For measurement of GAD activity, GB

For measurement of GAD activity, GBR (0.5 g) was ground
with 4 mL phosphate buffer (pH 5.8) in an ice bath for extraction
of the enzyme. The homogenate was centrifuged at
10,000 × g for 15 min at 4 °C by using refrigerated high speed
centrifuge (5810R, Eppendorf, SN, Germany). The resulting supernatant
was the crude GAD used for assay of the activity of
GAD. The reaction mixture which consisted of 0.1 mL of crude
enzyme liquid and 0.2 mL of substrate was incubated for 2 h
at 30 °C and then terminated by adding 0.2 mL of 0.2 mol L−1
borate buffer (pH 9.0) and 1 mL of 6% phenol and 0.4 mL of 9%
sodium hypochlorite. After intensive oscillation, the mixture
was put in boiling water for 10 min, then put in ice bath for
20 min.The mixture was analyzed colorimetric at 630 nm wavelength
to determine absorption value. The GAD activity was
defined with reference to a 1 mol of GABA produced at 30 °C
per min per unit dry weight (mol GABA min−1 g−1 DW).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สำหรับวัดกิจกรรมกาด GBR (0.5 กรัม) ถูกพื้น
กับ 4 mL ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 5.8) ในการอาบน้ำแข็งสำหรับสกัด
ของเอนไซม์นี้ Homogenate ถูก centrifuged ที่
10, 000 ซื้อ g สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C โดยใช้ความเร็วสูงพร้อมตู้เย็น
เครื่องหมุนเหวี่ยง (5810R, Eppendorf, SN เยอรมนี) Supernatant ผล
ถูกกาดน้ำมันที่ใช้สำหรับการวิเคราะห์ของกิจกรรมของ
GAD ผสมปฏิกิริยาซึ่งประกอบด้วย 0.1 mL ของดิบ
เหลวเอนไซม์และ 0.2 mL ของพื้นผิวถูก incubated สำหรับ 2 h
ที่ 30 ° C และสิ้นสุดลง โดยการเพิ่ม 0.2 mL ของ 0.2 โมล L−1
borate บัฟเฟอร์ (pH 9.0) และ 1 มล. 6% วาง และ 0.4 mL 9%
ฟอก หลังจากเร่งรัดสั่น ผสม
ถูกใส่ในน้ำสำหรับ 10 นาทีเดือด แล้วใส่ในอ่างน้ำแข็งสำหรับ
20 นาทีส่วนผสมถูกวิเคราะห์เทียบเคียงที่ 630 nm ความยาวคลื่น
เพื่อกำหนดค่าการดูดซึม กิจกรรมกาดถูก
กำหนดโปร่งโมล 1 ของสารกาบาในการผลิตที่ 30 ° C
ต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนัก (โมลสารกาบา min−1 g−1 DW) ที่แห้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับการวัดของกิจกรรม GAD, GBR (0.5 กรัม) เป็นพื้นดิน
ที่มี 4 ฟอสเฟตบัฟเฟอร์มิลลิลิตร (pH 5.8) ในอ่างน้ำแข็งสำหรับการสกัด
ของเอนไซม์ homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่
10,000 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C โดยใช้ตู้เย็นความเร็วสูง
centrifuge (5810R, Eppendorf, SN, เยอรมนี) ใสทำให้
ถูกน้ำมันดิบ GAD ใช้สำหรับการทดสอบของกิจกรรมของ
GAD ผสมปฏิกิริยาซึ่งประกอบไปด้วย 0.1 มิลลิลิตรน้ำมันดิบ
ของเหลวเอนไซม์และ 0.2 มิลลิลิตรของพื้นผิวถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง
ที่ 30 ° C และจากนั้นสิ้นสุดลงโดยการเพิ่ม 0.2 มิลลิลิตร 0.2 mol L-1
borate บัฟเฟอร์ (pH 9.0) และ 1 มิลลิลิตรของ 6 ฟีนอล% และ 0.4 มิลลิลิตร 9%
โซเดียมไฮโปคลอไรต์ หลังจากที่ความผันผวนอย่างเข้มข้นผสม
ใส่ในน้ำเดือดเป็นเวลา 10 นาทีแล้วใส่ในอ่างน้ำแข็ง
20 min.The ส่วนผสมวิเคราะห์สีที่ 630 นาโนเมตรความยาวคลื่น
ในการกำหนดมูลค่าการดูดซึม กิจกรรม GAD ถูก
กำหนดด้วยการอ้างอิงถึง 1 ไมโครโมลของ GABA ผลิตที่ 30 องศาเซลเซียส
ต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนักแห้ง (? โมกาบานาที 1 กรัม-1 DW)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับวัดกาดกิจกรรมเพาะ ( 0.5 กรัม ) คือพื้นดิน
4 ml ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 5.8 ) ในน้ำแข็งอาบน้ำสำหรับการสกัด
ของเอนไซม์ โดยแยกเป็นระดับที่
10 × G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 องศา C โดยใช้ความเร็วสูง ( 5810r refrigerated centrifuge
เพนดอร์ฟ , SN , เยอรมัน ) ผลดิบใช้เป็นกาดน่าน

ใช้ในกิจกรรมของกาดปฏิกิริยาผสมซึ่งประกอบด้วยของเหลว 0.1 มิลลิลิตรเอนไซม์ดิบ
และ 0.2 มล ( ถูก ) 2 H
ที่ 30 ° C และสิ้นสุดลงโดยการเพิ่ม 0.2 มล. 0.2 mol − 1 L
บอเรตบัฟเฟอร์ pH 9.0 ) และ 1 มิลลิลิตรของฟีนอล 6% และ 0.4 มล. 9 %
โซเดียม ไฮโปคลอไรท์ . หลังจากคาบ เข้มข้น ผสม
ถูกใส่ในน้ำเดือด 10 นาที แล้วเอาน้ำแข็งในอ่าง
20 นาทีส่วนผสมที่ 630 nm ความยาวคลื่น Colorimetric วิเคราะห์
หาค่าการดูดซึม กิจกรรมที่กาด
นิยามอ้างอิง 1  โมลของกาบาผลิต 30 ° C
ต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนักแห้ง (  mol −− 1 GABA มิน 1 กรัม แห้ง )