A new mazF-based strategy for large

A new mazF-based strategy for large-scale and scarless genome rearrangements in Saccharomyces cerevisiae was developed. We applied this method to delete designed internal (26.5 kbp) and terminal (28.9 kbp) regions located on the left arm of the chromosome XI of S. cerevisiae BY4741. The number of transformants was increased by one order of magnitude and about 90% of tested colonies were desired integrants using in vivo assembled deletion cassette containing longer flanking homology. Compared to conventional URA3 marker, in the counter-selection process, the new system generated 2–13 folds more colonies and the ratio of deletant was simultaneously elevated by 20–24%.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

MazF ตามกลยุทธ์ใหม่สำหรับกลุ่มขนาดใหญ่ และ scarless rearrangements ใน Saccharomyces cerevisiae ได้รับการพัฒนา เราใช้วิธีการนี้จะลบออกแบบภายใน (26.5 kbp) และเทอร์มินัล (28.9 kbp) ภูมิภาคที่ตั้งอยู่บนแขนซ้ายของโครโมโซม XI ของ S. cerevisiae BY4741 เพิ่มขึ้นจำนวน transformants โดยหนึ่งสั่งของขนาด และประมาณ 90% ของอาณานิคมที่ทดสอบได้ integrants ต้องใช้เทปลบ vivo ประกอบประกอบด้วย homology flanking อีกต่อไป เมื่อเทียบกับเครื่องหมาย URA3 ทั่วไป ในกระบวนการเลือกเคาน์เตอร์ ระบบใหม่สร้างพับ 2 – 13 อาณานิคมมากกว่า และอัตราส่วนของ deletant ถูกยกระดับพร้อมกัน 20-24%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ใหม่กลยุทธ์ mazF ที่ใช้สำหรับการขนาดใหญ่และ rearrangements จีโนม scarless ใน Saccharomyces cerevisiae ได้รับการพัฒนา เราใช้วิธีนี้เพื่อลบการออกแบบภายใน (26.5 KBP) และสถานี (28.9 KBP) ภูมิภาคท​​ี่ตั้งอยู่บนแขนซ้ายของโครโมโซม XI ของ S. cerevisiae BY4741 จำนวน transformant ที่เพิ่มขึ้นโดยหนึ่งในลำดับความสำคัญและประมาณ 90% ของการทดสอบเป็นอาณานิคม integrants ที่ต้องการใช้ในร่างกายประกอบการลบเทปคาสเซ็ทที่มีความคล้ายคลึงกันอีกต่อไปขนาบข้าง เมื่อเทียบกับเครื่องหมาย URA3 ทั่วไปในกระบวนการต่อต้านการเลือกระบบใหม่ที่สร้าง 2-13 เท่าอาณานิคมมากขึ้นและอัตราส่วนของ Deletant อยู่สูงขึ้นไปพร้อม ๆ กันโดย 20-24%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็น mazf ใหม่โดยใช้กลยุทธ์สำหรับขนาดใหญ่ และ scarless rearrangements ในจีโนม Saccharomyces cerevisiae คือการพัฒนา เราใช้วิธีนี้ เพื่อ ลบ ออกแบบภายใน ( 26.5 kbp ) และ Terminal ( 28.9 kbp ) ภูมิภาคตั้งอยู่บนแขนซ้ายของโครโมโซมคู่ที่ 11 ของ S . cerevisiae by4741 .หมายเลขของ transformants เพิ่มขึ้นหนึ่งอันดับของปริมาณและประมาณ 90% ของทดสอบอาณานิคมได้ถูกใช้โดยให้ชื่อว่า S4 ที่ต้องการประกอบการลบเทปที่มี flanking ตัวอีกต่อไป . เทียบกับเครื่องหมาย ura3 ปกติ เคาน์เตอร์กระบวนการคัดเลือก ระบบใหม่สร้างขึ้น 2 เท่ามากกว่า– 13 อาณานิคม และอัตราส่วนของ deletant พร้อมกันสูง 20 - 24 %