The purity of the analysed elastin

The purity of the analysed elastin samples
If biochemical age estimation is to be performed on purified proteins, the purity of the samples is essential for the quality of age estimation. Contaminating proteins will have negative effects on the results as the kinetics of AAR depends on the molecular structure of a protein (see [24]). Thus, the absence of collagen is crucial for a correct analysis of AAR in elastin. Elastin contains 1.5–5.2 Asx/1,000 residues (dependent on splice variant) compared to 42 Asx/ 1,000 residues in arterial alpha 1 (III) collagen [7, 28]. The slower racemisation kinetics of Asx in collagen will result in an underestimation of the AAR in collagen-contaminated elastin samples. Histological analysis did not indicate any collagen contamination. With the purification protocol applied here, an elastin preparation with a reproducible amino acid composition was obtained, which was in close agreement with the composition of the elastin standard and with the predicted amino acid composition of human elastin from sequence data (Fig. 2). Amino acid compositions displayed a low amount of hydroxyproline and biochemical- ly confirmed the absence of contaminating collagen in the elastin specimens. However, some prolyl-residues in elastin are transformed through post-translational hydroxylation [18] but to a considerably lower amount as compared with collagen. Thus, the detected low amount of hydroxyprolin residues in combination with the absence of methionine is a strong indicator for elastin purity. Tryptophan, theoretically an additional marker for the presence of collagen, is destroyed during hydrolysis and, thus, was not detected.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความบริสุทธิ์ของตัวอย่างสติวิเคราะห์ถ้าการประเมินทางชีวเคมีอายุที่โปรตีนบริสุทธิ์ ความบริสุทธิ์ของตัวอย่างเป็นสิ่งสำคัญสำหรับคุณภาพของการประเมินอายุ ปนเปื้อนโปรตีนจะมีผลลบผลลัพธ์เป็นจลนพลศาสตร์ของ AAR ขึ้นกับโครงสร้างโมเลกุลของโปรตีน (ดู [24]) ดังนั้น การขาดคอลลาเจนเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการวิเคราะห์ที่ถูกต้องของ AAR ในอีลาสติน อีลาสตินประกอบด้วย 1.5 – 5.2 Asx/1000 ตกค้าง (ขึ้นอยู่กับตัวแปรประกบ) เมื่อเทียบกับกัน 42 / 1,000 ตกค้างในหลอดเลือดแดงอัลฟ่า 1 (III) คอลลาเจน [7, 28] จลนพลศาสตร์ racemisation ช้าของ Asx ในคอลลาเจนจะส่งผลให้การ underestimation ของ AAR ในตัวอย่างปนเปื้อนคอลลาเจนอีลาสติน คนวิเคราะห์ไม่ได้ระบุใด ๆ ปนเปื้อนคอลลาเจน มี protocol ให้บริสุทธิ์ที่ใช้ที่นี่ การเตรียมอีลาสตินกับกรดอะมิโนจำลององค์ประกอบได้รับ ซึ่งถูกปิดสัญญา กับองค์ประกอบของสติมาตรฐาน และองค์ประกอบของสติมนุษย์จากลำดับข้อมูล (รูป 2) กรดอะมิโนที่คาดการณ์ แสดงองค์ประกอบของกรดอะมิโนจำนวน hydroxyproline และชีวเคมีหลียืนยันการขาดคอลลาเจนปนเปื้อนในตัวอย่างสติ อย่างไรก็ตาม บาง prolyl ตกค้างในอีลาสตินจะเปลี่ยน ผ่านโพสต์แปล hydroxylation [18] แต่เป็นจำนวนที่ต่ำกว่ามากเมื่อเทียบกับคอลลาเจน ดังนั้น ตรวจพบต่ำจำนวน hydroxyprolin ตกค้างร่วมกับการขาดการเมไทโอนีนเป็นตัวบ่งชี้ที่แข็งแกร่งเพื่อความบริสุทธิ์ของอีลาสติน โพรไบโอ ในทางทฤษฎีหมายเพิ่มเติมสำหรับการปรากฏตัวของคอลลาเจน ทำลายในระหว่างการย่อยสลาย แล้ว ดังนั้น ไม่พบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความบริสุทธิ์ของตัวอย่างอีลาสติวิเคราะห์
หากการประมาณอายุชีวเคมีจะได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับโปรตีนบริสุทธิ์ความบริสุทธิ์ของกลุ่มตัวอย่างมีความสำคัญกับคุณภาพของการประมาณอายุ โปรตีนปนเปื้อนจะมีผลกระทบต่อผลการเป็นจลนศาสตร์ของ AAR ขึ้นอยู่กับโครงสร้างโมเลกุลของโปรตีน (ดู [24]) ดังนั้นการขาดคอลลาเจนเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการวิเคราะห์ที่ถูกต้องของ AAR ในอีลาสติน อีลาสตินมี 1.5-5.2 ASX / 1,000 ตกค้าง (ขึ้นอยู่กับตัวแปรประกบกัน) เมื่อเทียบกับ 42 ASX / 1,000 ตกค้างในเลือดแดงอัลฟา 1 (III) คอลลาเจน [7, 28] ช้าจลนศาสตร์ของ racemisation ASX คอลลาเจนจะมีผลในการดูเบาของ AAR ในคอลลาเจนอีลาสตินที่ปนเปื้อนตัวอย่าง การวิเคราะห์ทางจุลกายวิภาคไม่ได้ระบุการปนเปื้อนใด ๆ คอลลาเจน กับโปรโตคอลบริสุทธิ์ที่ใช้ที่นี่เตรียมอีลาสตินที่มีองค์ประกอบของกรดอะมิโนที่สามารถทำซ้ำได้ซึ่งอยู่ในข้อตกลงที่ใกล้ชิดกับองค์ประกอบของมาตรฐานอีลาสตินและกรดอะมิโนที่มีองค์ประกอบของกรดคาดการณ์ของอีลาสตินของมนุษย์จากข้อมูลลำดับ (รูปที่. 2) องค์ประกอบของกรดอะมิโนที่แสดงจำนวนเงินที่ต่ำของ hydroxyproline และ Ly biochemical- ยืนยันกรณีที่ไม่มีการปนเปื้อนในคอลลาเจนในตัวอย่างอีลาสติน แต่บาง prolyl-ตกค้างในอีลาสตินจะเปลี่ยนผ่านการโพสต์แปล hydroxylation [18] แต่เป็นจำนวนเงินที่ลดลงอย่างมากเมื่อเทียบกับคอลลาเจน ดังนั้นการตรวจพบปริมาณต่ำของสารตกค้าง hydroxyprolin ร่วมกับการขาดของ methionine เป็นตัวบ่งชี้ที่แข็งแกร่งเพื่อความบริสุทธิ์อีลาสติน โพรไบโอทฤษฎีเครื่องหมายเพิ่มเติมสำหรับการปรากฏตัวของคอลลาเจนถูกทำลายในระหว่างการย่อยสลายและจึงไม่ได้ถูกตรวจพบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความบริสุทธิ์ของตัวอย่างที่วิเคราะห์ อีลาสตินถ้าอายุประมาณชีวเคมีที่จะแสดงบนแถบโปรตีนความบริสุทธิ์ของตัวอย่างที่จำเป็นสำหรับคุณภาพของการประมาณอายุ โปรตีนปนเปื้อนที่จะมีผลกระทบทางลบต่อผลการศึกษาจลนพลศาสตร์ของ AAR ขึ้นอยู่กับโครงสร้างโมเลกุลของโปรตีน ( ดู [ 24 ] ) ดังนั้น การขาดคอลลาเจน เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการวิเคราะห์ที่ถูกต้องของ AAR ในอีลาสติน . อีลาสตินมี 1.5 – 5.2 ASX / 1000 ตกค้าง ( ขึ้นอยู่กับตัวแปรประกบกัน ) เมื่อเทียบกับ 42 ASX / 1000 ตกค้างในหลอดเลือด อัลฟ่า 1 ( 3 ) คอลลาเจน [ 7 , 28 ] ช้าที่สุดใน racemisation จลนพลศาสตร์ของคอลลาเจนจะส่งผลในการการประเมินค่าต่ำไปของ AAR ในคอลลาเจน อีลาสติน ตัวอย่าง ปนเปื้อน การวิเคราะห์การศึกษาไม่ได้บ่งชี้ใด ๆจากการปนเปื้อน กับโปรโตคอลประยุกต์ผลิตที่นี่ มีการเตรียมอีลาสตินที่มีองค์ประกอบกรดอะมิโน ) ได้ ซึ่งในการปิดข้อตกลงกับองค์ประกอบของมาตรฐาน อีลาสติน และทดสอบองค์ประกอบกรดอะมิโนของอีลาสตินของมนุษย์จากลำดับข้อมูล ( รูปที่ 2 ) กรดอะมิโนเป็นองค์ประกอบที่แสดงปริมาณต่ำของไฮดรอกซิโพรลีนและชีวเคมี - หลียืนยันการขาดคอลลาเจน อีลาสติน ปนเปื้อนในตัวอย่าง แต่บาง prolyl ตกค้างในอีลาสตินจะเปลี่ยนผ่านไปรษณีย์ - แปลการเตรียมแบบ [ 18 ] แต่จะมากลดปริมาณเมื่อเทียบกับคอลลาเจน ดังนั้น การตรวจพบปริมาณตกค้าง hydroxyprolin ต่ำร่วมกับการขาด methionine เป็นตัวบ่งชี้ที่แข็งแกร่งสำหรับ อีลาสติน ความบริสุทธิ์ ทริป ตามทฤษฎีแล้วมีเครื่องหมายเพิ่มเติมสำหรับการแสดงตนของคอลลาเจนถูกทำลายในระหว่างการย่อย ดังนั้นจึงยังไม่พบ