 (Sanz et al., 2005). The analyses were carried
out in triplicate.
Since minor levels of acetic acid were initially present in the
MRS broth, this value was quantified and subtracted from the
amounts calculated for the samples subjected to incubation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ต้องใช้ G50 พบจะขึ้นอยู่กับแหล่งคาร์บอนที่พวกเขาได้เติบโต อย่างไรก็ตาม กับความรู้ของเราทนทานต่อสภาพระบบของสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสพรีไบโอติกส์คาร์โบไฮเดรตปลูกไม่ค่อยได้รับการพิจารณาValerio et al. (2006) รายงานผลการป้องกันของ artichokes บนสายพันธุ์ probiotics ที่แตกต่างกันในระบบทางเดินที่สามารถhypothetically เกิดจากการปรากฏตัวของพรีไบโอติกส์คาร์โบไฮเดรตและโครงสร้างทางกายภาพของเมทริกซ์ผักPrebiotics ได้แก่ "อาหารไม่ใช่ digestible ส่วนผสมที่แอ๊บมีผลต่อโฮสต์ โดยการเลือกกระตุ้นการเจริญเติบโต และ /หรือกิจกรรมหนึ่งหรือจำนวนแบคทีเรียในลำไส้ใหญ่การจำกัด"(กิบสันและ al., 2004) คาร์โบไฮเดรตบางพรีไบโอติกส์อยู่ในตลาด เช่น fructooligosaccharides, lactuloseinulin และ galactooligosaccharides จากแล็กโทส (GOS-ลา) (Rastall2010 อย่างไรก็ตาม ในปัจจุบันมีมากสนใจในการการค้นพบใหม่คาร์โบไฮเดรตมีคุณสมบัติเป็นพรีไบโอติกส์ในหมู่พวกเขา galactooligosaccharides จาก lactulose (GOS-Lu)เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รับการศึกษา (Cardelle Cobas et al., 2008 มาติเน่-Villaluenga et al., 2008) GOS ลูได้ โดย transgalactosylationปฏิกิริยาของ lactulose โดยการกระทำของบี-galactosidasesจากแหล่งต่าง ๆ แบคทีเรีย (Cardelle Cobas et al.,2008 Martinez-Villaluenga et al., 2008) มีรายงานล่าสุดลู GOS ที่มีความสามารถในการส่งเสริมการเจริญเติบโตของbifidobacteria ที่ใช้หมักในระบบกับบุคคลวัฒนธรรม fecal ในลักษณะคล้ายเป็นการมากกว่ารับการยอมรับพรีไบโอติกส์ GOS ลา (Cardelle Cobas et al., 2009)ดังนั้น จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ ตรวจสอบการเจริญเติบโตของสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส 6 โดยปกติใช้ในอาหารหมักมี prebiotics ต่าง ๆ (lactulose, GOS จากแล็กโทสและ GOSจาก lactulose) เป็นแหล่งคาร์บอน และกำหนดความเงื่อนไขระบบที่แตกต่างกัน (amylases ต่ำpH แยกน้ำดี และ pancreatin) Hydrophobicity เป็นการวัดของการยึดเกาะที่มีศักยภาพของแลคโตบาซิลลัส เช่นเป็นแล็กติก และความเข้มข้นกรดอะซิติกที่ผลิตในระหว่างการฟักตัวได้ยังประเมินการ2. วัสดุและวิธีการ2.1. เคมีภัณฑ์กลูโคส lactulose น้ำดีสารสกัด pancreatin และมี amylase (1440โปรตีนหน่วย/มิลลิกรัม) จากตับอ่อนช่วง บี-galactosidase จากAspergillus แห้งระดับต่าง ๆ (8.0 หน่วย/มิลลิกรัมโปรตีน) และ n hexadecaneซื้อจาก SigmaeAldrich (St. Louis สหรัฐอเมริกา) การ bacteriologicalอาหารเสริมสื่อเจริญเติบโตได้รับสารเคมี EMDGibbstown, NJ Galactooligosaccharide จากแล็กโทส (GOS-ลา)ได้รับจาก Vivinal-GOS กรุณาโดย Frieslandอาหาร Domo (Zwolle เนเธอร์แลนด์) ผลิตภัณฑ์นี้มี 73 wt %เรื่อง 60 wt % GOS, 20 wt %มีส่วนประกอบที่แห้งแล็กโทส 19 wt %กลูโคส และ 1 wt %กา แล็กโทส ตามจำหน่าย Duphalac (Solvay Pharma บรัสเซลส์ เบลเยียม) ถูกใช้ในการได้รับการ galactooligosaccharides จาก lactulose (GOS-Lu)2.2 การเตรียม galactooligosaccharidesเพื่อบริสุทธิ์ GOS-ลา ผลิตภัณฑ์อุตสาหกรรม Vivinal-GOS ถูกแบ่งใช้ขนาดแยก chromatographyตามวิธีรายงานโดย Hernández et al. (2009)ปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในมลโดยย่อ 80 ของ Vivinal GOS (25% w/v) ได้ฉีดใน p 2 การเจไบโอ (Bio Rad เฮอร์คิวลิส CA, USA) คอลัมน์(90 ซม. 5) ใช้น้ำเป็นระยะเคลื่อน ที่ 1.5 mL นาที 1 หกสิบเศษของ 10 mL ได้รวบรวม หลัง elution ของระดับเสียงที่เป็นโมฆะการ polymerization องศาเศษ (DP) ถูกกำหนดโดยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionization โตรเมทรี (ESI-MS) ที่เป็นบวกโหมด ตั้งแต่ monosaccharides octasaccharides เศษส่วนDP 3 ถูกทางถูกพู และตรึงแห้งGOS จาก lactulose ได้รับตามวิธีการก่อนหน้านี้อธิบาย (คลีเมนเต้ et al., 2011) โซลูชั่น (450 กรัม L 1) ของlactulose (Duphalac) ถูกละลายในฟอสเฟตโซเดียม 50 มม.บัฟเฟอร์และ 1 มม. MgCl2, pH 6.5 หลังจากนี้ 8 U mL 1 ของb-galactosidase จากอ.แห้งระดับต่าง ๆ (ซิก St. Louis สหรัฐอเมริกา MO), และบ่มที่ 50 C สำหรับ h 20 ภายใต้อาการกังวลต่อเนื่องที่ 300 รอบต่อนาทีหลังจากบ่ม น้ำยาผสมถูกทันทีสัมผัสต้มน้ำ 5 นาทีเพื่อปิดการทำงานของเอนไซม์ DP ของเริ่มต้นส่วนผสมของ GOS ลูอยู่จาก monosaccharides เพื่อ octasaccharidesในเวลาต่อมา แบ่งการผสมลู GOSใช้ขนาดแยก chromatography เพื่อเอา monoandต่อวิธีการก่อนหน้านี้ใช้ disaccharidesVivinal-GOS2.3. แบคทีเรียสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส bulgaricus ATCC7517 (ปอนด์), แลคโตบาซิลลัส caseiATCC11578 (LC), แลคโตบาซิลลัส delbrueckii ถั่ว lactis ATCC4797(LD), แลคโตบาซิลลัส plantarum ATCC8014 (LP1), L. plantarum WCFS1(LP2) และแลคโตบาซิลลัส sakei 23K (LS) ซื้อใน lyophilizedแบบฟอร์ม และรักษาที่ 80 C สำหรับการเก็บระยะยาว ทั้งหมดนี้สายพันธุ์ถือเป็น probiotics เป็นก่อนหน้านี้รายงานใน(เจน et al., 2004 การศึกษาแตกต่างกัน Reid, 2008 สวนร้อยเอ็ด al., 2008)กรอบสายพันธุ์ที่ปลูกในนาง Lactobacilli ซุป หรือใน agar นาง Lactobacilli (EMD เคมี Gibbstown, NJ) ที่ 37 Cในห้องไม่ใช้ออกซิเจน (10% CO2: 5% H2: 85% N2) (Coy ปฏิบัติผลิตภัณฑ์ Ann Arbor, MI) หลังจากที่โอนย้ายผ่านทาง airlockมีการแลกเปลี่ยนแก๊ส N2 ตาม ด้วยแลกเปลี่ยนหนึ่งสองตัวปราศจากออกซิเจนก๊าซผสมขององค์ประกอบเดียวกันกับภายในหอการค้า2.4 การเงื่อนไขเจริญเติบโตแบคทีเรียเติบโตในคาร์โบไฮเดรตโรคสื่อนางฟรีประกอบด้วย: 10 g L 1 รติเอส peptone, 10 g L 1 เนื้อแยก 5 กรัม L 1ยีสต์สกัด 1 g L 1 Tween 80 ซิเตรตแอมโมเนีย 2 g L 1, L 1 5 กรัมโซเดียม acetate, 0.1 g L 1 แมกนีเซียมซัลเฟต แมงกานีส L 1 0.05 gซัลเฟต ซัลเฟต dipotassium 2 g L 1 และ 0.5 g L 1 cysteine-HCl กลูโคส lactulose, GOS ลาและ GOS Lu inwater ละลายได้(10% w/v) และ sterilized โดยการกรอง แก้ไขปัญหานี้ถูกเพิ่มเข้าไปนางสื่อโรคให้เข้มข้นสุดท้ายของ 1% w/v ที่คณะทันตแพทยศาสตร์ได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่ 37 C. Inoculum ได้เตรียม จากเซลล์ 48 h นางโตแลคโตบาซิลลัส และประมาณ1 107 CFU ต่อมิลลิลิตรของแต่ละแลคโตบาซิลลัสสายพันธุ์ (รายบุคคล)เพิ่มสื่อโรคนางประกอบด้วย 1% w/v ของกลูโคสlactulose, GOS ลาหรือลู GOS และ incubated ภายใต้ไม่ใช้ออกซิเจนเงื่อนไข ที่ 37 เซลเซียส ระหว่าง 24, 48, 72 และ 120 h ได้นับได้ดำเนินการ โดยชุบบน MRS agar ในซ้ำ การทดลองทั้งหมดได้ดำเนินการใน triplicate2.5 การวิเคราะห์กรดอะซิติก และแล็กติกตัวอย่าง incubated ที่ 24, 48, 72 h ถูก centrifuged ที่13000 rpm สำหรับ 10 นาทีเอาอนุภาคที่ไม่ละลายน้ำทั้งหมดและผลิตภัณฑ์หมักกรดแล็กติก และอะซิติกได้ quantified โดยใช้คอลัมน์ HPLC BioRad HPX - 87H (วัต UK) ที่ 50 C มีมม.ความละเอียด 0.005 กำมะถันเป็นระยะการเคลื่อน ในโหมด isocratic คิด ในขั้นตอนการอัตราขั้นต่ำ 0.6 mL 1 (Sanz et al., 2005) ได้ดำเนินการวิเคราะห์การใน triplicateตั้งแต่ระดับรองของกรดน้ำส้มอยู่เริ่มต้นในการนางซุป ค่านี้ quantified และหักออกจากคำนวณจำนวนตัวอย่างที่อยู่ภายใต้การบ่มเพาะวิสาหกิจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์ G50
พบว่าขึ้นอยู่กับแหล่งคาร์บอนที่พวกเขาได้เติบโตขึ้น แต่ที่ดีที่สุดของความรู้ของเราความต้านทานต่อสภาพทางเดินอาหารของสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสที่ปลูกในคาร์โบไฮเดรตprebiotic ได้รับการพิจารณาไม่ค่อย. Valerio et al, (2006) รายงานผลการป้องกันของอาร์ติโช้คในสายพันธุ์โปรไบโอติกที่แตกต่างกันในระบบทางเดินอาหารที่สามารถนำมาประกอบสมมุติฐานการปรากฏตัวของคาร์โบไฮเดรตprebiotic และโครงสร้างทางกายภาพของเมทริกซ์ผัก. Prebiotics จะถูกกำหนดเป็น "ส่วนผสมอาหารที่ไม่ย่อยที่ประโยชน์มีผลต่อการคัดเลือกเจ้าภาพโดยกระตุ้นการเจริญเติบโตและ / หรือกิจกรรมหนึ่งหรือในจำนวนที่ จำกัด ของแบคทีเรียในลำไส้ใหญ่ "(กิบสันet al., 2004) บางคาร์โบไฮเดรต prebiotic อยู่ในขณะนี้มีอยู่ในตลาดเช่นคาร์บอเนต, lactulose, อินนูลินและ galactooligosaccharides จากแลคโตส (GOS-La) (Rastall, 2010) อย่างไรก็ตามขณะนี้มีความสนใจมากในการค้นพบใหม่ของคาร์โบไฮเดรตที่มีคุณสมบัติที่มีศักยภาพ prebiotic. ในหมู่พวกเขา galactooligosaccharides จาก lactulose (GOS-Lu) เพิ่งได้รับการศึกษา (Cardelle-Cobas et al, 2008;. Martinez-. Villaluenga, et al, 2008) GOS-Lu สามารถหาได้โดย transgalactosylation ปฏิกิริยาของ lactulose โดยการกระทำของข galactosidases ที่มาจากแหล่งที่มาของเชื้อแบคทีเรียที่แตกต่างกัน(Cardelle-Cobas, et al. 2008;. มาร์ติเน Villaluenga et al, 2008) เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รับการรายงานว่าGOS-Lu มีความสามารถในการส่งเสริมการเจริญเติบโตของbifidobacteria ใช้ในระบบการหมักหลอดทดลองกับมนุษย์วัฒนธรรมอุจจาระในลักษณะที่คล้ายกันได้รับการยอมรับสูงขึ้นprebiotic GOS-La (Cardelle-Cobas et al., 2009 ). ดังนั้นจุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการตรวจสอบการเจริญเติบโตของหกสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสปกติใช้ในอาหารหมักกับprebiotics แตกต่างกัน (lactulose, GOS จากแลคโตสและ GOS จาก lactulose) เป็นแหล่งคาร์บอนและเพื่อตรวจสอบความต้านทานของพวกเขาไปในทางเดินอาหารที่แตกต่างกันเงื่อนไข (amylases ต่ำค่าpH, สารสกัดจากน้ำดีและ Pancreatin) hydrophobicity เป็นมาตรการของการยึดเกาะที่มีศักยภาพของแลคโตบาซิลลัสเช่นเดียวกับแลคติกและความเข้มข้นของกรดอะซิติกที่ผลิตในระหว่างการบ่มยังประเมิน. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 สารเคมีกลูโคส lactulose สารสกัดน้ำดี Pancreatin และอะไมเลส (1440 หน่วย / มก. โปรตีน) จากตับอ่อนหมู, B-galactosidase จากเชื้อราAspergillus oryzae (8.0 ยูนิต / มิลลิกรัมโปรตีน) และ n-hexadecane ถูกซื้อมาจากSigmaeAldrich (เซนต์หลุยส์ สหรัฐอเมริกา). แบคทีเรียเสริมการเจริญเติบโตของสื่อที่ได้รับจากเมอร์คเคมีภัณฑ์Gibbstown, นิวเจอร์ซีย์ galactooligosaccharide จากแลคโตส (GOS-La) ที่ได้รับจาก Vivinal-GOS ?, ให้ความกรุณาจากฟรีสแลนด์ฟู้ดส์Domo (ซโวลเลอเนเธอร์แลนด์) ผลิตภัณฑ์นี้มี 73% โดยน้ำหนักแห้งองค์ประกอบของซึ่งเป็น60% โดยน้ำหนัก GOS 20% โดยน้ำหนักแลคโตสกลูโคส19% โดยน้ำหนักและกาแลคโตน้ำหนัก 1% ตามที่ระบุไว้โดยผู้จัดจำหน่าย Duphalac? (Solvay Pharma, บรัสเซลส์, เบลเยียม) ถูกใช้ในการได้รับgalactooligosaccharides จาก lactulose (GOS-Lu). 2.2 การเตรียม galactooligosaccharides เพื่อชำระล้าง GOS-La ผลิตภัณฑ์อุตสาหกรรม Vivinal- เกย์? ถูก fractionated ใช้โคยกเว้นขนาดดังต่อไปนี้วิธีการรายงานโดยHernández et al, (2009) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในช่วงสั้น ๆ 80 มิลลิลิตร Vivinal-เกย์? (25% w / v) ได้รับการฉีดในBio-P2 เจล (Bio-Rad Hercules, CA, USA) คอลัมน์(90? 5 ซม.) โดยใช้น้ำเป็นขั้นตอนที่มือถือที่ 1.5 มิลลิลิตรนาที 1 หกสิบเศษของ 10 มิลลิลิตรที่ถูกเก็บรวบรวมหลังจากชะของปริมาณโมฆะ. พอลิเมอระดับเศษส่วน (DP) ถูกกำหนดโดยมวลสารelectrospray ไอออนไนซ์ (ESI-MS) ที่บวกโหมดตั้งแต่monosaccharides เพื่อ octasaccharides เศษส่วนกับ DP 3 ถูกรวบรวมและแช่แข็งแห้ง. GOS จาก lactulose ที่ได้รับต่อไปนี้วิธีการที่ก่อนหน้านี้อธิบาย(เคล et al., 2011) วิธีการแก้ปัญหา (450 กรัม L? 1) ของlactulose (Duphalac?) ถูกละลายในโซเดียมฟอสเฟต 50 มิลลิบัฟเฟอร์และ1 มิลลิ MgCl2 ค่า pH 6.5 หลังจากที่นอกเหนือจาก 8 U มิลลิลิตร 1 ของB-galactosidase จาก A. oryzae (ซิกม่า เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) และการบ่มที่50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 ชั่วโมงภายใต้ความปั่นป่วนอย่างต่อเนื่องที่ 300 รอบต่อนาที. หลังจากการบ่มผสมที่ถูกแช่อยู่ได้ทันทีในน้ำเดือด 5 นาทีในการยับยั้งเอนไซม์ DP เริ่มต้นของส่วนผสมGOS-Lu มี monosaccharides จากการ octasaccharides. ต่อจากนั้นส่วนผสม GOS-Lu ถูก fractionated ใช้โคยกเว้นขนาดเพื่อที่จะเอา monoand disaccharides ตามวิธีการที่ก่อนหน้านี้นำไปใช้กับVivinal-GOS ?. 2.3 สายพันธุ์แบคทีเรียแลคโตบาซิลลัส bulgaricus ATCC7517 (LB) Lactobacillus casei ATCC11578 (LC) Lactobacillus delbrueckii subsp lactis ATCC4797 (LD) Lactobacillus plantarum ATCC8014 (LP1) L. plantarum WCFS1 (lp2) และแลคโตบาซิลลัส sakei 23K (LS) กำลังซื้อในแห้งรูปแบบและเก็บรักษาไว้ที่? 80? C สำหรับการจัดเก็บระยะยาว ทั้งหมดเหล่านี้สายพันธุ์ที่ได้รับการพิจารณาเป็นโปรไบโอติกตามที่รายงานก่อนหน้านี้ในการศึกษาที่แตกต่างกัน(เชน et al, 2004;. เรด 2008; ปาร์ค et al, 2008).. สายพันธุ์แช่แข็งแห้งปลูกในน้ำซุป Lactobacilli MRS หรือในLactobacilli MRS agar (เมอร์ค สารเคมี Gibbstown, นิวเจอร์ซีย์) ที่ 37 องศาเซลเซียสในห้องแบบไม่ใช้ออกซิเจน(CO2 10%: 5% H2: 85% N2) (ขี้อายห้องปฏิบัติการผลิตภัณฑ์Ann Arbor, MI) หลังจากการโอนผ่านผนึกกับสองการแลกเปลี่ยนก๊าซN2 ตามมาด้วย หนึ่งในการแลกเปลี่ยนของที่ปราศจากออกซิเจนก๊าซผสมขององค์ประกอบเช่นเดียวกับภายในห้อง. 2.4 เงื่อนไขการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ถูกปลูกในคาร์โบไฮเดรตสื่อ MRS พื้นฐานฟรีที่มี: 10 กรัม L 1 น้ำย่อยเปปโตน, 10 กรัม L 1 สารสกัดจากเนื้อวัว, 5 กรัม L 1? สารสกัดจากยีสต์ 1 กรัม L 1 Tween 80, 2 กรัม L 1? ซิเตรตแอมโมเนียม 5 กรัม L 1 acetate โซเดียม 0.1 กรัม L 1 แมกนีเซียมซัลเฟต, 0.05 กรัม L 1 แมงกานีสซัลเฟต, 2 กรัม L 1 ซัลเฟต dipotassium และ 0.5 กรัม L 1 cysteine- HCl กลูโคส lactulose, GOS-La และ GOS-Lu ละลาย inwater (10% w / v) และผ่านการฆ่าเชื้อโดยการกรองการแก้ปัญหานี้ถูกบันทึกอยู่ในสื่อMRS ฐานที่จะมีความเข้มข้นสุดท้ายของ 1% w / v บ่มได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่ 37 องศาเซลเซียส หัวเชื้อได้รับการจัดทำขึ้นจาก 48 ชั่วโมง MRS ปลูกเซลล์แลคโตบาซิลลัสและประมาณ 1 107 CFU ต่อมิลลิลิตรของแต่ละสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส (รายบุคคล) ถูกบันทึกอยู่ในสื่อฐาน MRS ที่มี 1% w / v ของน้ำตาลกลูโคส, lactulose, GOS-La หรือ GOS-Lu และบ่มเพาะกายภายใต้เงื่อนไขที่37 องศาเซลเซียส ระหว่างวันที่ 24, 48, 72 และ 120 ชั่วโมงนับทำงานได้ถูกดำเนินการโดยการชุบในอาหารเลี้ยงเชื้อMRS ในที่ซ้ำกัน การทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า. 2.5 แลคติกและกรดอะซิติกวิเคราะห์ตัวอย่างบ่มที่ 24, 48, และ 72 ชั่วโมงถูกหมุนเหวี่ยงที่ 13,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีเพื่อขจัดอนุภาคที่ไม่ละลายน้ำและแลคติกและกรดอะซิติกผลิตภัณฑ์หมักถูกวัดโดยใช้BioRad HPX-87H คอลัมน์ HPLC (เฟิร์ด สหราชอาณาจักร) ที่ 50 องศาเซลเซียสมี0.005 มิลลิ H2SO4 เป็นเฟสเคลื่อนที่ในโหมด isocratic ที่ไหลอัตรานาที0.6 มิลลิลิตร 1 (Sanz et al., 2005) การวิเคราะห์ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า. ตั้งแต่ระดับเล็ก ๆ น้อย ๆ ของกรดอะซิติกอยู่ในขั้นต้นอยู่ในน้ำซุปMRS ค่านี้ได้รับการวัดและหักออกจากจำนวนเงินที่คำนวณสำหรับตัวอย่างภายใต้การบ่ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

g50 สายพันธุ์ที่พบจะขึ้นอยู่กับแหล่งคาร์บอนที่
พวกเขาโตแล้ว อย่างไรก็ตาม ในการที่ดีที่สุดของความรู้ของเรา
ความต้านทานต่อระบบทางเดินอาหารเงื่อนไขของสายพันธุ์ Lactobacillus
โตในพรีไบโอติกคาร์โบไฮเดรต ไม่เคยได้รับการพิจารณา .
Valerio et al . ( 2006 ) รายงานผลการป้องกันของอาร์ติโช้คบน
แตกต่างกันโปรไบโอติกสายพันธุ์ในทางเดินอาหารที่อาจ
เป็นสมมุติฐาน ประกอบกับการปรากฏตัวของพรีไบโอติก คาร์โบไฮเดรต
และโครงสร้างทางกายภาพของผักเมทริกซ์
พรีไบโอติกจะนิยามว่า " ไม่ใช่ย่อยสารอาหารที่ประโยชน์ต่อ
โฮสต์ โดยเลือกกระตุ้นการเจริญเติบโตและ /
หรือกิจกรรมหนึ่งหรือจำนวน จำกัด ของแบคทีเรียในลําไส้ใหญ่ "
( Gibson et al . , 2004 ) มีคาร์โบไฮเดรตอยู่
พรีไบโอติกที่มีอยู่ในตลาดเช่น fructooligosaccharides แลคทูโลส
, , อินูลินและ galactooligosaccharides จากแล็กโตส ( QoS ลา ) ( rastall
, 2010 ) อย่างไรก็ตาม ขณะนี้มีความสนใจมากในการค้นพบของคาร์โบไฮเดรตที่มีคุณสมบัติใหม่

พรีไบโอติกที่มีศักยภาพ ของพวกเขา galactooligosaccharides จากแลคทูโลส ( QoS ลู่ )
เพิ่งได้เรียน ( cardelle cobas et al . , 2008 ; มาร์ติเนซ -
villaluenga et al . , 2008 ) ไปลู่ได้โดยปฏิกิริยา transgalactosylation
ของแลคทูโลส โดยการกระทำของ b-galactosidases
จากแหล่งที่มาของแบคทีเรียที่แตกต่างกัน ( cardelle cobas et al . ,
2008 ; มาร์ villaluenga et al . , 2008 ) เมื่อเร็วๆนี้มีรายงานว่า โก
ลู่ มีความสามารถในการส่งเสริมการเจริญเติบโตของ
Bifidobacteria ใช้ในหลอดทดลองหมักระบบมนุษย์
วัฒนธรรม ) ในลักษณะที่คล้ายกันเป็น Q2
เพิ่มสูง พรีไบโอติก โก ลา ( cardelle cobas et al . , 2009 ) .
ดังนั้น จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ เพื่อศึกษาการเจริญเติบโต
6 สายพันธุ์แลคโตบาซิลัส ปกติใช้ในการหมักอาหาร
กับพรีไบโอติกที่แตกต่างกัน ( ทูโลส ไปจาก แลคโตส กับ โก
จาก แลคทูโลส ) เป็นแหล่งคาร์บอนเพื่อตรวจสอบความต้านทาน
ที่แตกต่างกันสภาพทางเดินอาหาร ( กลุ่ม พันธมิตรประชาชนเพื่อประชาธิปไตยต่ำ
M , สารสกัดน้ำดี และ Pancreatin ) ไม่ชอบเป็นวัด
ยึดเหนี่ยวศักยภาพของแลคโตบาซิลลัส รวมทั้งกรดแลคติกและ
ความเข้มข้นผลิตในระหว่างการบ่มด้วย

แบบที่ 2 วัสดุและวิธีการ
2.1 . สารเคมี
กลูโคส ทูโลส น้ำดี สารสกัด และ a-amylase Pancreatin ( 1440
หน่วยต่อมิลลิกรัมโปรตีน ) จากตับอ่อน b-galactosidase จาก
Aspergillus oryzae ( 8.0 หน่วยต่อมิลลิกรัมโปรตีน ) และ n-hexadecane คือ
ซื้อจาก sigmaealdrich ( เซนต์หลุยส์ สหรัฐอเมริกา ) ที่แบคทีเรียเจริญเติบโตอาหารเสริมที่ได้รับจากสื่อ

gibbstown EMD สารเคมี , NJ . การ galactooligosaccharide จากแล็กโตส ( QoS ลา )
ได้จาก vivinal ไป  กรุณาให้โดยฟรีสแลนด์
อาหาร Domo ( Zwolle ,เนเธอร์แลนด์ ) ผลิตภัณฑ์นี้มี 73 เปอร์เซ็นต์
แห้ง องค์ประกอบที่เป็น 60 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักไป 20 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก
แลคโตส กลูโคส 19 เปอร์เซ็นต์ 1 เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนัก และกาแลคโตสตามที่ระบุไว้โดย
ซัพพลายเออร์ ดูฟาแลค  ( Solvay Pharma , บรัสเซลส์ , เบลเยียม ) คือใช้

ขอรับ galactooligosaccharides จากแลคทูโลส ( QoS ลู่ ) .
2.2 . การเตรียม galactooligosaccharides
เพื่อฟอก โก ลาอุตสาหกรรมผลิตภัณฑ์ vivinal -
ไป  เป็นลำดับการใช้ขนาดยกเว้น chromatography
ต่อไปนี้ส่งรายงานโดย เอร์นันเดซ . kgm ndez et al . ( 2009 ) กับ
ปรับเปลี่ยนบาง . ในช่วงสั้น ๆ , 80 ml vivinal ไป  ( 25 % w / v )
ฉีดในไบโอ เจล P2 ( ไบโอ ราด Hercules , CA , USA ) คอลัมน์
( 90  5 ซม. ) โดยใช้น้ำเป็นเฟสเคลื่อนที่ที่ 1.5 มิลลิลิตรต่อนาที  1 หก
เศษส่วน 10 มล รวบรวมไว้หลังจากใช้ปริมาณโมฆะ .
เศษส่วนระดับพอลิเมอไรเซชัน ( DP ) ถูกกำหนดโดยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า
ไอแมส ( esi-ms ) ในโหมดบวก
ตั้งแต่โมโนแซ็กคาไรด์จะ octasaccharides . เศษส่วน
กับ DP  3 พู และตรึงแห้ง
ลืมไปจากแลคทูโลสได้ตามวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( เคลเมนเต้ et al . , 2011 ) โซลูชั่น ( 450 กรัม / ลิตร 
1 ) ของ( ดูฟาแลคทูโลส  ) ถูกละลายในสารละลายโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และ 50 mm
ชุด 1 มม. pH 6.5 , หลังจากเพิ่ม 8 u +  1
b-galactosidase จาก A . oryzae ( Sigma , St . Louis , MO , USA ) และ
บ่มที่ 50  C เป็นเวลา 20 ชั่วโมง ในการต่อเนื่องที่ 300 รอบต่อนาที
หลังจากบ่ม , น้ำยาได้ทันทีแช่ในน้ำเดือด 5 นาที
ที่จะยับยั้งเอนไซม์ DP เริ่ม
ไปลู่ส่วนผสมที่มีอยู่จากโมโนแซ็กคาไรด์จะ octasaccharides .
ต่อมาผสมไปลู่เป็นลำดับ
โดยใช้ขนาดยกเว้นโครมาโตกราฟีเพื่อลบ monoand
น้ำตาลโมเลกุลคู่ ตามวิธีการเดิมที่ใช้ vivinal ไป 

.
2.3
atcc7517 แบคทีเรีย Lactobacillus bulgaricus Lactobacillus casei ( ปอนด์ ) ,
atcc11578 ( LC ) , Lactobacillus delbrueckii subsp .atcc4797 lactis
( LD ) , Lactobacillus plantarum atcc8014 ( LP1 ) , L . plantarum wcfs1
( lp2 ) และแลคโตบาซิลัส sakei 23 K ( LS ) ซื้อในรูปแบบแห้ง
และรักษาที่  80  C สำหรับการจัดเก็บระยะยาว สายพันธุ์เหล่านี้
ถือว่าเป็นโปรไบโอติกเป็นก่อนหน้านี้รายงาน
การศึกษาที่แตกต่างกัน ( Jain et al . , 2004 ; Reid , 2008 ; ปาร์ค et al . , 2008 ) .
ตรึงแห้งปลูกสายพันธุ์ Lactobacilli MRS broth หรือ
ใน Lactobacilli MRS agar ( EMD สารเคมี gibbstown , NJ ) ที่อุณหภูมิ 37  C
ในห้องแอโรบิค ( 10% CO2 : 5 % H2 : 85 % N2 ) ( เขินห้องปฏิบัติการ
ผลิตภัณฑ์ , Ann Arbor , Mi ) หลังจากโอนผ่านอากาศ
กับสอง การแลกเปลี่ยนก๊าซ N2 ตามด้วยหนึ่งตราของ
ฟรีออกซิเจนก๊าซผสมขององค์ประกอบเดียวกันเช่นภายในห้อง
.
2.4 .เงื่อนไข
การเจริญเติบโตของแบคทีเรียเติบโตในนางแรกเริ่มสื่อที่มีคาร์โบไฮเดรตฟรี
: 10 กรัม ผม  1 เเปปโตน , 10 g l  1 สารสกัดจากเนื้อ 5 กรัมต่อลิตร  1
ยีสต์สกัด 1 กรัม ผม  1 Tween 80 , 2 G L  1 แอมโมเนียมซิเตรต 5 กรัมต่อลิตร  1
โซเดียมอะซิเตท 0.1 g l  1 แมกนีเซียมซัลเฟต , 0.05 กรัมต่อลิตร  แมงกานีสซัลเฟต 1
2 g l  1 ไดซัลเฟตและ 0.5 กรัม ผม  1 ซีสเตอีน -
HCL . กลูโคส , ทูโลสโก ลา โกลูและละลายใน
( % w / v 10 ) และฆ่าเชื้อโดยการกรองโซลูชั่นนี้ ได้เพิ่ม

คุณนายแรกเริ่มสื่อถึงความเข้มข้นสุดท้าย 1% w / v .
4 ได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขแบบที่ 37  ถูกเตรียมจากเชื้อ C .
ชั่วโมง 48 นางโตแลคโตบาซิลัส เซลล์ ประมาณ
1  107 CFU ต่อมิลลิลิตรของแต่ละสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส ( แยก )
ถูกเพิ่มไปยังคุณนายแรกเริ่มสื่อที่มี 1% w / v ของกลูโคส
ทูโลส โก ลา หรือ โกลู โดยภายใต้เงื่อนไข anaerobic
, 37  C ระหว่าง 24 , 48 , 72 และ 120 ชั่วโมงได้นับ
ดำเนินการโดยชุบบนนางวุ้นในที่ซ้ำกัน โดย
ทดลองทั้งสามใบ
2.5 กรดแลกติก และวิเคราะห์
บ่มตัวอย่างที่ 24 , 48 และ 72 ชั่วโมงระดับที่
13000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีเพื่อเอาอนุภาคที่ไม่ละลายน้ำและ
แลคติกและกรดน้ำส้มการหมักผลิตภัณฑ์มีปริมาณการใช้ : biorad hpx-87h HPLC คอลัมน์ ( วัตฟอร์ด , UK ) ที่ 50  C ,
กรดซัลฟิวริกเป็น 0.005 มม. เป็นเฟสเคลื่อนที่ ในโหมด Isocratic ที่ไหล
อัตรา 0.6 มิลลิลิตรต่อนาที  1 ( ซานซ์ et al . , 2005 ) การวิเคราะห์ครั้งนี้

ออกทั้งสามใบตั้งแต่ระดับรองของกรดเริ่มต้นในปัจจุบัน
ซุปคุณค่านี้คือปริมาณและหักออกจากยอดเงินที่คำนวณสำหรับ
ตัวอย่างภายใต้การบ่ม