DNAs of magnetically purified cells

DNAs of magnetically purified cells from eight bottles
were obtained by boiling the cells in 200 lL water at
100 C for 15 min and then centrifuged. Primers used for
16S rRNA gene amplification were 341F-GC (50-CC TAC
GGG AGG CAG CAG-30) to which a 40 bp GC-clamp was
added at the 50 end and 907R (50-CCG TCA ATT CMT
TTG AGT TT-30) [17]. The 50 lL PCR reaction mix
contained 10 lL Taq-& LOADTM Mastermix 5xC (MP
Biomedicals Europe), 0.5 lL of each primer at 25 lM,
37 lL of sterile water, and 2 lL of extracted DNA as
template. PCR reactions were performed in the T100TM
Thermal Cycler (BIO-RAD). The cycling conditions were
5 min at 94 C for initial denaturation; 35 cycles of 1 min
at 94 C, 1 min at 55 C, and 1 min at 72 C; and a final
extension of 5 min at 72 C

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

DNAs ของสนามแม่เหล็กเซลล์บริสุทธิ์จากแปดขวด
ที่ได้รับโดยการต้มเซลล์ในน้ำ 200 lL ที่
100 องศาเซลเซียสนาน 15 นาทีและปั่นแล้ว ไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับ
16S rRNA ขยายยีนมี 341F-GC (50-CC TAC
GGG AGG CAG CAG-30) ที่ 40 bp GC-ยึดถูก
เพิ่มที่ 50 end และ 907R (50 CCG TCA ATT CMT
TTG AGT TT- 30) [17] 50 lL ปฏิกิริยาผสม PCR
ที่มีอยู่ 10 lL Taq- & LOADTM Mastermix 5xC (MP
Biomedicals ยุโรป) 0.5 lL ของไพรแต่ละ LM 25,
37 lL น้ำหมันและ 2 lL ของดีเอ็นเอที่สกัดเป็น
แม่แบบ ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการใน T100TM
ร้อน Cycler (BIO-RAD) เงื่อนไขการขี่จักรยานเป็น
เวลา 5 นาทีที่ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา denaturation เริ่มต้น? 35 รอบ 1 นาที
ที่ 94 C, 1 นาทีที่ 55 C และ 1 นาทีที่ 72 C?; และสุดท้าย
การขยายตัวของ 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แถบแม่เหล็กแยกเซลล์จากแปดขวด
ได้โดยการต้มเซลล์ 200 จะน้ำ
100  เป็นเวลา 15 นาทีและที่ระดับ . ไพรเมอร์ใช้เบส 16S rRNA ยีนเป็น 341f-gc
( ( 50-cc TAC
GGG agg CAG cag-30 ) ซึ่งมี 40 BP GC หนีบคือ
เพิ่มที่ 50 สิ้นสุดและ 907r ( 50-ccg TCA ATT CMT
ทีทีจี agt tt-30 ) [ 17 ] 50 จะเพิ่มปฏิกิริยาผสม
มี 10 จะแท็ค - & loadtm mastermix 5xc ( MP
biomedicals ยุโรป ) , 0.5 จะของแต่ละสีรองพื้น LM
ที่ 25 , 37 จะน้ำหมันและ 2 จะสกัดดีเอ็นเอเป็น
แม่แบบ ปฏิกิริยา PCR ได้ใน t100tm
Thermal cycler ( Bio-rad ) เงื่อนไขการขี่จักรยาน )
5 นาทีที่ 94  C สำหรับการเริ่มต้น ( ; 35 รอบ 1 นาทีที่ 94 
C 1 นาทีที่ 55  C และ 1 นาทีที่ 72  C ; และสุดท้าย
ส่วนขยายของ 5 นาทีที่ 72  c