. Explant sterilization and in vitr

. Explant sterilization and in vitro propagation
The in vitro initiated cultures of Ph. squarrosus provided by
E. Wellmann were first placed on M1 medium. When the resulting
prothalli or calli were large enough to handle, they were transferred
to M2 medium and then transferred from time-to-time as
their increase in size warranted change to larger tubes and fresh
medium or transferred into liquid medium for suspension culture
initiation.
Production of prothalli cultures was attempted under different
temperatures and photoperiods by combining GA3, ZT, IAA, NAA,
and CM together in M3 medium (see Table 1). Induction of root formation
in prothalli cultures was attempted in M4 medium. Rapid
callus and prothallus liquid culture was performed at 25 C in the
dark on a rotory shaker at 140 rpm in 25, 50, 100, or 150 mL flasks
containing 5, 10, 20, or 30 mL of M5 medium with varying pH and
concentrations of 2,4-D. The flask size and volume of M5 medium
depended on the size of the inoculating callus. The medium was
changed every 2 weeks. The inoculum size was about 0.1, 0.2,
0.4, and 0.6 g fresh weight for 5, 10, 20, and 30 mL M5 medium,
respectively. These experiments were repeated in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. Explant ฆ่าเชื้อและเผยแพร่การเพาะเลี้ยงวัฒนธรรมของ squarrosus Ph. โดยเริ่มต้นการเพาะเลี้ยงE. Wellmann แรกได้ถูกวางไว้บนสื่อ M1 เมื่อเกิดการprothalli หรือ calli มีขนาดใหญ่พอที่จะจัดการ มีการถ่ายโอนปานกลาง M2 และโอนย้ายจากเวลาไปเวลาเป็นแล้วการเพิ่มขนาด warranted เปลี่ยนหลอดใหญ่และสดขนาดกลาง หรือโอนย้ายเป็นวัฒนธรรมระงับเหลวปานกลางเริ่มต้นผลิต prothalli วัฒนธรรมความพยายามภายใต้แตกต่างกันอุณหภูมิและ photoperiods โดยรวม GA3, ZT, IAA, NAAซม.กันกลาง M3 และ (ดูตารางที่ 1) เหนี่ยวนำของกำเนิดรากในวัฒนธรรม prothalli พยายามใน M4 อย่างรวดเร็วแคลลัสและ prothallus วัฒนธรรมของเหลวทำที่ 25 C ในการมืดในเชคเกอร์ rotory ที่ 140 รอบต่อนาที 25, 50, 100 หรือน้ำ 150 มล.ประกอบด้วย 5, 10, 20 หรือ 30 mL ของ M5 ตัวกลางมีค่า pH แตกต่างกัน และความเข้มข้นของ 2, 4 ดี หนาวขนาดและปริมาณของกลาง M5ขึ้นอยู่กับขนาดของแคลลัส inoculating สื่อได้เปลี่ยนทุก 2 สัปดาห์ ขนาด inoculum ได้ประมาณ 0.1, 0.2, 0.4 และ 0.6 กรัมน้ำหนักสดใน 5, 10, 20 และ 30 mL M5 ขนาด กลางตามลำดับ ทดลองเหล่านี้ได้ถูกทำซ้ำใน triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. และการฆ่าเชื้อในทำนองเดียวกับการขยายพันธุ์ในหลอดทดลองริเริ่มวัฒนธรรม

. . squarrosus โดย wellmann ถูกวางไว้บน M1 ) เมื่อผล
โปรแธลเลีย หรือ แคลลัสมีขนาดใหญ่พอที่จะจัดการกับพวกเขาโอน
กับ M2 ปานกลางแล้วย้ายเวลาเป็น
ของพวกเขาเพิ่มขนาดรับประกันเปลี่ยนท่อขนาดใหญ่และสด
กลางหรือโอนในอาหารเหลวสำหรับการริเริ่มวัฒนธรรม

ระงับ การผลิตโปรแธลเลียวัฒนธรรมจึงภายใต้อุณหภูมิที่แตกต่างกันและโดยการรวม
photoperiods GA3 ZT NAA , IAA , , , และร่วมกันใน M3
ซม. ขนาดกลาง ( ดูตารางที่ 1 ) การชักนำให้เกิดรากในวัฒนธรรมจึงก่อตัว
โปรแธลเลียใน M4 ปานกลาง แคลลัสและของเหลวอย่างรวดเร็ว
โปรทัลลัสวัฒนธรรมไปแสดงที่ 25 C
มืดในเครื่องปั่น rotory ที่ 140 รอบต่อนาทีใน 25 , 50 , 100 หรือ 150 ml ขวด
ประกอบด้วย 5 , 10 , 20 หรือ 30 มิลลิลิตร แตกต่างกับ M5 ปานกลาง pH และความเข้มข้นของ 2 , 4-D
ขวดขนาดและปริมาณของ M5
( ขึ้นอยู่กับขนาดของการฉีดวัคซีนเป็นแคลลัส กลางคือ
เปลี่ยนทุกๆ 2 สัปดาห์ เชื้อขนาดประมาณ 0.1 , 0.2 , 0.4 และ 0.6 g
, น้ำหนักสด 5 , 10 , 20 , และ 30 มล. M5 ขนาดกลาง
ตามลำดับการทดลองเหล่านี้ซ้ำ
ทั้งสามใบ