GFP-marked bacteria can be detected

GFP-marked bacteria can be detected by several methods. Direct microscopy of gfp-marked bacteria is simple using an epifluorescent microscope with a GFP filter kit, and bacterial counts are rapid and precise (Leff and Leff, 1996). In our laboratory,using cells marked with the red-shifted mutant, and a filter kit (e.g., Chroma Technology Corp., Brattleboro, VT: excitation wavelength, 420–470 nm; emission wavelength 490–530 nm) individual cells are easy to see and count, fluorescing bright green on a black background. A model 120es 1.2 million pixel digital camera system (Pixera Corp., 140 Knowles Drive, Los Gatos, CA 95030, USA) interfaced with a PC is routinely used for imaging individual cells and colonies. Bloemberg et al. (1997) observed one or a few GFP-marked cells in a background of .10 unlabelled cells on a wet mount slide. An epifluorescent microscope equipped with a standard fluorescein isothiocyanate (FITO) filter set is also effective for the detection of gfp red-shifted mutants which have excitation and emission maxima at 488 and 510 nm, respectively (Cormack et al., 1996). Interfacing an epifluorescent microscope with a charged-coupled device (CCD) camera and image analysis software can enhance and allow quantification of the fluorescence of individual gfp-tagged bacteria. Since the wild-type gfp only has a minor excitation peak at 475 nm, visualization of bacteria labelled with the wild-type gfp through this filter set will not be optimal. Although a DAPI (496-diamidino-2-phenylindole) filter set with excitation and barrier filters of 330–380 and 435 nm, respectively, are suitable for wild-type gfp detection, the fluorescent protein is subject to a high level of photobleaching under short wavelength excitation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แบคทีเรีย GFP เครื่องหมายสามารถตรวจพบโดยวิธีการหลายวิธี กล้องจุลทรรศน์โดยตรงแบคทีเรีย GFP เครื่องหมายเป็นเรื่องง่ายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ epifluorescent กับชุด GFP กรองและปริมาณแบคทีเรียมีความรวดเร็วและแม่นยำ (Leff และ Leff, 1996) ในห้องปฏิบัติการของเราโดยใช้เซลล์ที่มีเครื่องหมายสีแดงขยับตัวกลายพันธุ์และชุดตัวกรอง (เช่นสีมาเทคโนโลยีคอร์ป, เวอร์มอนต์. ความยาวคลื่นกระตุ้น 420-470 นาโนเมตร;ปล่อยความยาวคลื่น 490-530 นาโนเมตร) แต่ละเซลล์เป็นเรื่องง่ายที่จะเห็นและนับเรืองแสงสีเขียวสดใสบนพื้นหลังสีดำ แบบ 120es 1.2 ล้านพิกเซลกล้องระบบดิจิตอล (pixera Corp., 140 ไดรฟ์ Knowles, Los Gatos, CA 95030, USA) เชื่อมต่อกับคอมพิวเตอร์ถูกนำมาใช้เป็นประจำสำหรับการถ่ายภาพแต่ละเซลล์และอาณานิคม อัล bloemberg et(1997) ตั้งข้อสังเกตหนึ่งหรือเซลล์ GFP เครื่องหมายไม่กี่ในพื้นหลังของเซลล์ 0.10 ป้ายกำกับบนภาพนิ่งติดเปียก กล้องจุลทรรศน์ epifluorescent พร้อมกับ fluorescein isothiocyanate มาตรฐาน (Fito) ชุดกรองยังมีประสิทธิภาพในการตรวจหาการกลายพันธุ์ของ GFP แดงขยับตัวไปมาซึ่งมีการกระตุ้นและการปล่อยก๊าซเรือนกระจกสูงสุดที่ 488 และ 510 นาโนเมตรตามลำดับ (แมคค์, et al., 1996)เชื่อมต่อกับกล้องจุลทรรศน์ epifluorescent อุปกรณ์ชาร์จคู่ (CCD) กล้องและซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ภาพสามารถเพิ่มและช่วยให้ปริมาณการเรืองแสงของแบคทีเรีย GFP ที่ติดแท็กบุคคล ตั้งแต่ GFP ป่าชนิดเท่านั้นที่มีการกระตุ้นยอดเขาเล็ก ๆ น้อย ๆ ที่ 475 นาโนเมตร, การสร้างภาพของแบคทีเรียกำกับด้วย GFP wild-type ผ่านชุดกรองนี้จะไม่ดีที่สุดแม้ว่า DAPI (496-diamidino-2-phenylindole) ชุดกรองกับตัวกรองการกระตุ้นและอุปสรรคจาก 330-380 และ 435 นาโนเมตรตามลำดับมีความเหมาะสมสำหรับการตรวจสอบ GFP wild-type, โปรตีนเรืองแสงเป็นเรื่องที่อยู่ในระดับสูงภายใต้ photobleaching กระตุ้นความยาวคลื่นสั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แบคทีเรีย GFP ทำเครื่องหมายจะถูกตรวจพบ โดยวิธีการต่าง ๆ Microscopy ตรงของแบคทีเรีย gfp ทำเครื่องหมายเป็นเรื่องง่ายด้วยกล้องจุลทรรศน์ epifluorescent เป็นชุดตัวกรองการ GFP และนับจำนวนแบคทีเรียได้อย่างรวดเร็ว และแม่นยำ (Leff และ Leff, 1996) ในห้องปฏิบัติการของเรา โดยใช้เซลล์เครื่อง mutant เปลี่ยนสีแดง และชุดตัวกรอง (เช่น Brattleboro, VT ความเทคโนโลยี คอร์ป: ความยาวคลื่นในการกระตุ้น 420–470 nm มลพิษความยาวคลื่น 490–530 nm) เซลล์แต่ละเซลล์ง่ายต่อการดู และ นับ fluorescing เขียวสดใสบนพื้นหลังสีดำ เป็นประจำใช้ 120es รุ่นที่ 1.2 ล้านพิกเซลกล้องดิจิตอลระบบ (Pixera Corp., 140 โนวส์ไดรฟ์ Los Gatos, CA 95030 สหรัฐอเมริกา) interfaced กับพีซีสำหรับการถ่ายภาพแต่ละเซลล์และอาณานิคม Bloemberg et al (1997) สังเกตหนึ่ง หรือไม่กี่ GFP ทำเครื่องหมายไว้เซลล์ในพื้นหลังของเซลล์ unlabelled .10 บนภูเขาเปียกภาพนิ่ง กล้องจุลทรรศน์ epifluorescent การติดตั้งชุดตัวกรองมาตรฐาน fluorescein isothiocyanate (FITO) เป็นการตรวจหาสาย gfp เปลี่ยนสีแดงพันธุ์ซึ่งมีแมกในการกระตุ้นและปล่อยก๊าซที่ 488 และ 510 nm ตามลำดับ (Cormack et al., 1996) เชื่อมเป็นกล้องจุลทรรศน์ epifluorescent กับการคิดควบคู่อุปกรณ์ (CCD) กล้องและรูปวิเคราะห์ซอฟต์แวร์สามารถเพิ่ม และให้นับ fluorescence ของแต่ละแท็ก gfp แบคทีเรีย ตั้งแต่ gfp ชนิดป่าได้สูงสุดในการกระตุ้นรองเท่าที่ 475 nm แสดงภาพประกอบเพลงของแบคทีเรีย labelled ด้วย gfp ป่าชนิดผ่านตัวกรองชุดนี้จะไม่เหมาะสม แม้ว่าตัว DAPI (496-diamidino-2-phenylindole) ตั้งค่าตัวกรองในการกระตุ้นและอุปสรรคของ 330–380 และ 435 nm ตามลำดับ เหมาะสำหรับการตรวจหาชนิดป่า gfp โปรตีนเรืองแสงเป็น photobleaching ภายใต้ในการกระตุ้นความยาวคลื่นสั้นในระดับที่สูงขึ้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แบคทีเรีย gfp - ทำเครื่องหมายไว้จะได้รับการตรวจพบจากหลายวิธี การตรวจวิเคราะห์สารเคมีโดยตรงของเชื้อแบคทีเรีย gfp - ทำเครื่องหมายเป็นแบบเรียบง่ายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ epifluorescent พร้อมด้วยชุดแผ่นกรอง gfp และนับจากแบคทีเรียได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำ( leff และ leff 1996 ) ในห้องปฏิบัติการของเราเซลล์โดยใช้เครื่องหมายสีแดง - หันไป mutant และชุดแผ่นกรอง(เช่น CHROMA คือเทคโนโลยีแบงกิ้งคอร์ปอเรชั่น brattleboro VT ความยาวคลื่นไดนาโม)ด้วยไฟฟ้า 420-470 nmการปล่อยคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้าความยาวคลื่น 490-530 nm )แต่ละเซลล์ได้อย่างง่ายดายเพื่อดูและนับ fluorescing สว่างสดใสสีเขียวบนพื้นหลังสีดำ รุ่น 120 เอส 1.2 ล้านพิกเซลระบบกล้องดิจิตอล( pixera Corp ., 140 knowles ขับรถ, Los gatos , CA 95030 , USA )เชื่อมต่อกับเครื่องพีซีถูกนำมาใช้อย่างสม่ำเสมอสำหรับการถ่าย ภาพ บุคคลเซลล์และอาณานิคม. bloemberg et al .( 1997 )พบว่าหนึ่งหรือเซลล์ gfp - ทำเครื่องหมายไว้ไม่กี่แห่งที่หนึ่งในพื้นหลังของอัตรา .10 เซ็นต์ unlabelled เซลล์ที่เปียก,ติดตั้งบนผนัง, ภาพ สไลด์ epifluorescent กล้องจุลทรรศน์ที่จัดให้บริการด้วยมาตรฐานรักษาตัวหิน isothiocyanate ( fito )แผ่นกรองตั้งค่าเป็นยังมีผลบังคับใช้สำหรับการตรวจจับ gfp สีแดง - หันไปข้าวเจ้าที่มีไดนาโม)ด้วยไฟฟ้าและลดการปล่อยขีดสูงสุดที่ 488 และ 510 nm ,ตามลำดับ( cormack et al ., 1996 )การอินเตอร์เฟซกล้องจุลทรรศน์ epifluorescent พร้อมด้วยจึงจำเป็นต้องมีแบตเตอรี่เต็ม - ประกอบอุปกรณ์( CCD )กล้องและซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ ภาพ สามารถช่วยเพิ่ม ประสิทธิภาพ และช่วยให้มีคุณสมบัติฟลูเรซ - เซ็นซของแบคทีเรีย gfp - แท็กแต่ละรายได้ นับตั้งแต่ gfp ป่า - พิมพ์ที่มีไดนาโม)ด้วยไฟฟ้าเพียงเล็กน้อยสูงสุดที่ 475 nm จอภาพ ของแบคทีเรียมีป้ายที่มี gfp ป่า - พิมพ์โดยผ่านชุดแผ่นกรองนี้จะไม่ได้ดีที่สุดแม้ว่า dapi ( 496 - diamidino 2 - phenylindole )แผ่นกรองที่ตั้งค่าด้วยตัวกรองอุปสรรคและไดนาโม)ด้วยไฟฟ้าของ nm 330-380 และ 435 ตามลำดับมีความเหมาะสมสำหรับการตรวจจับ gfp ป่า - ประเภท โปรตีนจากแสงฟลูออเรสเซนต์จะขึ้นอยู่กับระดับสูงของ photobleaching ตามไดนาโม)ด้วยไฟฟ้าความยาวคลื่นเพื่อไปถึงได้ไม่ไกลนัก