The extent of aspartic acid racemis

The extent of aspartic acid racemisation was determined as described by Ritz et al. [21] and Ritz-Timme [23], taking into account defined quality standards [26]. Briefly, 5 mg of purified and lyophilized elastin samples were hydrolysed in 6 N HCl at 100°C for 6 h. Hydrochloric acid and water were removed in a vacuum and the dry hydrolysate was esterified with isopropanol/sulfuric acid (10:1) for 1 h at 110°C. After alkaline extraction with dichloromethane, acetylation was performed with trifluoroacetic anhydride (TFAA) at 60°C for 15 min. Amino acids were now present as TFA isopropyl esters. The ratio of D-aspartic acid to L-aspartic acid was determined after separation of the amino acids by gas chromatography (GC-2014, Shimadzu, Duisburg, Germany) on a chiral capillary column (Chirasil-L-Val 25 m×0.25 mm, Varian, Middelburg, The Netherlands) using a flame ionisation detector, with hydrogen as carrier gas. The samples were analysed at least in duplicate. Signals were identified using external standard substances and the extent of AAR was calculated as the D/L ratio.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พิจารณาขอบเขตของกรด racemisation ตามที่อธิบายไว้ โดยริทซ์ et al. [21] และริทซ์-Timme [23], ในมาตรฐานบัญชีที่กำหนดไว้ [26] สั้น ๆ 5 มิลลิกรัมตัวอย่างบริสุทธิ์ และ lyophilized สติได้ถูกย่อยใน 6 N HCl ที่ 100° C สำหรับกรดไฮโดรคลอริก 6 h. และน้ำถูกเอาออกในสุญญากาศ และฉีดแห้งถูก esterified กรดกำมะถัน isopropanol (10:1) สำหรับ h 1 ที่ 110 องศาเซลเซียส หลังจากสกัดอัลคาไลน์ด้วย dichloromethane, acetylation ดำเนินการกับ trifluoroacetic ด (TFAA) ที่อุณหภูมิ 60° C สำหรับ 15 นาทีกรดอะมิโนมีขณะนี้ปัจจุบัน TFA isopropyl esters กำหนดอัตราส่วนของกรดแอสพารากิน D L-กรดหลังจากการแยกกรดอะมิโน โดยก๊าซ chromatography (GC 2014, Shimadzu ดุยส์บูร์ก เยอรมัน) คอลัมน์ฝอยสารเคมี chiral อนุ (Chirasil-L-Val 25 เมตร× 0.25 มม. Varian เนเธอร์แลนด์ ออสเตรเลียและแปซิฟิกใต้) ด้วยเครื่องตรวจจับ ionisation เปลวไฟ ไฮโดรเจนเป็นผู้ขนส่งก๊าซ มีวิเคราะห์ตัวอย่างน้อยในรายการซ้ำ ระบุสัญญาณใช้สารมาตรฐานภายนอก และขอบเขตของ AAR ถูกคำนวณเป็นอัตราส่วน D/L

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขอบเขตของการ racemisation กรด aspartic ถูกกำหนดตามที่อธิบาย Ritz, et al [21] และ The Ritz-Timme [23] โดยคำนึงถึงการกำหนดมาตรฐานคุณภาพ [26] สั้น ๆ , 5 มิลลิกรัมบริสุทธิ์และแห้งตัวอย่างอีลาสตินถูกย่อยใน 6 N HCl ที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 6 ชั่วโมง กรดไฮโดรคลอและน้ำถูกถอดออกในสูญญากาศและไฮโดรไลแห้ง esterified กับ isopropanol / กรดกำมะถัน (10: 1) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 110 องศาเซลเซียส หลังจากสกัดอัลคาไลน์ที่มีไดคลอโรมีเทน, acetylation ได้ดำเนินการกับแอนไฮได TRIFLUOROACETIC (TFAA) ที่ 60 องศาเซลเซียสนาน 15 นาที กรดอะมิโนตอนนี้ปัจจุบันเป็น TFA เอสเทอ isopropyl อัตราส่วนของกรด D-aspartic กรด L-aspartic ถูกกำหนดหลังจากการแยกตัวของกรดอะมิโนจากแก๊ส chromatography (GC-2014 Shimadzu, สบูร์ก, เยอรมนี) ในคอลัมน์ของเส้นเลือดฝอย chiral (Chirasil-L-Val 25 เมตร× 0.25 มิลลิเมตร , Varian, มิดเดลเบิร์ก, เนเธอร์แลนด์) โดยใช้เครื่องตรวจจับเปลวไฟ Ionisation มีไฮโดรเจนเป็นก๊าซ กลุ่มตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์อย่างน้อยในที่ซ้ำกัน สัญญาณที่ถูกระบุโดยใช้สารมาตรฐานภายนอกและขอบเขตของ AAR ถูกคำนวณเป็นอัตราส่วน D / เปิด L

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขอบเขตของกรด racemisation ตั้งใจตามที่อธิบายไว้โดย Ritz et al . [ 21 ] และ Ritz timme [ 23 ] , พิจารณากำหนดมาตรฐานคุณภาพ [ 26 ] สั้น ๆ , 5 มิลลิกรัม และ อีลาสติน เป็นโปรตีนบริสุทธิ์ ตัวอย่างที่ 6 N HCl ที่ 100 องศา C เป็นเวลา 6 ชั่วโมง กรดไฮโดรคลอริก และน้ำถูกเอาออกในสุญญากาศและผู้บริการเป็น esterified ด้วยไอโซโพรพานอล / กรดซัลฟูริค ( 10 : 1 ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่ 110 องศา หลังจากใช้สารละลายด่างด้วยไดคลอโรมีเทนแสดงกับ trifluoroacetic ทิเลชันแอน ( tfaa ) ที่อุณหภูมิ 60 องศา C เป็นเวลา 15 นาที ตอนนี้ปัจจุบันเป็นกรดอะมิโนกรดไขมันไอโซเทอร์ . อัตราส่วนของ d-aspartic กรดกรด l-aspartic ถูกกำหนดหลังจากการแยกของกรดอะมิโนโดยแก๊สโครมาโตกราฟี ( gc-2014 Shimadzu , ยูทาห์ , Germany ) ใน 1 คอลัมน์ C ( chirasil-l-val 25 m × 0.25 มิลลิเมตร เอจี มิดเดิลเบิร์ก , เนเธอร์แลนด์ ) โดยใช้เครื่องตรวจจับเปลวไฟ ionisation ที่มีไฮโดรเจนเป็นแก๊สตัวพา ตัวอย่างวิเคราะห์อย่างน้อยในที่ซ้ำกัน สัญญาณที่ถูกระบุโดยใช้สารมาตรฐานภายนอกและขอบเขตของการ AAR คือคำนวณเป็น D / L ตามลำดับ