วิธีการวัด CML การจ้างงานที่นี่จะดัดแปลงมาจากThe CML measuring method employed here is adapted from
Peng et al, (2010) ต่อไปนี้การขาดไขมันลดโปรตีนไฮโดรไลซิ, Peng et al. (2010). Following defatting, protein reduction, hydrolysis,
และอนุพันธ์โดยใช้ o-phthaldialdehyde กำหนด CML and derivatization using o-phthaldialdehyde, CML determination
ได้รับการดำเนินการโดยใช้น้ำพันธมิตรที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC ระบบ 600, พระเดชพระคุณ, MA, USA) ที่มีการตรวจจับเรืองแสง(น้ำ 474) ระบบ HPLC ได้รับการติดตั้งไฟน้ำคอลัมน์อาทิตย์C18 (150 4.6 มม? 5 ไมครอน; พระเดชพระคุณ, MA, USA) อัตราการไหลเป็น 1.0 มล. / นาทีและปริมาณการฉีด10 LL was performed using a Waters Alliance high-performance
liquid chromatography (HPLC System 600, Milord, MA, USA) with
a fluorescence detector (Waters 474). The HPLC system was
equipped with a Waters Sun Fire C18 column (150 4.6 mm,
5 lm; Milord, MA, USA). The flow rate was 1.0 ml/min and the
injection volume was 10 ll. The mobile phases were acetate buffer
and acetonitrile (9:1, v/v) (solvent A) and 50% acetonitrile (solvent
B). Detection was at 340 nm (excitation) and 455 nm (emission).
The peaks for CML-derivatives in the muffin samples were confirmed
by comparison with an authentic sample of CML provided
by PolyPeptide Laboratories France SAS (Strasbourg, France). Identified
compounds were quantified using the external standard calibration
procedure. The limit of detection (LOD) was 0.42 ng, the
limit of quantification (LOQ) was 1.29 ng, the recovery of the analyte
compared to the internal standard was 100% (SD = 10.03%),
and the repeatability (method precision) was 3.65% (coefficient
of variations).
การแปล กรุณารอสักครู่..
