azakenpaullone, a selective inhibit

azakenpaullone, a selective inhibitor of Gsk3β [49] that
has been shown to trigger nuclear β-catenin accumulation
in Platynereis, mimicking ectopic activation of Wnt signaling
[47,50]. We found that azakenpaullone specifically
knocked down or abolished apical expression of episphere
markers, including the broadly expressed six3 (Figure 5A)
and foxq2 (Figure 5B) in a concentration-dependent manner,
with the majority of expression reduced or lost between
1 μM and 5 μM (Figure 5). Conversely, the
expression of pax6, which occupies a more ventral peripheral
position in the larval episphere [51] (overlapping with
Wnt4; Figure 4E), was expanded at 0.5 μM to 10 μM
concentrations of azakenpaullone (Figure 5E). The number
of otp + apical organ cells was also reduced at higher
concentrations of azakenpaullone (Figure 5C), with all
cells absent at 5 and 10 μM concentrations. By contrast,
the expression of hox1 in the apical tuft cells persisted
at all concentrations (Figure 5D, arrows). This may
have been because tuft cells are among the first cells
to differentiate in the apical plate (Figure 6A). To
test the dynamic role of Wnt signaling in episphere
patterning, we conducted washout experiments in

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

azakenpaullone ผลงานของ Gsk3β [49] ที่จะทริกเกอร์สะสมนิวเคลียร์β-cateninใน Platynereis, mimicking เปิดใช้งาน ectopic Wnt ตามปกติ[47,50] เราพบว่า azakenpaullone โดยเฉพาะโบว์ลิ่งลง หรือยุตินิพจน์ปลายยอดของ episphereเครื่องหมาย รวมถึง six3 แสดงอย่างกว้างขวาง (รูปที่ 5 a.)และ foxq2 (รูป 5B) ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นกับส่วนใหญ่ของนิพจน์ลดลง หรือหายไประหว่าง1 μM และ 5 μM (5 รูป) ในทางกลับกัน การของ pax6 ซึ่งใช้อุปกรณ์ต่อพ่วงเพิ่มเติม ventralวางใน episphere larval [51] (ทับซ้อนด้วยWnt4 รูป 4e-fe กลไก), ถูกขยายที่ 0.5 μM เพื่อ 10 μMความเข้มข้นของ azakenpaullone (5e คือแบบรูป) หมายเลขotp +เซลล์อวัยวะปลายยอดถูกยังลดที่สูงขึ้นความเข้มข้นของ azakenpaullone (รูปที่ 5C), มีทั้งหมดเซลล์ขาดที่ความเข้มข้น μM 5 และ 10 โดยคมชัดค่าของ hox1 ในเซลล์ปลายยอดปุยที่ยังคงอยู่ที่ทุกความเข้มข้น (รูป 5D ลูกศร) พฤษภาคมนี้ได้เนื่องจากเซลล์ปุยระหว่างเซลล์แรกการแยกความแตกต่างในแผ่นปลายยอด (รูปที่ 6A) ถึงทดสอบบทบาทแบบไดนามิกของ Wnt ตามปกติใน episphereเรา patterning ดำเนินไปกวาดออกทดลองใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

azakenpaullone, ยับยั้งเลือกGsk3β [49]
ที่ได้รับการแสดงที่จะเรียกการสะสมβ-catenin นิวเคลียร์ใน Platynereis ล้อเลียนยืนยันการใช้งานนอกมดลูกของ Wnt สัญญาณ [47,50] เราพบว่า azakenpaullone เฉพาะล้มลงหรือยกเลิกการแสดงออกปลายของepisphere เครื่องหมายรวมทั้งแสดงความกว้าง six3 (รูป 5A) และ foxq2 (รูปที่ 5B) ในลักษณะความเข้มข้นขึ้นอยู่กับการมีส่วนใหญ่ของการแสดงออกลดลงหรือหายไประหว่าง1 ไมครอนและ 5 ไมครอน (รูปที่ 5) ตรงกันข้ามการแสดงออกของ pax6 ซึ่งตรงอุปกรณ์ต่อพ่วงหน้าท้องมากขึ้นตำแหน่งใน episphere ตัวอ่อน [51] (ที่ทับซ้อนกันกับ Wnt4; รูป 4E) ได้รับการขยายตัวที่ 0.5 ไมครอน 10 ไมครอนมีความเข้มข้นของazakenpaullone (รูป 5E) จำนวนของ OTP + เซลล์อวัยวะยอดลดลงยังสูงกว่าความเข้มข้นของazakenpaullone (รูป 5C) กับเซลล์ขาดที่5 และ 10 ไมครอนมีความเข้มข้น ในทางตรงกันข้ามการแสดงออกของ hox1 ในเซลล์กระจุกปลายยืนกรานที่ความเข้มข้นทั้งหมด(รูป 5D, ลูกศร) นี้อาจได้รับเพราะเซลล์กระจุกอยู่ในหมู่เซลล์แรกที่จะแยกความแตกต่างในแผ่นปลาย(รูปที่ 6A) เพื่อทดสอบบทบาทแบบไดนามิกของการส่งสัญญาณใน Wnt episphere เลียนแบบเราทำการทดลองในการชะล้าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

azakenpaullone , ยับยั้งการ gsk3 บีตา [ 49 ]
ได้รับการแสดงเพื่อกระตุ้นการสะสมนิวเคลียร์บีตา - catenin
ใน platynereis เลียนแบบ ectopic , การส่งสัญญาณช่อง WNT
[ 47,50 ] เราพบว่า azakenpaullone เฉพาะ
ล้มลงหรือยกเลิกยอดการแสดงออกของ episphere
เครื่องหมายรวมทั้งกว้างแสดง six3 ตัวเลข ( 5A )
foxq2 และตัวเลข ( 5B ) ในความเข้มข้นขึ้นอยู่กับลักษณะ
กับส่วนใหญ่ของการแสดงออกลดลงหรือสูญหายระหว่างμ
1 M และ 5 μเมตร ( รูปที่ 5 ) ในทางกลับกัน ,
การแสดงออกของ pax6 ซึ่งตรงตำแหน่งที่ต่อพ่วง
) ในตัวอ่อน episphere [ 51 ] ( ซ้อนด้วย
wnt4 ; รูปจอฟ้า ) กำลังขยาย 0.5 μ M 10 μ M
ความเข้มข้นของ azakenpaullone ตัวเลข ( 5E ) หมายเลข
ปลายของอวัยวะเซลล์ยัง OTP ลดลงที่ความเข้มข้นสูงของ azakenpaullone
( รูปที่ 5 ) , กับ
เซลล์ขาดที่ 5 และ 10 μ M เข้มข้น โดยคมชัด
การแสดงออกของ hox1 ในเซลล์พู่ปลายหาย
ที่เข้มข้น ( ลูกศรรูป 5D ) นี้อาจเป็นเพราะปอย
เซลล์ระหว่างเซลล์แรก
เพื่อความแตกต่างในจานขยาย ( รูปที่ 6 )

การทดสอบแบบไดนามิกบทบาทของสัญญาณในช่อง WNT episphere
เลียนแบบ เราทำการทดลองในการชะล้าง