Urine-derived human genomic DNA (gD

Urine-derived human genomic DNA (gDNA) has wide application in a variety of disciplines including
clinical medicine, sports, and forensic science. We describe a novel method for gDNA extraction from urine
samples using carboxylated magnetic nanoparticles (CMNPs) as solid-phase adsorbents. Sedimentation
associated with freezing of urine samples significantly reduces cell capture by CMNPs. However, the
addition of 10 mM EDTA and subsequent pH modification (pH 6.0–7.1) can re-dissolve urine sediments.
Purified gDNA ranged from around 0.1 kb to more than 23 kb. PCR using specific primers targeting K-ras,
GAPDH, CYP3A4 and GDF5 amplified 100% of varying sized gene fragments, verifying the high quality of the
isolated DNA. Successful PCR amplifications using DNA isolated from urine samples as small as 50 l were
demonstrated. Enrichment of urine cells and subsequent adsorption of DNA can be achieved with the
same CMNPs, greatly simplifying extraction procedures. The CMNP gDNA extraction technique proved
to be simple, rapid, sensitive and environmentally friendly, with application for routine laboratory use
and potentially within automated urine extraction platforms.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มาปัสสาวะมนุษย์ genomic DNA (gDNA) ได้ประยุกต์ใช้ความกว้างในหลากหลายสาขารวมถึง
ยาทางคลินิก กีฬา และนิติเวชวิทยา เราอธิบายวิธีนวนิยายสำหรับ gDNA สกัดจากปัสสาวะ
ตัวอย่างใช้ carboxylated แม่เหล็กเก็บกัก (CMNPs) เป็นของแข็งเฟส adsorbents ตกตะกอน
เกี่ยวข้องกับการแช่แข็งของปัสสาวะ ตัวอย่างลดเซลล์จับ โดย CMNPs อย่างไรก็ตาม ใน
เพิ่ม EDTA 10 มม.และปรับเปลี่ยนต่อค่า pH (pH 6.0 – 7.1) สามารถละลายตะกอนปัสสาวะได้อีก
Purified gDNA อยู่ในช่วงประมาณ 0.1 kb จากไปกว่า 23 kb PCR ที่ใช้ไพรเมอร์เฉพาะเป้าหมาย K-รา,
GAPDH, CYP3A4 และ GDF5 ขยาย 100% ของชิ้นส่วนของยีนขนาดต่าง ๆ ตรวจสอบคุณภาพของการ
ดีเอ็นเอแยกต่างหาก Amplifications PCR ประสบความสำเร็จโดยใช้ดีเอ็นเอแยกต่างหากจากตัวอย่างปัสสาวะขนาด 50 l
สาธิต ของเซลล์ปัสสาวะและดูดซับต่อมาของดีเอ็นเอสามารถทำได้ด้วยการ
CMNPs เดียวกัน อย่างมากให้แยกกระบวนการ เทคนิคสกัด gDNA CMNP พิสูจน์
จะง่าย รวดเร็ว สำคัญ และสิ่งแวด ล้อม ด้วยการประยุกต์ใช้ปฏิบัติการประจำ
และอาจภายในอัตโนมัติระบบสกัดปัสสาวะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปัสสาวะมาจากดีเอ็นเอของมนุษย์ (gDNA) มีโปรแกรมกว้างในความหลากหลายของสาขาวิชารวมทั้ง
การแพทย์คลินิกกีฬาและนิติวิทยาศาสตร์ เราอธิบายวิธีการใหม่ในการสกัด gDNA จากปัสสาวะ
ตัวอย่างการใช้อนุภาคนาโนแม่เหล็ก carboxylated (CMNPs) เป็นตัวดูดซับเฟสของแข็ง การตกตะกอน
ที่เกี่ยวข้องกับการแช่แข็งของตัวอย่างปัสสาวะอย่างมีนัยสำคัญช่วยลดการจับมือถือโดย CMNPs แต่
นอกเหนือจาก 10 มิลลิ EDTA และการเปลี่ยนแปลงพีเอชต่อมา (pH 6.0-7.1) สามารถกลับมาละลายตะกอนปัสสาวะ
บริสุทธิ์ gDNA ตั้งแต่รอบ 0.1 กิโลไบต์มากกว่า 23 กิโลไบต์ PCR โดยใช้ไพรเมอร์โดยเฉพาะการกำหนดเป้าหมาย K-ras,
gapdh, CYP3A4 และ GDF5 ขยาย 100% ของชิ้นส่วนที่แตกต่างกันของยีนขนาดการตรวจสอบที่มีคุณภาพสูงของ
ดีเอ็นเอแยก amplifications PCR ที่ประสบความสำเร็จโดยใช้ดีเอ็นเอที่แยกได้จากตัวอย่างปัสสาวะมีขนาดเล็กเป็น 50? ลิตรได้
แสดงให้เห็นถึง เพิ่มคุณค่าของเซลล์และการดูดซับปัสสาวะต่อมาของดีเอ็นเอสามารถทำได้ด้วย
CMNPs เดียวกันง่ายมากขั้นตอนการสกัด CMNP gDNA เทคนิคการสกัดการพิสูจน์แล้วว่า
จะง่ายอย่างรวดเร็วมีความสำคัญและเป็นมิตรกับสิ่งแวดล้อมด้วยการประยุกต์ใช้สำหรับการใช้งานในห้องปฏิบัติการตามปกติ
และอาจปัสสาวะอัตโนมัติภายในแพลตฟอร์มการสกัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปัสสาวะได้ดีเอ็นเอมนุษย์ ( gdna ) มีการประยุกต์ใช้อย่างกว้างขวางในหลากหลายสาขารวมทั้ง
ยา , คลินิกกีฬา และนิติวิทยาศาสตร์ เราอธิบายวิธีการใหม่สำหรับการสกัด gdna จากปัสสาวะ
carboxylated ตัวอย่าง โดยใช้อนุภาคนาโนแม่เหล็ก ( cmnps ) เป็นส่วนดูดซับ การตกตะกอน
เกี่ยวข้องกับการแช่ตัวอย่างปัสสาวะช่วยลดเซลล์จับโดย cmnps . อย่างไรก็ตาม
เพิ่ม 10 mM EDTA และการปรับ pH ( pH 6.0 ตามมา ( 7.1 ) สามารถจะละลายตะกอนปัสสาวะ gdna มีค่าประมาณ 0.1
บริสุทธิ์บางครั้งมากกว่า 23 กิโลไบต์ วิธี PCR โดยใช้ primers จำเพาะเป้าหมายตามลำดับและ gapdh
, , ( gdf5 ขยาย 100% ของขนาดชิ้นส่วนยีนที่แตกต่างกัน การตรวจสอบคุณภาพของ
แยกดีเอ็นเอที่ประสบความสำเร็จเทคนิค amplifications ใช้ดีเอ็นเอที่แยกได้จากตัวอย่างปัสสาวะขนาดเล็กเป็น 50  -
แสดงให้เห็นถึง เสริมเซลล์ปัสสาวะและการดูดซับที่ตามมาของดีเอ็นเอสามารถทำได้ด้วย
cmnps เดียวกันเป็นอย่างมากง่ายขั้นตอนการสกัด การ cmnp gdna เทคนิคการสกัดพิสูจน์
จะง่าย เร็ว ไว และเป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม ด้วยการใช้ห้องปฏิบัติการ
ตามปกติและอาจภายในแพลตฟอร์มการสกัดปัสสาวะอัตโนมัติ