Seventy μg of anti-dengue virus typ

Seventy μg of anti-dengue virus type II antibody, clone 3H5-1 (Millipore) was covalently coupled to 25 μL amine-active resin according to the Pierce Co-Immunoprecipitation Kit manual (ThermoFisher Scientific). One hundred μg purified, formaldehyde-inactivated dengue virus type 2 virions (Microbix) was then mixed with 100 Ae. aegypti salivary gland equivalents and added to the antibody-containing resin with gentle end-over-end mixing for 2 hr at 4°C. Unbound proteins were washed away and bound proteins were eluted in a final volume of 50 μL. The experimental details are described in the Pierce Co-Immunoprecipitation Kit manual. Eluted proteins were identified by LC+MS/MS analysis as stated above.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Μเจ็ดของแอนติบอดีต่อต้านไข้เลือดออกไวรัสชนิด II โคลน 3 H 5-1 (มิลลิพอร์) แก้ไขด้วยควบคู่กับเรซิ่นใช้งานมีน μL 25 ตามคู่มือชุด Co immunoprecipitation จึง Pierce (ThermoFisher วิทยาศาสตร์) หนึ่งร้อยμบริสุทธิ์ virions ชนิด 2 ไวรัสไข้เลือดออกยกฟอร์มาลดีไฮด์ (Microbix) ถูกแล้วผสมกับ 100 Ae เทียบเท่าต่อมน้ำลาย aegypti และเพิ่มลงในเรซิ่นที่ประกอบด้วยแอนติบอดีด้วยอ่อนโยนผสมสิ้นกว่า 2 ชั่วโมงที่ 4 องศาเซลเซียส ผูกโปรตีนถูกล้างไป และโปรตีนที่ถูกผูกไว้ที่ eluted ในปริมาณสุดท้ายของ 50 μL รายละเอียดการทดลองไว้ในคู่มือชุด Co immunoprecipitation จึง Pierce โปรตีน eluted ถูกระบุ โดย LC + MS/MS วิเคราะห์ตามที่ระบุไว้ข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เจ็ดสิบไมโครกรัมของการป้องกันไข้เลือดออกไวรัสชนิด II แอนติบอดีโคลน 3H5-1 (อร์ค) เป็นคู่ covalently 25 ไมโครลิตรเรซินเอมีนที่ใช้งานตามคู่มือชุดเพียร์ซร่วม immunoprecipitation (ThermoFisher วิทยาศาสตร์) หนึ่งร้อยไมโครกรัมบริสุทธิ์ฟอร์มาลดีไฮด์-ยกเลิกไข้เลือดออกไวรัสชนิด 2 virions (Microbix) ได้รับการผสมแล้วกับ 100 แอะ aegypti เทียบเท่าต่อมน้ำลายและเพิ่มการเรซินแอนติบอดีที่มีกับอ่อนโยนผสมเป็นเวลา 2 ชั่วโมงท้าย-over-สิ้นสุดที่ 4 องศาเซลเซียส โปรตีนหลุดถูกล้างออกไปและโปรตีนที่ถูกผูกไว้ถูกชะในปริมาณสุดท้ายของ 50 ไมโครลิตร รายละเอียดการทดลองอธิบายไว้ในคู่มือชุดเพียร์ซร่วม immunoprecipitation โปรตีนชะโดยระบุ LC + วิเคราะห์ MS / MS ตามที่ระบุไว้ข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เจ็ดสิบμกรัมชนิดแอนติบอดีต่อต้านไวรัสไข้เลือดออก 2 โคลน 3h5-1 ( มิลลิ ) คือ covalently คู่ 25 μฉันละลายเรซินตามไปแทงคู่มือใช้งานชุด immunoprecipitation CO ( thermofisher ทางวิทยาศาสตร์ ) หนึ่งร้อยμกรัมบริสุทธิ์ ฟอร์มาลดีไฮด์ซึ่งไวรัสไข้เลือดออกไวรัสชนิดที่ 2 ( microbix ) จากนั้นผสม 100 เอ เทียบเท่า และต่อมน้ำลาย และเพิ่มการสร้างแอนติบอดีที่มีเรซินกับปลายเหนือสุดอ่อนโยนผสมเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4 องศา จับกับโปรตีนถูกล้างออกไปและผูกไว้เป็นตัวอย่างโปรตีนในปริมาณสุดท้าย 50 μลิตรรายละเอียดการทดลองที่อธิบายไว้ในเพียซ CO immunoprecipitation ชุดคู่มือ ตัวอย่างโปรตีนที่ถูกระบุโดย LC MS / MS + วิเคราะห์ตามที่ระบุไว้ข้างต้น