After sampling, the blood was immed

After sampling, the blood was immediately mixed
with an equal volume of modified Hank’s balanced
salt solution (pH 7.4) containing 500 units/mL
heparin and centrifuged at 3000g for 5 min. The
resulting supernatant was extracted with nine
volumes of methanol containing 10 vol% acetic
acid and ultrafiltered through a Vivaspin 500
(MWCO 5000, VivaScience AG, Hannover,
Germany). The filtrate was lyophilized and redissolved
in 20mM heptafuluorobutylic acid in
10mM ammonium formate (pH 4.0). TTX was
determined by the LC/ESI-MS analysis according
to the method of Shoji et al. (2001) with some
modification. Briefly, the analytical column was a
Develosil C30-UG-5 (1.5250 mm, 5 mm particle
size, Nomura chemical, Seto, Japan) and maintained
at 25 1C. The mobile phase consisted of
20mM heptafuluorobutylic acid in 10mM ammonium
formate (pH 4.0) containing 1 vol% acetonitrile
and was eluted at a flow rate of 0.10 mL/min.
The eluate was induced into the ion source of the
LC/ESI-MS system and ionized by the positive ion
mode. For the quantitation of TTX, intact blood
and liver extract were spiked with 0–1.0 mg of TTX
standard. TTX in the liver was extracted with
0.1 vol% acetic acid by the method reported
previously (Matsumoto et al., 2007).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากสุ่มตัวอย่าง เลือดได้ทันทีผสมมีเท่ากันของสมดุลปริมาณของแฮงก์แก้ไขเกลือโซลูชั่น (pH 7.4) ที่มีขนาด 500 หน่วย/มล.เฮพาริน และ centrifuged ที่ 3000g สำหรับคืนนี้supernatant ผลลัพธ์ถูกสกัด ด้วยเก้าปริมาณของเมทานอลประกอบด้วย% vol 10 อะซิติกกรดและ ultrafiltered ผ่าน Vivaspin 500(MWCO 5000, VivaScience AG ฮันโนเวอร์เยอรมนี) สารกรองที่ lyophilized และ redissolvedในกรด heptafuluorobutylic 20 มม.ใน10 มม.แอมโมเนียรูปแบบเอกสาร (pH 4.0) มี TTXตาม LC ESI-MS วิเคราะห์ตามวิธีของโชจิและ al. (2001) กับปรับเปลี่ยน สั้น ๆ คอลัมน์วิเคราะห์ไม่เป็นDevelosil C30-ยูจี-5 (1.5 มม. 250 อนุภาค 5 มม.ขนาด เคมี โนมูระเซะโตะ ญี่ปุ่น) และรักษาที่ 25 1C. ระยะเคลื่อนประกอบด้วยกรดแอมโมเนีย 10 มม. 20 มม. heptafuluorobutylicรูปแบบเอกสาร (pH 4.0) acetonitrile % 1 vol ประกอบด้วยและมี eluted ที่อัตราการไหลของ 0.10 mL/minEluate ถูกทำให้เกิดเป็นแหล่งไอออนระบบ LC ESI-MS และ ionized โดยไอออนบวกโหมดการ สำหรับการวิเคราะห์หาปริมาณของ TTX เลือดเหมือนเดิมและสารสกัดจากตับมี spiked กับ 0-1.0 มก. TTXมาตรฐาน TTX ในตับถูกสกัดด้วย0.1 กรดอะซิติก% vol โดยวิธีการรายงานก่อนหน้านี้ (มัตสึโมโตะ et al., 2007)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากการเก็บตัวอย่างเลือดผสมทันทีที่มีปริมาณที่เท่ากันของการปรับเปลี่ยนสมดุลของแฮงค์สารละลายเกลือ(pH 7.4) ที่มี 500 หน่วย / มิลลิลิตรเฮและหมุนเหวี่ยงที่3000G เป็นเวลา 5 นาที ใสส่งผลให้ถูกสกัดด้วยเก้าเล่มของเมทานอลที่มี 10% โดยปริมาตรอะซิติกกรดและultrafiltered ผ่าน Vivaspin 500 (MWCO 5000 VivaScience เอจีฮันโนเวอร์, เยอรมนี) ที่ได้รับการกรองแห้งและ redissolved กรด 20mm heptafuluorobutylic ในรูปแบบแอมโมเนียม 10 mM (pH 4.0) TTX ถูกกำหนดโดยLC / การวิเคราะห์ ESI-MS ตามวิธีการของโชจิอัลเอต (2001) กับบางส่วนปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , คอลัมน์วิเคราะห์เป็นDevelosil C30-UG-5 (1.5? 250 มมมม 5 อนุภาคขนาดเคมีโนมูระเซโตะ, ญี่ปุ่น) และการบำรุงรักษาที่25 1C เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย20mm กรด heptafuluorobutylic ในแอมโมเนียม 10 mM รูปแบบ (pH 4.0) ที่มี 1 acetonitrile ฉบับ% และได้รับการชะที่อัตราการไหล 0.10 มิลลิลิตร / นาที. eluate ถูกชักนำเข้าไปในแหล่งกำเนิดไอออนของLC / ระบบ ESI-MS และแตกตัวเป็นไอออนโดยไอออนบวกโหมด สำหรับปริมาณ TTX เลือดเหมือนเดิมและตับสารสกัดถูกแทงด้วย0-1.0 mg ของ TTX มาตรฐาน TTX ในตับถูกสกัดด้วย0.1% โดยปริมาตรกรดอะซิติกด้วยวิธีการที่มีการรายงานก่อนหน้านี้(มัตสึ et al., 2007)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากสุ่มเลือดผสมทันที
กับเท่ากับปริมาณการแฮงค์สมดุล
เกลือ ( pH 7.4 ) ประกอบด้วย 500 หน่วย / มล
เฮปารินและระดับที่ 5 นาที 3000g
9
) นำสารปริมาณเมทานอลผสม 10 % Vol อเซ
กรดและ ultrafiltered ผ่าน vivaspin 500
( mwco 5000 vivascience AG , ฮันโนเวอร์ ,
เยอรมนี )หนักและก็แห้ง redissolved

ใน 20mm heptafuluorobutylic กรดในน้ำ ( pH 4.0 รูปแบบ 10mm ) ทีทีเ กซ์ถูกกำหนดโดยค่า

esi-ms วิเคราะห์ตามวิธีการของโชจิ et al . ( 2001 ) กับบาง
ดัดแปลง สั้น ๆ , คอลัมน์วิเคราะห์เป็น
develosil c30-ug-5 ( ขนาด 1.5  250 5 มม. ซึ่งขนาดอนุภาค
, เคมี , เซโตะ ญี่ปุ่น ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 25 c
.เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย
20mm heptafuluorobutylic กรดในน้ำ ( pH 4.0 รูปแบบ 10mm

) ที่มีไน 1 Vol % และตัวอย่างที่ 0.10 มิลลิลิตร / นาที อัตราการไหลของสารละลาย ( eluate )
นำสู่แหล่งกำเนิดไอออนของ
ระบบ LC / esi-ms ี่ด้วยโหมดอิออน
บวก สำหรับเซลล์ของทีทีเ กซ์ , เหมือนเดิม เลือดและสารสกัดจากตับ
0 – 1.0 mg มาตรฐานทีทีเ กซ์

ทีทีเ กซ์ในตับสาร
0.1 % กรดปริมาตรโดยวิธีรายงาน
ก่อนหน้านี้ ( Matsumoto et al . , 2007 )