2. Materials and methods2.1. Select

2. Materials and methods
2.1. Selection of probiotic strains
2.1.1. Preparation of probiotic bacteria
Probiotic organisms including two strains of L. acidophilus,four strains of L. casei, one strain of L.rhamnosus and six strains of Bifidobacterium spp. were obtained from a number of suppliers (Table 1). Ten millilitre aliquots of sterile deMann, Rogosa, Sharpe (MRS) broth (Oxoid Ltd., Hampshire, United Kingdom) were individually inoculated with each of the probiotic organisms. MRS broth containing Bifidobacterium spp. was supplemented with filter sterilized 0.05% w/v L-cysteineÆhydrochloride (Sigma Chemical Co., Castle Hill, Sydney, Australia) to create an anaerobic environment. The cultures were activated by growing three times successively at 37 C for 15–18 h. For freeze-drying experiments, organisms were grown in 500 mL of MRS broth and cells were harvested by centrifugation (Sorvall RT7 refrigerated centrifuge) at 1510g at 25 C for 25 min (Bhandari, Deeth, & Krasaekoopt,2004). Ten grams wet weight of freshly harvested cells were then washed and suspended in Schott bottles containing 90 mL of sterile (14% w/v) reconstituted skim milk (RSM).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การคัดเลือกสายพันธุ์โปรไบโอติก
2.1.1 การเตรียมความพร้อมของแบคทีเรียโปรไบโอติก
มีชีวิตโปรไบโอติกรวมทั้งสองสายพันธุ์ของ L. acidophilus สี่สายพันธุ์ของ L. Casei หนึ่งสายพันธุ์ของ L.rhamnosus และหกสายพันธุ์ของ Bifidobacterium spp ที่ได้รับจากจำนวนผู้ผลิต (ตารางที่ 1) สิบ aliquots มิลลิลิตรหมัน deMann, Rogosa ชาร์ป (MRS) น้ำซุป (Oxoid จำกัด , นิวแฮมป์เชียร์, สหราชอาณาจักร) ถูกเชื้อเป็นรายบุคคลกับแต่ละของสิ่งมีชีวิตโปรไบโอติก อาหาร MRS broth ที่มี Bifidobacterium spp ได้รับการเสริมด้วยตัวกรองฆ่าเชื้อ 0.05% w / v L-cysteineÆhydrochloride (Sigma Chemical Co. , ปราสาทฮิลล์, ซิดนีย์, ออสเตรเลีย) ในการสร้างสภาพแวดล้อมที่ไม่ใช้ออกซิเจน วัฒนธรรมที่ถูกเปิดใช้งานโดยการเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องสามครั้งที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15-18 ชั่วโมง สำหรับการทดลองแช่แข็งแห้ง, สิ่งมีชีวิตที่ได้รับการปลูกใน 500 มิลลิลิตรของน้ำซุป MRS และเซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง (centrifuge Sorvall RT7 ตู้เย็น) ที่ 1510g ที่ 25 C เป็นเวลา 25 นาที (บันดารี, Deeth และ Krasaekoopt, 2004) สิบกรัมน้ำหนักเปียกของเซลล์เก็บเกี่ยวสดใหม่ถูกล้างแล้วและลอยอยู่ในขวดที่มีชอตต์ 90 มลหมัน (14% w / v) นมพร่องมันเนยละลาย (RSM)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . คัดเลือกสายพันธุ์ โปรไบโอติก
2.1.1 . การเตรียมการของโปรไบโอติกแบคทีเรียโปรไบโอติก
สิ่งมีชีวิตรวมทั้งสองสายพันธุ์ของ L . acidophilus , สี่สายพันธุ์ของ L . casei สายพันธุ์หนึ่งของ l.rhamnosus , และหกสายพันธุ์ของ Bifidobacterium spp . ได้จากจำนวนของซัพพลายเออร์ ( ตารางที่ 1 ) 10 มิลลิลิตรเฉยๆเป็นหมันของ demann rogosa ชาร์ป , , ( นาง ) ซุป ( oxoid จำกัด แฮมเชียร์สหราชอาณาจักร ) เป็นแบบที่ใส่แต่ละสิ่งมีชีวิต โปรไบโอติก MRS broth ที่ประกอบด้วย Bifidobacterium spp . เสริมด้วยตัวกรองฆ่าเชื้อ 0.05 % W / V L-Cysteine กู้ไฮโดรคลอไรด์ ( Sigma Chemical Co . , Castle Hill , ซิดนีย์ , ออสเตรเลีย ) การสร้างสภาพแวดล้อมแบบไม่ใช้ออกซิเจน วัฒนธรรมถูกเปิดใช้งานโดยการเติบโตสามครั้งอย่างต่อเนื่องที่อุณหภูมิ 37 15 – 18 ชั่วโมงสำหรับการทำแห้ง โดยสิ่งมีชีวิตที่ถูกปลูกในน้ำ 500 มล. ของ MRS broth และเซลล์ถูกเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยง ( sorvall rt7 เหวี่ยงเย็น ) ที่ 1510g ที่ 25 C 25 นาที ( รับมือ deeth & krasaekoopt , 2004 ) 10 กรัม น้ำหนักเปียกของการเก็บเกี่ยวสดแล้วล้าง และเซลล์แขวนลอยในขวดบรรจุ 90 มิลลิลิตร คือเป็นหมัน ( 14 % w / v ) สร้าง skim milk
( RSM )