We wanted to test our hypothesis th

We wanted to test our hypothesis that the gp33 epitope
would also be disrupted in most of the viral genomes recovered
from nonfluorescent plaques from the brains of protected animals.

Thus, we analyzed the portions of the genomes encoding
the ORF4a/gp33/EGFP fusion proteins from viruses isolated
from both fluorescent and nonfluorescent plaques and from
both protected and unprotected animals.

RT-PCR was carried
out to amplify a fragment encoding ORF4a/gp33/EGFP, using
primers representing sequences at the 3end of the spike gene
and the 5 end of ORF5 (FIJ81 and RIJ84, respectively [Table
1]);

the genomes of viruses isolated from the nonfluorescent
plaques contained deletions of various sizes; sequencing of
these amplified fragments, (using the same primers) demonstrated
deletions encompassing part or all of the EGFP coding
region.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราต้องการทดสอบสมมติฐานของเราที่ gp33 epitopeจะยังอยู่ระหว่างสองวันเป็น genomes ไวรัสที่กู้คืนจาก plaques nonfluorescent จากสมองของสัตว์ที่ได้รับการป้องกันดังนั้น เราวิเคราะห์บางส่วนของ genomes ที่เข้ารหัสโปรตีนอาหาร ORF4a/gp33/EGFP จากไวรัสที่แยกต่างหากจาก plaques เรืองแสง ทั้ง nonfluorescent และได้รับการป้องกัน ทั้งป้องกันสัตว์ ทำ RT-PCRออกขยายส่วน ORF4a/gp33/EGFP การเข้ารหัส การใช้ไพรเมอร์ที่แสดงลำดับท้าย 3 ยีนสไปค์และสิ้นสุด 5 ORF5 (FIJ81 และ RIJ84 ตามลำดับ [ตาราง1]); genomes ของไวรัสที่แยกต่างหากจากที่ nonfluorescentplaques อยู่ลบขนาดต่าง ๆ ลำดับเบสของแสดงเหล่านี้เอาต์ชิ้นส่วน, (ใช้ไพรเมอร์เหมือนกัน)ลบครอบคลุมบางส่วนหรือทั้งหมดของรหัส EGFPภูมิภาคที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราต้องการที่จะทดสอบสมมติฐานของเราว่า epitope gp33
ก็จะกระจัดกระจายในส่วนของจีโนมของไวรัสกู้คืนจากโล่ nonfluorescent จากสมองของสัตว์ที่มีการป้องกัน. ดังนั้นเราวิเคราะห์ส่วนของจีโนมการเข้ารหัสที่ORF4a / gp33 / EGFP โปรตีนฟิวชั่นจาก ไวรัสที่แยกได้จากทั้งโล่เรืองแสงและnonfluorescent และจากสัตว์ทั้งการป้องกันและไม่มีการป้องกัน. RT-PCR ได้ดำเนินการออกไปขยายการเข้ารหัสเศษORF4a / gp33 / EGFP โดยใช้ไพรเมอร์ที่เป็นตัวแทนของลำดับที่3 ในตอนท้ายของยีนขัดขวางและ 5? ในตอนท้ายของ ORF5 (FIJ81 และ RIJ84 ตามลำดับ [ตารางที่1]); จีโนมของไวรัสที่แยกได้จาก nonfluorescent โล่ที่มีการลบขนาดต่างๆ; ลำดับของชิ้นส่วนขยายเหล่านี้ (โดยใช้ไพรเมอร์เหมือนกัน) แสดงให้เห็นถึงการลบครอบคลุมบางส่วนหรือทั้งหมดของการเข้ารหัสEGFP ภูมิภาค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราต้องการที่จะทดสอบสมมติฐานของเราที่ gp33 ไวรัส
ก็จะหยุดชะงักในส่วนใหญ่ของจีโนมไวรัสหาย
จาก nonfluorescent โล่จากสมองของสัตว์คุ้มครอง

ดังนั้นเราวิเคราะห์ส่วนของจีโนม
orf4a / gp33 / egfp ฟิวชันโปรตีนจากไวรัสที่แยกได้จากทั้งสองเรืองแสงและ
nonfluorescent โล่และ จากทั้งปกป้องสัตว์


ไม่มีการเข้ารหัสนี้ถูกนำออกเพื่อขยายส่วน orf4a
/ gp33 / egfp การเข้ารหัสโดยใช้ primers ลำดับที่ 3 แทน
 จบขัดขวางยีน
และ 5  จบ orf5 ( fij81 และ rij84 ตามลำดับ [ โต๊ะ
1 ] ) ;

จีโนมของไวรัสที่แยกได้จากโล่ nonfluorescent
ที่มีอยู่ ลบขนาดต่างๆ การหาลำดับเบสของชิ้นส่วนของ
เหล่านี้ ( ใช้วิธีเดียวกัน
) แสดงลบครอบคลุมบางส่วนหรือทั้งหมดของ egfp นะครับ
)