of the surface sterilisation was checked by making an imprint
of the treated tissue on agar media (Schulz et al. 1998). Since
the sponges were damaged by even the most gentle of these
methods without destroying the fungal propagules, small
pieces of inner tissue of sponge material were rinsed three
times with sterile arti®cial sea water (ASW) (Ho$ ller, Ko$ nig &
Wright 1999a). Both fresh and frozen sponges were aseptically
cut into small cubes, approx. 0±5 cm$. 50±75 cubes of each
sample was placed onto each of the employed isolation
media (Table 1). All chemicals, if not stated otherwise, were
research grade and supplied by Merck.
The following media were used for isolation of fungi :
Medium I : Biomalt agar (BIO) : 20 g l−" biomalt (Vitaborn,
Hameln, Germany), 15 g l−" agar. Medium II : Malt extract
soya meal agar (MS): 30 g l−" malt extract, 3 g l−" peptone
from soya meal, 12 g l−" agar, pH adjusted to 5±5 with HCl
prior to sterilisation. Medium III : Potato carrot agar (KM):
20 g l−" cooked and mashed potatoes, 20 g l−" cooked and
mashed carrots, 20 g l−" agar. Medium IV: 10 g l−" cellulose
agar : cellulose, 1 g l−" yeast extract, 15 g l−" agar. Medium V:
Glucose peptone yeast extract agar (GPY) (Ho$ ller et al.
1999a). Medium VI: Cornmeal agar : 42 g cornmeal were
stirred in 500 ml distilled water at 60° for 12 h, ®ltered and the
®ltrate diluted with water to 1 l, agar 15 g l−". As suggested
by Dreyfuss (1986), 0±5 mg l−" cyclosporine A were sometimes
added to the isolation media to slow the growth of fastgrowing
fungi (Table 1). Most media contained 800 ml l−"
ASW. All media contained 250 mg l−" benzylpenicillin and
250 mg l−" streptomycin sulphate to prevent bacterial growth,
and were sterilized by autoclaving at 120° and 1 atm.
Emerging fungal colonies were transferred to one or more
media for identi®cation, including media I, II, III, V and VI
as above, and medium VII : standard nutrient agar (SNA):
1 g l−" KH#PO%, 1 g l−" KNO$, 0±5 g l−" MgSO%¬7 H#O,
0±5 g l−" KCl, 0±5 g l−" glucose¬H#O, 0±2 g l−" sucrose,
20 g l−" agar and medium VIII : starch yeast extract agar
(SYA): 15 g l−" soluble starch, 4 g l−" yeast extract, 800 ml l−
การฆ่าเชื้อพื้นผิวถูกตรวจสอบ โดยทำประทับของเนื้อเยื่อรักษาสื่อวุ้น (ยนต์ et al. 1998) ตั้งแต่พฤติกรรมรับความเสียหาย โดยแม้สุดอ่อนโยนเหล่านี้วิธีการโดยไม่ต้องทำลาย propagules เชื้อรา เล็กสามกระเด็นเมื่อจะได้ชิ้นส่วนของเนื้อเยื่อด้านในของฟองน้ำครั้งกับอาร์ติหมัน® น้ำของทะเล (ASW) (ller$ โฮจิมินห์ เกาะ nig $ &ทางไรท์ที่ 1999a) มีทั้งสด และแช่แข็งฟองน้ำ asepticallyตัดเป็นก้อนเล็ก ๆ, $ประมาณ 0±5 ซม. ก้อน 50±75 ของแต่ละวางลงบนแยกอิสระแต่ละตัวอย่างสื่อ (ตาราง 1) เคมีภัณฑ์ทั้งหมด ถ้าไม่ระบุไว้เป็นอย่างอื่น ถูกวิจัยเกรด และจัดทำ โดยบริษัทเมอร์คใช้สำหรับแยกเชื้อสื่อต่อไปนี้:กลางผม: Biomalt วุ้น (BIO): 20 กรัม l− " (Vitaborn, biomaltฮาเมล์น เยอรมนี), l− 15 กรัม "วุ้น ปานกลางที่ II: มอลต์สกัดถั่วเหลืองอาหารวุ้น (MS): 30 กรัม l− "มอลต์สกัด l− 3 g " peptoneจากถั่วเหลืองอาหารอร่อย l− 12 กรัมวุ้น pH ปรับ 5±5 กับ HClก่อนที่จะฆ่าเชื้อ กลาง III: มันฝรั่งแครอทวุ้น (กม.):l− 20 g"สุก และบดมันฝรั่ง l− 20 g" สุก และวุ้นบดแครอท l− 20 g" กลาง IV: 10 g l− "เซลลูโลสวุ้น: เซลลูโลส l− 1 g "สารสกัดจากยีสต์ l− 15 กรัม" วุ้น V:ปานกลางวุ้นสารสกัดจากยีสต์ peptone กลูโคส (GPY) (โฮจิมินห์$ ller et al1999a) . กลาง VI: วุ้นข้าวโพด: 42 กรัมข้าวโพดได้กวนในน้ำกลั่น 500 มล.ที่ 60° สำหรับ 12 h, ® ltered และ® ltrate ที่เจือจาง ด้วยน้ำ 1 l วุ้น 15 กรัม l− " แนะนำเป็นโดยเดรย์ฟัส (1986), 0±5 มิลลิกรัม l−" cyclosporine A ถูกบางครั้งเพิ่มไปยังสื่อแยกจะชะลอการเติบโตเป็นพืชโตไวเชื้อรา (ตาราง 1) ส่วนใหญ่สื่อที่มีอยู่ 800 มล. l−"ASW ทุกสื่ออยู่ 250 มก. l−" benzylpenicillin และซัลเฟต streptomycin 250 มก. l−"เพื่อป้องกันไม่ให้เชื้อแบคทีเรียเจริญเติบโตและถูกฆ่าเชื้อ ด้วยสปอร์ที่ 120° และ 1 atmโคโลนีเชื้อราเกิดถ่ายโอนอย่างน้อยหนึ่งสื่อสำหรับ identi ® ไอออน รวมทั้งสื่อ I, II, III, V และ VIเป็น VII ข้างต้น กลาง และขนาดย่อม: มาตรฐานสารอาหารวุ้น (SNA):l− 1 g" KH #PO % 1 g l−" $ KNO, 0±5 g l−" MgSO % ¬7 H #O0±5 g l−" KCl, 0±5 g l− " glucose¬H #O, 0±2 g l− "ซูโครสวุ้น 20 กรัม l−"และปานกลาง VIII: แป้งยีสต์สารสกัดจากวุ้น(ชานโถ): 15 กรัม l− "แป้งละลาย l− 4 g " สารสกัดจากยีสต์ 800 มล. l−
การแปล กรุณารอสักครู่..

ของการฆ่าเชื้อพื้นผิวที่ได้รับการตรวจสอบโดยการที่ประทับ
ของเนื้อเยื่อได้รับการรักษาในสื่อวุ้น (ชัลส์ et al. 1998) ตั้งแต่
ฟองน้ำได้รับความเสียหายโดยแม้อ่อนโยนที่สุดของเหล่านี้
วิธีการโดยไม่ทำลาย propagules เชื้อราขนาดเล็ก
ชิ้นส่วนของเนื้อเยื่อภายในของวัสดุฟองน้ำถูกล้างสาม
ครั้งที่มีการฆ่าเชื้อน้ำทะเลarti®cial (ASW) (โฮ $ ller, เกาะ $ & Nig
ไรท์ 1999a) ฟองน้ำสดและแช่แข็งปลอดเชื้อทั้งสองถูก
ตัดเป็นก้อนขนาดเล็กประมาณ 0 ± 5 ซม. $ 50 ± 75 ก้อนของแต่ละ
ตัวอย่างถูกวางลงบนแต่ละแยกลูกจ้าง
สื่อ (ตารางที่ 1) สารเคมีทั้งหมดหากไม่ได้ระบุไว้เป็น
เกรดวิจัยและจัดทำโดยเมอร์ค.
สื่อดังต่อไปนี้ถูกนำมาใช้ในการแยกของเชื้อรา:
Medium I: Biomalt วุ้น (BIO): 20 gl- "biomalt (Vitaborn,
Hameln, เยอรมนี) 15 GL - "วุ้น ขนาดกลางที่สอง: สารสกัดจากมอลต์
อาหารถั่วเหลืองวุ้น (MS): 30 gl- "สารสกัดจากมอลต์ 3 gl-" เปปโตน
จากอาหารถั่วเหลือง 12 gl- "วุ้นปรับ pH 5 ± 5 กับ HCl
ก่อนที่จะมีการฆ่าเชื้อกลาง iii:. มันฝรั่ง แครอทวุ้น (KM):
20 gl- "สุกและมันฝรั่งบด, 20 gl-" สุกและ
แครอทบด 20 gl- "วุ้น IV กลาง: 10 gl- "เซลลูโลส
วุ้น: เซลลูโลส 1 gl-" สารสกัดจากยีสต์, 15 gl- "วุ้น V ปานกลาง:.
กลูโคสเปปโตนสารสกัดจากยีสต์วุ้น (GPY) (โฮ $ ller et al.
1999a) กลาง VI:. ข้าวโพด วุ้น: 42 กรัมแป้งข้าวโพดถูก
กวนใน 500 มล. น้ำกลั่นที่ 60 ° 12 ชั่วโมง®lteredและ
®ltrateเจือจางด้วยน้ำ 1 ลิตร, วุ้น 15 gl- " เป็นข้อเสนอแนะ
โดยเดรย์ฟั (1986), 0 ± 5 mg L- "cyclosporine บางครั้งก็
เพิ่มไปยังสื่อแยกที่จะชะลอการเจริญเติบโตของ fastgrowing
เชื้อรา (ตารางที่ 1). สื่อส่วนใหญ่ที่มีอยู่ 800 มล. L-"
ASW สื่อทั้งหมดที่มี 250 มิลลิกรัม L- "benzylpenicillin และ
250 มิลลิกรัม L-" streptomycin ซัลเฟตเพื่อป้องกันการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย
และฆ่าเชื้อโดยการนึ่งฆ่าเชื้อที่ 120 องศาและ 1 ATM.
Emerging อาณานิคมของเชื้อราถูกย้ายไปหนึ่งหรือมากกว่า
สื่อidenti®cationรวมทั้ง สื่อ I, II, III, V และ VI
ข้างต้นและขนาดกลางปกเกล้าเจ้าอยู่หัว: สารอาหารวุ้นมาตรฐาน (SNA):
1 gl- "KH # PO% 1 gl-" KNO $, 0 ± 5 gl- "MgSO% ¬7 H # O,
0 ± 5 gl- "KCl, 0 ± 5 gl-" glucose¬H # O, 0 ± 2 gl- "ซูโครส
20 gl-" วุ้นและขนาดกลาง VIII: แป้งยีสต์สกัดวุ้น
(SYA): 15 gl- "แป้งที่ละลายน้ำได้ 4 gl-" สารสกัดจากยีสต์, 800 มล. L-
การแปล กรุณารอสักครู่..
