2. Materials and methods2.1. Synthe

2. Materials and methods

2.1. Synthesis of benzamidoalanine

One gram (5 mmol) of alanine was dissolved in 25 ml of 5% NaOH solution in a conical flask. Benzoyl chloride (2.25 ml, 20 mmol) was added in five 0.5-ml increments, and the flask was shaken vigorously until all the chloride had reacted. After acidification with diluted hydrochlo- ric acid (1 ml), the crude product was washed with cold ether. The desired product was recrystallized from ethanol.

2.2. Preparation of complexes

Triorganotin salts (0.199 g, 1 mmol) were added drop wise with constant stirring to a hot toluene solution of the ligand (0.193 g, 1 mmol). Then, the solution was refluxed for 6 h with a magnetic stirrer, cooled and filtered.
After drying at 60 ◦C, the solid obtained was recrystal-
lized in a mixture of ethanol and petroleum ether. The purity of the ligand and its complexes were checked by thin-layer chromatography with silica gel-G as the adsorbent.

2.3. Spectroscopy

Elemental C, H, N and S analysis was carried out on a Fison EA 1108 analyser, and Fourier trans-
form infrared spectra in the range 4000–370 cm−1 were

recorded as potassium bromide discs on a Perkin-Elmer spectrophotometer GX. Molar conductance measure- ments were made in anhydrous dimethylformamide at
25 ◦C on an Inolop-Cond Level 1 WTW. The atomic
absorption spectra of the complexes were measured on a Shimadzu 680-cc spectrometer. The 1 H, 13 C and 119 Sn nuclear magnetic resonance spectra were recorded on a Jeol 400 MHz spectrometer, relative to the internal standard tetramethylsilane. Melting-points were deter- mined in open capillary tubes with an Electrothermal
9300 digital apparatus.


2.4. Biological investigations

The antibacterial activity of the synthesized com- pounds was tested in four Gram-positive bacteria (Staphylococcus aureus ATCC-9144, S. epidermidis ATCC-155, Micrococcus luteus ATCC-4698 and Bacil- lus cereus ATCC-11778) and three Gram-negative bacteria (Escherichia coli ATCC-25922 and Pseu- domonas aeruginosa ATCC-2853) in nutrient agar medium. The antifungal activity of the compounds was tested in Aspergillus niger ATCC-9029 and A. fumiga- tus ATCC-46645 in Sabouraud dextrose agar. All the fungal and mould strains were clinical isolates, charac- terized by conventional morphological and biochemical methods.
The medium was sterilized by autoclaving at 120 ◦C
for 30 min, inoculated at a temperature of 40–50 ◦C
with 1 mL/100 mL of suspensions (105 cfu mL−1 ) of
the microorganisms (matched to McFarland barium sulfate standard) and poured onto a petri dish to a depth of 3–4 mm. Filter paper impregnated with the test compounds ( g/mL in dimethylformamide) was placed on the solidified medium. The plates were pre-incubated for 1 h at room temperature and
incubated at 37 ◦C for 24 and 48 h for antibacterial
and antifungal activities, respectively. Ciprofloxacin (100 g/disc) and ketoconazole (100 g/disc) were used as standards for antibacterial and antifungal activity, respectively.
The minimum inhibitory concentrations (MICs), the lowest concentrations of the test substances exhibiting no visible growth of bacteria or fungi on the plate, were determined by the agar streak dilution method. Stock solutions of the synthesized compounds (100 g/mL) in dimethylformamide were prepared, and graded quanti- ties were incorporated into specified quantities of molten sterile nutrient agar for determination of antibacterial activity and in Sabouraud dextrose agar medium for antifungal activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การสังเคราะห์ benzamidoalanineกรัม (5 mmol) หนึ่งของอะลานีนถูกละลายใน 25 มล.ของ 5% NaOH โซลูชันในหนาวทรงกรวย เบนโซอิลคลอไรด์ (หุ้น 2.25 มล 20 mmol) เข้ามาทีละ 0.5 ml ห้า และมีเขย่าหนาวดั่งจนคลอไรด์ทั้งหมดมีปฏิกิริยาที่เกิดขึ้น หลังจากที่ยูมีกรด hydrochlo-ric แตกออก (1 ml), ผลิตภัณฑ์น้ำมันถูกล้าง ด้วยอีเทอร์เย็น ผลิตภัณฑ์ต้องเป็น recrystallized จากเอทานอล2.2 การเตรียมสิ่งอำนวยความสะดวกเพิ่มเกลือ Triorganotin (0.199 g, 1 mmol) ปล่อยฉลาด ด้วยคงกวนโซลูชันโทลูอีนร้อนของลิแกนด์ (0.193 g, 1 mmol) แล้ว โซลูชั่น refluxed สำหรับ h 6 มีช้อนคนเหล็ก ระบายความร้อนด้วย และกรองหลังจากการอบแห้งที่ 60 ◦C ของแข็งที่ได้รับคือ recrystal-lized ในส่วนผสมของเอทานอลและปิโตรเลียมอีเทอร์ ความบริสุทธิ์ของลิแกนด์และสิ่งอำนวยความสะดวกถูกตรวจสอบ โดย chromatography ชั้นบาง ๆ กับซิลิก้าเจล-G เป็น adsorbent2.3. กวิเคราะห์ธาตุ C, H, N และ S ได้ดำเนินการใน Fison EA 1108 analyser และทรานส์ฟูรีเย-แบบฟอร์มแรมสเป็คตราอินฟราเรดในช่วง 4000 – 370 cm−1 ได้ บันทึกเป็นโพแทสเซียมโบรไมด์ดิสก์บนเอลเมอเพอร์เครื่องทดสอบกรดด่าง GX การทำสบต้านทานวัด ments dimethylformamide ไดที่25 ◦C ในการ Inolop Cond ระดับ 1 WTW ในอะตอมแรมสเป็คตราการดูดซึมของคอมเพล็กซ์มีวัดบนกับ Shimadzu 680 cc สเปกโตรมิเตอร์ 1 H, 13 C และแรมสเป็คตราการสั่นพ้องแม่เหล็กนิวเคลียร์ Sn 119 ถูกบันทึกบนตัว Jeol 400 MHz สเปกโตรมิเตอร์ สัมพันธ์ tetramethylsilane มาตรฐานภายใน จุดละลายถูกขัดขวาง - ขุดในท่อเปิดรูพรุนด้วยการ Electrothermalเครื่องมือดิจิตอล 93002.4 การชีวภาพสืบสวนทดสอบกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรียของสังเคราะห์ com ปอนด์สี่แบคทีเรีย (หมอเทศข้างลาย Staphylococcus ATCC-9144, S. epidermidis ATCC-155 รำ luteus ATCC 4698 และ Bacil lus cereus ATCC 11778) และสามแบคทีเรียแกรมลบแบคทีเรีย (Escherichia coli ATCC 25922 และ Pseu domonas aeruginosa ATCC-2853) ใน agar ธาตุอาหาร ทดสอบกิจกรรมสารต้านเชื้อรา Aspergillus ไนเจอร์ ATCC-9029 และ A. fumiga-tus ATCC-46645 ใน Sabouraud agar ขึ้น ทั้งหมดเชื้อราและเชื้อสายพันธุ์แยกคลินิก charac-terized โดยวิธีสัณฐาน และชีวเคมีทั่วไปสื่อถูก sterilized โดย autoclaving ที่ 120 ◦Cใน 30 นาที inoculated ที่อุณหภูมิ 40 – 50 ◦Cมี 1 mL/100 mL ของบริการ (105 cfu mL−1) ของจุลินทรีย์ (ตรงกับ McFarland แบเรียมซัลเฟตมาตรฐาน) และพร้อมสระลงบนจานเพาะเชื้อให้ความลึกของ 3-4 mm. กระดาษ impregnated กับสารทดสอบ (g/mL ใน dimethylformamide) ถูกวางบนกลาง solidified กรอง แผ่นที่ incubated ก่อนสำหรับ h 1 ที่อุณหภูมิห้อง และincubated ที่ ◦C 37 24 และ 48 h สำหรับยาปฏิชีวนะและ กิจกรรมการต้านเชื้อรา ตามลำดับ Ciprofloxacin (100 g/ดิสก์) และ ketoconazole (100 g/ดิสก์) ใช้เป็นมาตรฐานสำหรับกิจกรรมการต้านเชื้อแบคทีเรีย และต้านเชื้อรา ตามลำดับที่ต่ำสุดลิปกลอสไขความเข้มข้น (MICs), ความเข้มข้นต่ำสุดของสารทดสอบอย่างมีระดับไม่เจริญเติบโตที่เห็นของแบคทีเรียหรือเชื้อราบนแผ่น ถูกกำหนด โดยวิธี agar ริ้วเจือจาง หุ้นโซลูชั่นของสารประกอบสังเคราะห์ (100 g/mL) ใน dimethylformamide ถูกเตรียมไว้ และมีการจัดระดับ quanti-ผูกถูกรวมอยู่ในสินค้าของเหลวใส่ธาตุอาหาร agar สำหรับการกำหนดกิจกรรมต้านเชื้อแบคทีเรีย และใน Sabouraud ขึ้น agar สำหรับกิจกรรมต้านเชื้อรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 . การสังเคราะห์ benzamidoalanine

หนึ่งกรัม ( 5 มิลลิโมล ) ของอะลานีนถูกละลายในสารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ 5% 25 ml ในขวดรูปกรวย . เบนโซอิลคลอไรด์ ( 20 มิลลิโมล , 250 มล. ) เพิ่มในห้า 0.5-ml น้อย และขวดเหล้าที่ถูกเขย่าอย่างแรงจนคลอไรด์มีเอาคืน หลังจากสร้างกรดเจือจางด้วย hydrochlo - ริค แอซิด ( 1 มิลลิลิตรผลิตภัณฑ์ดิบที่ล้างเย็น อีเทอร์ สินค้าที่ต้องการได้ recrystallized จากเอทานอล .

. . การเตรียมสารประกอบเกลือ (

triorganotin 0.199 กรัม , 1 มิลลิโมล ) ถูกเพิ่มลงปัญญาด้วยคงตื่นเต้นกับสารละลายโทลูอีนร้อนของลิแกนด์ ( 0.193 กรัม , 1 มิลลิโมล ) แล้วสารละลายจะ refluxed 6 H กับ stirrer แม่เหล็ก , เย็นและกรอง .
หลังจากการอบแห้งที่ 60 ◦ Cของแข็งได้รับ recrystal -
lized ในส่วนผสมของเอทานอลและปิโตรเลียมอีเทอร์ . ความบริสุทธิ์ของสารประกอบเชิงซ้อนของลิแกนด์ และถูกตรวจสอบโดยเทคนิค TLC พบว่าซิลิกาเป็นสารดูดซับ gel-g

2.3 สเปกโทรสโกปี

ธาตุ C , H , N และ S วิเคราะห์บน fison EA และวิเคราะห์ฟูเรียร์ทรานส์ฟอร์มและ -
อินฟราเรดสเปกตรัมในช่วง 4 , 000 – 370 cm − 1 เป็น

บันทึกเป็นโพแทสเซียมโบรไมด์ดิสก์บนเพอร์กินเอลเมอร์ Spectrophotometer GX . วัดความนำไฟฟ้าฟันกราม ments ถูกทำในรัสการล้างพิษที่
25 ◦ C ในระดับที่อยู๋ inolop 1 wtw . ปรมาณู
การดูดกลืนรังสีของสารประกอบเชิงซ้อน มีวัดอยู่บน Shimadzu 680 ซีซีสเปกโตรมิเตอร์ 1 H , 13 C และ 119 สินี นิวเคลียร์แมกเนติกเรโซแนนซ์สเปกตรัมได้ถูกบันทึกไว้ในจอล 400 MHz สเปกโตรมิเตอร์เทียบกับเตตร้าเมทิลไซเลนมาตรฐานภายใน จุดหลอมเหลวคือยับยั้ง - ขุดในหลอด capillary เปิดที่มีการศึกษา 9300 อุปกรณ์ดิจิตอล



2.4 . การตรวจสอบทางชีวภาพ

กิจกรรม antibacterial ของสังเคราะห์ com - ปอนด์ถูกทดสอบในแบคทีเรียกรัมบวกสี่ ( Staphylococcus aureus atcc-9144 s atcc-155 , อาหาร ,luteus และ Micrococcus atcc-4698 bacil - lus cereus atcc-11778 ) และแบคทีเรียแกรมลบ ( 3 atcc-25922 Escherichia coli และเชื้อ pseu - domonas atcc-2853 ) ในอาหารวุ้นสารอาหาร มีฤทธิ์ต้านราของสารประกอบที่ถูกทดสอบใน atcc-9029 Aspergillus niger และ fumiga - ทัส atcc-46645 ใน sabouraud dextrose agar ทุกสายพันธุ์ เชื้อราและเชื้อราไอโซคลินิก ,charac - terized โดยวิธีสัณฐานวิทยาและวิธีการทางชีวเคมี .
) ฆ่าเชื้อโดยอัตราส่วนโฟกัสที่ 120 ◦ C
30 นาที เชื้อที่อุณหภูมิ 40 - 50 ◦ C
1 มล. / 100 ml ของสารแขวนลอย ( 105 CFU ml − 1 )
จุลินทรีย์ ( ตรงกับมาตรฐานแบเรียมซัลเฟต แมคฟาร์แลนด์ ) และราดลงบนจานแก้วให้ลึก 3 - 4 มิลกระดาษกรองชุบด้วยสารทดสอบ ( g / ml ในการล้างพิษ ) วางอยู่บนแข็งปานกลาง จานถูกก่อนบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้องและ
บ่มที่ 37 ◦เป็นเวลา 24 และ 48 ชั่วโมงสำหรับแบคทีเรียและเชื้อรา
กิจกรรมตามลำดับ ซิโปรฟลอกซาซิน ( 100 กรัม / แผ่น ) และคีโตโคนาโซล ( 100 กรัม / แผ่น ) ถูกใช้เป็นมาตรฐานสำหรับกิจกรรมของแบคทีเรียและเชื้อราตามลำดับ ความเข้มข้นต่ำสุดของสาร
( R ) , ความเข้มข้นต่ำสุดของการทดสอบสารแสดงการเจริญของแบคทีเรียหรือเชื้อราที่มองเห็นบนจาน ถูกกำหนดโดยวิธี agar dilution ริ้ว . หุ้นโซลูชั่นของสารที่สังเคราะห์ได้ ( 100 g / ml ) ในการล้างพิษได้เตรียมะเภท และคะแนน -- ความสัมพันธ์ถูกรวมเข้าไปในที่ระบุปริมาณของเหลวปลอดเชื้ออาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารหาฤทธิ์ต้านแบคทีเรียและเชื้อรา sabouraud dextrose agar medium สำหรับกิจกรรม
.