The 1,3-1,6-beta-glucans were determined in quadruplicate using an assay kit (Megazyme Ltd., Bray, Wicklow County, Ireland) according to the manufacturer’s instructions. All enzymes used were purchased from Megazyme Ltd. The dried mushroom samples (100 mg) were milled using an analytical mill (IKA GmbH, Staufen, Germany), sieved using a 0.5 mm screen and weighed into culture tubes, and 1.5 mL of concentrated HCl (37%) was added. After heating at 30 C for 45 min, 10 mL of distilled water was added, and the samples were incubated in a boiling water bath for 2 h. After a neutralization step with 2 M KOH, the samples were adjusted to 100 mL with a sodium acetate buffer (pH 5.0). To measure the total glucan contents, 0.1 mL aliquots were mixed with exo-1,3-beta-glucanase (20 U/mL) and beta-glucosidase (4 U/mL) and incubated in a water bath at 40 C for 60 min. Then, 3 mL of glu cose-oxidase-peroxidase-reagent (GOPOD) was added and again incubated at 40 C for 20 min.
1,3-1,6 เบต้ากลูแคนได้รับการพิจารณาใน quadruplicate โดยใช้ชุดทดสอบ (Megazyme? Ltd. , เบรย์วิคโลว์เคาน์ตี้ไอร์แลนด์) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เอนไซม์ทั้งหมดที่ใช้ซื้อมาจาก Megazyme? จำกัด แห้งตัวอย่างเห็ด (100 มก.) ได้รับการขัดสีโดยใช้โรงงานวิเคราะห์ (IKA GmbH, Staufen, เยอรมนี) ร่อนโดยใช้หน้าจอ 0.5 มิลลิเมตรและหนักเข้าไปในท่อวัฒนธรรมและ 1.5 มิลลิลิตรเข้มข้น HCl (37%) ถูกเพิ่มเข้ามา หลังจากความร้อนที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 นาที, 10 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นที่เพิ่มขึ้นและกลุ่มตัวอย่างถูกบ่มในอ่างน้ำเดือดเป็นเวลา 2 ชั่วโมง หลังจากขั้นตอนการวางตัวเป็นกลางมี 2 M เกาะกลุ่มตัวอย่างมีการปรับถึง 100 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์โซเดียมอะซิเตท (pH 5.0) การวัดเนื้อหากลูแคนรวม 0.1 มล aliquots ถูกผสมกับ EXO-1,3-glucanase เบต้า (20 U / มิลลิลิตร) และเบต้ากลูโค (4 U / มิลลิลิตร) และบ่มในอ่างน้ำที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที จากนั้น 3 มล Glu cose-oxidase-peroxidase-น้ำยา (GOPOD) คือการเพิ่มและการบ่มที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีอีกครั้ง
การแปล กรุณารอสักครู่..

ซึ่งประกอบด้วยสี่ส่วนที่ใช้ในการ 1,3-1,6-beta-glucans ใช้ Kit ( megazyme จำกัด Bray , Wicklow County ไอร์แลนด์ ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เอนไซม์ที่ใช้ทั้งหมดซื้อมาจาก megazyme ltd เห็ดแห้งตัวอย่าง ( 100 มก. ) สารโดยใช้โรงสีวิเคราะห์ ( Ika GmbH , Staufen , เยอรมนี ) , การใช้หน้าจอขนาด 0.5 มม. และน้ำหนักในงานเย็บปักถักร้อยและ 1.5 ml เข้มข้น HCl ( 37% ) ถูกเพิ่มเข้ามา หลังจากความร้อนที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 นาที , 10 มล. น้ำกลั่นเพิ่ม และจำนวนเชื้อในอ่างน้ำเดือดเป็นเวลา 2 ชั่วโมง หลังจากขั้นตอนการวางตัวเป็นกลางด้วย 2 M เกาะ , เปรียบเทียบปรับ 100 ml ด้วยโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.0 ) การวัดปริมาณกลูแคนทั้งหมด 0.1 มิลลิลิตร ผสม exo-1,3-beta-glucanase เฉยๆ ( 20 U / ml ) และเบต้ากลูโคซิเดส ( 4 U / ml ) บ่มในน้ำอาบน้ำที่อุณหภูมิ 40 C เป็นเวลา 60 นาที จากนั้น 3 มิลลิลิตรเอนไซม์เปอร์ออกซิเดส Reagent ( GLU กว่ gopod ) คือการเพิ่มและบ่มที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 อีก มิน
การแปล กรุณารอสักครู่..
