Protein purificationFor purificatio

Protein purification
For purification of adenosine deaminase, 5 ml of E. coli BL21
(DE3) carrying pET-ada from overnight grown culture in LB supplemented
with 60 lg/ml ampicillin was transferred to one liter of LB
plus ampicillin. The culture was allowed to grow to an OD600 nm of
0.5 and induced by addition of lactose at a final concentration of
1 mM, since lactose had been shown to be as an effective inducer
as IPTG [11]. After five additional hours of growth, cells were harvested
by centrifugation at 10,000g at 4 C, suspended in lysis buffer
[20 mM Tris–HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.5% Tween

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรตีนฟอก
สำหรับฟอกอะดี deaminase, 5 ml ของ E. coli BL21
(DE3) พกพาสัตว์เลี้ยง-ada จากวัฒนธรรมปลูกค้างคืนปอนด์เสริม
กับ lg 60 ml แอมพิซิลลินถูกถ่ายโอนไปหนึ่งลิตรของปอนด์
บวกแอมพิซิลลิน วัฒนธรรมได้รับอนุญาตให้เติบโตเป็น nm OD600 ของ
0.5 และเกิดจากการเพิ่มของแล็กโทสที่เข้มข้นสุดท้ายของ
1 มม. เนื่องจากแล็กโทสมีการแสดงจะเป็น inducer มีประสิทธิภาพ
เป็น IPTG [11] หลังจาก 5 ชั่วโมงเพิ่มเติมโต เซลล์เก็บเกี่ยว
โดย centrifugation ที่ 10000 g ที่ 4 C หยุดชั่วคราวในบัฟเฟอร์ lysis
[20 มม.ตรี – HCl (ค่า pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.5% Tween

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนให้บริสุทธิ์
สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ adenosine deaminase, 5 ml ของ E. coli BL21
(DE3) แบกสัตว์เลี้ยง ada จากวัฒนธรรมการปลูกค้างคืนใน LB เสริม
ด้วยแอลจี 60 / ampicillin มล. ถูกย้ายไปหนึ่งลิตร LB
บวก ampicillin วัฒนธรรมที่ได้รับอนุญาตที่จะเติบโตไปนาโนเมตร OD 600 ของ
0.5 และที่เกิดจากการเพิ่มขึ้นของแลคโตสที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ
1 มิลลิเนื่องจากแลคโตสได้รับการแสดงที่จะเป็น inducer ที่มีประสิทธิภาพ
เป็น IPTG [11] หลังจากห้าชั่วโมงเพิ่มเติมของการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยว
โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัมที่ 4 องศาเซลเซียสระงับในบัฟเฟอร์สลาย
[20 มิลลิ Tris-HCl (pH 8.0), 50 มิลลิ KCl, 1 mM EDTA, 0.5% Tween

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนบริสุทธิ์
สำหรับฟอกดีอะมิเนส , 5 ml ของ E . coli BL21 ( DE3 ) อุ้มสัตว์เลี้ยง
เอจากค้างคืนปลูกวัฒนธรรมในปอนด์เสริม
60 LG / ml ampicillin ถูกย้ายไปหนึ่งลิตรของ LB
บวกยาเพนนิซิลลิน วัฒนธรรมได้รับอนุญาตให้เติบโตเป็น od600 nm ของ
0.5 และการเพิ่มของแลกโตสที่ความเข้มข้นสุดท้าย
1 มิลลิเมตรเพราะการได้แสดงเป็นที่มีประสิทธิภาพเป็นเอนไซม์เอนไซม์
[ 11 ] หลังจากห้าชั่วโมงของการเจริญเติบโตเพิ่มเติม เซลล์เก็บ
โดยการเหวี่ยงแยกที่ 10000g ที่ 4  C ชั่วคราวในการสลายบัฟเฟอร์
[ 20 มม. โดย– HCl ( pH 8.0 ) . 50 มม. 1 mM EDTA , 0.5 เปอร์เซ็นต์ทวีน