2.3. Identification of the selected

2.3. Identification of the selected thermotolerant yeast strain
The selected yeast strain was morphologically, physiologically
and biochemically characterized by standard
methods described by Yarrow (1998). Assimilation of
nitrogen compounds was examined on solid media with
starved inocula following the method of Nakase and
Suzuki (1986). Growth at various temperatures was determined
by cultivation on YM agar and in YM broth using
an incubator and a water bath, respectively.
Identification and phylogenetic analysis of the yeast
strain based on comparative analysis of the sequence of
the D1/D2 domain of the large-subunit (LSU) rDNA
was carried out. The sequencing of the D1/D2 domain of
the LSU rDNA was carried out from PCR products of
genomic DNA fragments that were extracted from yeast
cells by the method of Lachance et al. (1999) with slight
modifications. The D1/D2 domain of the LSU rDNA
was amplified by PCR with forward primer NL-1 and
reverse primer NL-4 (O’Donnell, 1993). The PCR product
was checked by agarose gel electrophoresis, purified using
QIA Quick Purification Kit (Qiagen, Ontario, USA) and
cycle-sequenced using the ABI BigDye Terminator Cycle
Sequencing Kit Version. 3.1 (Applied Biosystems, California,
USA) with the external primers NL-1 and NL-4
(Kurtzman and Robnett, 1998). The sequences were determined
with an ABI PRISM 3100 automated DNA sequencer
(Applied Biosystems, California, USA) according to the
instructions of the manufacturer. The sequences were compared
pairwise using the BLAST homology search (

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การระบุสายพันธุ์ยีสต์ thermotolerant เลือก
สายพันธุ์ยีสต์ที่เลือกถูก morphologically, physiologically
และลักษณะตามมาตรฐาน biochemically
วิธีอธิบาย โดย Yarrow (1998) ผสมกลมกลืนของ
สารประกอบไนโตรเจนถูกตรวจสอบบนสื่อแข็ง
starved inocula ตามวิธีของ Nakase และ
ซูซูกิ (1986) เจริญเติบโตที่อุณหภูมิต่าง ๆ ได้กำหนด
โดยปลูก บน YM agar และ YM ซุป
การบ่มเพาะวิสาหกิจและน้ำอ่างอาบน้ำ ตามลำดับ.
รหัสและวิเคราะห์ phylogenetic ยีสต์
ต้องใช้ตามลำดับของการวิเคราะห์เปรียบเทียบ
โดง 1/D2 ของ rDNA ขนาดใหญ่งานย่อย (ชุดปั๊มหมึก)
ถูกดำเนินการ ลำดับของโดง 1/D2 ของ
rDNA ชุดปั๊มหมึกที่ทำจากผลิตภัณฑ์ PCR
genomic ชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่สกัดได้จากยีสต์
เซลล์ โดยวิธีการของรับบทเอ็ด al. (1999) ด้วยเล็กน้อย
แก้ไข โดง 1/D2 ของ rDNA ชุดปั๊มหมึก
ขยาย โดย PCR กับพื้นไปข้างหน้า NL 1 และ
กลับพื้น NL-4 (O'Donnell, 1993) ผลิตภัณฑ์ PCR
ถูกตรวจสอบ โดย agarose electrophoresis เจล บริสุทธิ์ใช้
ชุดฟอกด่วน QIA (Qiagen ออนตาริโอ สหรัฐอเมริกา) และ
วงจรเรียงลำดับใช้ ABI BigDye เทอร์มิเนเตอร์วนรอบ
รุ่นชุดลำดับเบส 3.1 (Biosystems ใช้ แคลิฟอร์เนีย,
สหรัฐอเมริกา) กับไพรเมอร์ภายนอก NL 1 และ NL-4
(Kurtzman และ Robnett, 1998) มีกำหนดลำดับที่
กับ 3100 เป็นปริซึม ABI อัตโนมัติ DNA sequencer
(ใช้ Biosystems แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) ตาม
คำแนะนำของผู้ผลิต มีการเปรียบเทียบลำดับที่
ใช้ระเบิด homology ค้นหา(pairwise

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การเลือกสารยีสต์สายพันธุ์ยีสต์สายพันธุ์ถูก

biochemically จาก physiologically และลักษณะโดยมาตรฐาน
วิธีการอธิบายโดยโรว์ ( 1998 ) การผสมผสานของสารประกอบไนโตรเจนที่ถูกตรวจสอบสื่อ

หิว inocula แข็งที่มีต่อวิธีการของ nakase และ
ซูซูกิ ( 1986 ) การเจริญเติบโตที่อุณหภูมิต่างตั้งใจ
โดยในการปลูกและการใช้น้ำวุ้น
ตู้ฟักไข่ และอาบ น้ำ การจำแนกและการวิเคราะห์ phylogenetic
สายพันธุ์ของยีสต์
ขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์เปรียบเทียบลำดับ
D1 / D2 โดเมนของหน่วยย่อยขนาดใหญ่ ( LSU ) rDNA
ได้ดําเนินการ การจัดลำดับของ D1 / D2
โดเมนของ rDNA พบว่า PCR LSU จากผลิตภัณฑ์
จีโนมดีเอ็นเอที่สกัดจากเซลล์ยีสต์
โดยวิธีการของ lachance et al . ( 1999 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย

D1 / D2 โดเมนของ LSU rDNA
ถูกขยายโดยวิธี PCR ด้วย primer รองพื้น nl-1 ไปข้างหน้าและย้อนกลับ nl-4
( O ' Donnell , 1993 ) pcr ผลิตภัณฑ์
ถูกตรวจสอบโดยเจลอิเล็กบริสุทธิ์ใช้
ชุดฟอกรวดเร็วมั่น ( QIAGEN , Ontario , สหรัฐอเมริกา ) และ
วงจรนี้ใช้อบิ bigdye Terminator รอบ
ลำดับรุ่นชุด 3.1 ( Applied Biosystems , California ,
USA ) ด้วยไพรเมอร์และภายนอก nl-1 nl-4
( เคิร์ทแมน และ robnett , 1998 ) อนุกรมถูกกำหนดด้วยปริซึม 3100

ปลายลำดับ DNA แบบอัตโนมัติ ( Applied Biosystems , California , USA ) ตาม
คําแนะนําของผู้ผลิต ลำดับการเปรียบเทียบ
คู่การใช้ระเบิด ( ตัวค้นหา