2.4. LC–MS–MS analysisThe LC–MS ana

2.4. LC–MS–MS analysis
The LC–MS analysis was done according to method of Rodríguez
et al. (2012), with minor modification. Calibration equation, correlation,
limit of detection (LOD), retention time and m/z > m/z for
TTX analyzed by LC/MS/MS were determined as
Y = 26050.51  135991.53, 0.9985, 0.01, 11.69 (min) and
320 > 302, respectively. The LC–MS–MS system consisting of an
Agilent 6460 triple quadrupole mass spectrometer coupled to an
Agilent 1200 HPLC system was used (Agilent Technologies, Inc.,
Santa Clara, CA, USA). The LC system operated with the ESI (electrospray
ionization) interface in positive ion mode using the following
parameters: curtain gas, 15 psi; collision-activated
dissociation gas, 6 psi; ion spray voltage, 4000 V; temperature,
350 C; nebulizer pressure, 40 psi; these parameters had been previously
optimized using the TTX standard. This analysis was performed
by using Supelco C18 column (4.6  250 mm; 5 lm).
Toxins were eluted within the column with two mobile phases
formed using 1% acetonitrile; 20 mM heptafluorobutyric acid
(Sigma-Aldrich); 20 mM ammonium hydroxide (Sigma-Aldrich)
and 10 mM ammonium formate (Fluka) (pH 4.0 with formic acid)
(eluent A) and the same mixture, but with 5% acetonitrile (eluent
B) using the following gradient: 100% A for the first 22 min, 100%
mobile phase B for the next 18 min and back to 100% A for the
following 3 min before the next injection and flow rate was
0.4 ml/min. Column oven temperature was set at 20 C and
injection volume was 4 ll. The MS was operated in multiple reactions
monitoring (MRM) mode, analyzing two product ions per compound:
one for quantification and the other for confirmation. The
mass spectrometer parameters were adjusted to obtain a signal of
maximum intensity and stability. For the MS optimization, the
sample solution was directly infused into the electrospray source at
a 0.2ml/min flow rate with a syringe pump. The MS was operated
in the positive ion mode using the product ion scan with a cone
gas, 40 V; capillary voltage, 2.8 kV; source temperature, 100 C;
desolvation temperature, 350 C; collision energy, 3 eV.
2.5. Statistical analyses
All experiments were carried out in triplicate and the results
were reported as the mean and standard deviation of these measurements.
A one-way analysis of variance (ANOVA) was run using
the SPSS version 19 software (SPSS, Chicago, Illinois, USA) and the
Duncan’s multiple range test comparisons at P value of

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. LC – MS – MS วิเคราะห์วิเคราะห์ LC – MS ทำตามวิธีของปีet al. (2012), มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย เทียบสมการ ความสัมพันธ์ขีดจำกัดของการตรวจจับ (LOD), เวลาเก็บข้อมูล และ m/z > m/z สำหรับกำหนดเป็น TTX วิเคราะห์ โดย LC/MS/MSY = 26050.51 135991.53, 0.9985, 0.01, 11.69 (นาที) และ320 > 302 ตามลำดับ ระบบ LC – MS – MS ประกอบด้วยการ6460 Agilent quadrupole สามสเปกโตรมิเตอร์มวลชนควบคู่กับการใช้ระบบ HPLC Agilent 1200 (Agilent Technologies, Inc.ซานตาคลารา CA, USA) ระบบ LC มี ESI (มิกส์ไอออไนซ์) อินเตอร์เฟซในโหมดไอออนบวกโดยใช้ต่อไปนี้พารามิเตอร์: ม่านแก๊ส 15 psi ชนในการเรียกใช้ก๊าซ dissociation, 6 psi แรงดันไฟฟ้าสเปรย์ไอออน 4000 V อุณหภูมิ350 C ฝอยละอองความดัน 40 psi พารามิเตอร์เหล่านี้ที่ได้รับก่อนหน้านี้ปรับใช้มาตรฐาน TTX ทำการวิเคราะห์นี้โดยใช้คอลัมน์ Supelco C18 (4.6 250 mm; 5 lm)สารพิษถูก eluted ภายในคอลัมน์ที่มีระยะเคลื่อนที่สองใช้ acetonitrile 1% กรด heptafluorobutyric 20 มม.(Sigma Aldrich); 20 มม.แอมโมเนียไฮดรอกไซด์ (Sigma Aldrich)และรูปแบบเอกสารแอมโมเนีย 10 มม. (Fluka) (pH 4.0 กับกรดฟอร์มิก)(eluent A) และส่วน ผสมเดียวกัน แต่ ด้วย acetonitrile 5% (eluentข) ใช้การไล่ระดับต่อไปนี้: 100%, 100% A สำหรับ 22 นาทีแรกโทรศัพท์มือถือระยะ B 18 นาทีถัดไป และกลับ 100% A สำหรับการต่อ 3 นาทีก่อนฉีดถัดไปและอัตราการไหลได้0.4 ml/นาที อุณหภูมิเตาอบคอลัมน์ถูกตั้งไว้ที่ 20 C และปริมาณฉีดได้ 4 จะ MS ที่ดำเนินการในหลายปฏิกิริยาตรวจสอบโหมด (MRM) วิเคราะห์สองผลิตภัณฑ์ไอออนต่อสาร:หนึ่งสำหรับนับและอื่น ๆ สำหรับการยืนยัน การสเปกโตรมิเตอร์มวลพารามิเตอร์ถูกปรับการรับสัญญาณของความเข้มสูงสุดและเสถียรภาพ สำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพ MS การโซลูชันตัวอย่างถูกผสมโดยตรงลงในแหล่งมิกส์ที่อัตราการไหล 0.2 มล./นาที ด้วยเครื่องสูบน้ำเข็ม ดำเนินการ MSในโหมดไอออนบวกไอออนผลิตภัณฑ์ใช้สแกน ด้วยกรวยก๊าซ 40 V แรงดันไฟฟ้าฝอย 2.8 kV แหล่งที่มา อุณหภูมิ 100 Cอุณหภูมิ desolvation, 350 C แรงกระแทก 3 eV2.5. สถิติวิเคราะห์ทั้งหมดทดลองดำเนินการในลข้อและผลลัพธ์มีรายงานเป็นค่าเฉลี่ยและส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของการวัดเหล่านี้มีทางเดียวการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ถูกเรียกใช้ซอฟต์แวร์ SPSS รุ่น 19 (SPSS ชิคาโก อิลลินอยส์ สหรัฐอเมริกา) และดันแคนของหลายช่วงทดสอบการเปรียบเทียบที่ค่า P ของ < 0.05 ได้เรียกใช้การตรวจสอบความแตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 LC-MS-MS วิเคราะห์
การวิเคราะห์ LC-MS ได้ทำตามวิธีการของRodríguez
, et al (2012) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สมการสอบเทียบความสัมพันธ์
ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) เวลาการเก็บรักษาและ m / z> M / z สำหรับ
TTX วิเคราะห์โดย LC / MS / MS ได้รับการพิจารณาเป็น
Y = 26,050.51? 135,991.53, 0.9985, 0.01, 11.69 (ต่ำสุด) และ
320> 302 ตามลำดับ ระบบ LC-MS-MS ประกอบด้วย
Agilent 6460 สามสเปกโตรมิเตอร์มวล quadrupole ควบคู่ไปยัง
ระบบ HPLC Agilent 1200 ถูกนำมาใช้ (Agilent Technologies, Inc,
ซานตาคลารา, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ระบบ LC ดำเนินการกับ (ESI electrospray
ไอออนไนซ์) อินเตอร์เฟซในโหมดไอออนบวกโดยใช้ต่อไปนี้
พารามิเตอร์: ก๊าซม่าน 15 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว; การปะทะกันที่ทำงานโดยใช้
ก๊าซแยกออกจากกัน, 6 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว; ไอออนแรงดันสเปรย์, 4000 V; อุณหภูมิ
350 องศาเซลเซียส; ความดัน nebulizer 40 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว; พารามิเตอร์เหล่านี้เคยถูก
ปรับให้เหมาะสมโดยใช้มาตรฐาน TTX การวิเคราะห์นี้ได้ดำเนินการ
โดยใช้ Supelco C18 คอลัมน์. (4.6 มม 250;? 5 LM)
สารพิษที่ถูกชะภายในคอลัมน์ที่มีสองขั้นตอนโทรศัพท์มือถือ
รูปแบบที่ใช้ acetonitrile 1%; 20 มิลลิเมตรกรด heptafluorobutyric
(Sigma-Aldrich); 20 มิลลิเมตรแอมโมเนียมไฮดรอกไซ (Sigma-Aldrich)
และ 10 มิลลิแอมโมเนียมรูปแบบ (Fluka) (pH 4.0 ที่มีกรดฟอร์มิค)
(ชะ A) และส่วนผสมเดียวกัน แต่มี acetonitrile 5% (ชะ
B) ด้วยการไล่ระดับสีต่อไปนี้: ผล 100% สำหรับ 22 นาทีแรก 100%
เฟสเคลื่อนที่ B สำหรับถัดไป 18 นาทีและกลับมาถึง 100% ผลการดำเนิน
ต่อไป 3 นาทีก่อนที่จะฉีดต่อไปและเป็นอัตราการไหล
0.4 มล. / นาที คอลัมน์อุณหภูมิเตาอบตั้งอยู่ที่ 20 องศาเซลเซียสและ
ฉีดปริมาณ 4 LL นางสาวได้รับการดำเนินการในการเกิดปฏิกิริยาหลาย
โหมดการตรวจสอบ (MRM), การวิเคราะห์ไอออนสองสินค้าต่อสารประกอบ:
หนึ่งสำหรับปริมาณและอื่น ๆ สำหรับการยืนยัน
พารามิเตอร์สเปกโตรมิเตอร์มวลมีการปรับเพื่อให้ได้สัญญาณของ
ความเข้มสูงสุดและความมั่นคง สำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพ MS ที่
สารละลายตัวอย่างได้รับ infused โดยตรงในแหล่ง electrospray ที่
อัตราการไหล 0.2ml / นาทีพร้อมปั๊มหลอดฉีดยา นางสาวดำเนินการ
ในโหมดไอออนบวกในการใช้ผลิตภัณฑ์ไอออนสแกนด้วยกรวย
ก๊าซ 40 V; แรงดันของเส้นเลือดฝอย 2.8 กิโลโวลต์; อุณหภูมิแหล่งที่มา 100 c;
อุณหภูมิ desolvation 350 C; พลังงานการชนกัน 3 eV.
2.5 สถิติการวิเคราะห์
การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าและผลที่
ได้รับรายงานว่ามีค่าเฉลี่ยและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของการวัดเหล่านี้.
การวิเคราะห์ทางเดียวของความแปรปรวน (ANOVA) คือการทำงานโดยใช้
SPSS รุ่น 19 ซอฟแวร์ (SPSS, ชิคาโก, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกา ) และ
ดันแคนกับการทดสอบช่วงหลายที่ค่า P ของ <0.05 ถูก
เรียกใช้ในการกำหนดความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . LC MS และ MS และการวิเคราะห์LC MS และวิเคราะห์ตามวิธีของลุยส์โรดรีเกซ . kgmet al . ( 2012 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สมการสหสัมพันธ์ของการสอบเทียบขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) เวลาเก็บกักและ M / Z > M / Z สำหรับทีทีเ กซ์โดยใช้ LC / MS / MS ได้รับการพิจารณาเป็นY = 26050.51 135991.53 0.9985 , 0.01 , 11.69 ( มิน ) และ320 > 302 , ตามลำดับ LC MS และ MS ซึ่งระบบประกอบด้วยด้าน 6460 สามคำคู่กับแมสสเปกโทรมิเตอร์Agilent 1200 ระบบใช้ HPLC ( Agilent Technologies , Inc . ,ซานตาคลาร่า , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ระบบ LC ดำเนินการกับ ESI ( วิธีพ่นละอองไฟฟ้าการแตกตัวเป็นไอออนประจุบวก ) ส่วนในโหมดการใช้ดังต่อไปนี้พารามิเตอร์ : ม่านก๊าซ 15 PSI ; ชนเปิดการแยกตัวออกก๊าซ 6 psi ; ไอออนสเปรย์แรงดัน 4000 v ; อุณหภูมิ350 C ; nebulizer ความดัน 40 psi ; พารามิเตอร์เหล่านี้ที่ได้รับก่อนหน้านี้เพิ่มประสิทธิภาพการใช้มาตรฐานทีทีเ กซ์ . การวิเคราะห์นี้แสดงโดยใช้ supelco คอลัมน์ C18 4.6 250 มม. 5 กล. )มีตัวอย่างสารพิษภายในคอลัมน์ที่มีสองเฟสเคลื่อนที่สร้างขึ้นโดยใช้ 1% ไน 20 มม. heptafluorobutyric กรด( ซิกม่า Aldrich ) ; 20 มิลลิเมตร แอมโมเนียมไฮดรอกไซด์ ( ซิกม่า Aldrich )และรูปแบบแอมโมเนีย 10 มม. ( fluka ) ( pH 4.0 กับกรด )( อี ) และ ชนิดเดียวกัน แต่ด้วย 5 % ( ตัวไนB ) การใช้สีต่อไปนี้ : 100 % เป็นครั้งแรก 22 นาที ได้ 100 เปอร์เซ็นต์มือถือเฟส B สำหรับถัดไป 18 นาทีและกลับมา 100% สำหรับดังต่อไปนี้ 3 นาทีก่อนที่จะฉีดต่อไป และอัตราการไหล คือ0.4 มิลลิลิตรต่อนาที อุณหภูมิเตาอบไว้ที่ 20 องศาเซลเซียส และคอลัมน์ปริมาณการฉีด 4 จะ ดำเนินการในปฏิกิริยาหลาย MSการตรวจสอบ ( mrm ) โหมดวิเคราะห์สองผลิตภัณฑ์ไอออนต่อสารประกอบ :สำหรับปริมาณและอื่น ๆเพื่อยืนยัน ที่พารามิเตอร์สเปกโตรมิเตอร์มวลปรับเพื่อรับสัญญาณของความเข้มสูงสุดและเสถียรภาพ สำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพของ MS ,ตัวอย่างสารละลายผสมเป็นวิธีพ่นละอองไฟฟ้าแหล่งโดยตรงเป็น 0.2ml/min อัตราการไหลของปั๊มกระบอกฉีด . MS ดำเนินการในโหมดการใช้ไอออนประจุบวกของผลิตภัณฑ์สแกนด้วยโคนก๊าซ , 40 V ; C แรงดันไฟฟ้า , 2.8 กิโล แหล่งอุณหภูมิ 100 C ;ศูนยากาศ อุณหภูมิ 350 C ; EV การชนพลังงาน , 32.5 การวิเคราะห์ทางสถิตินำมาวิเคราะห์หาปริมาณแคดเมียมและผลลัพธ์มีรายงานเป็นค่าเฉลี่ยและส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของการวัดเหล่านี้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) คือวิ่งโดยใช้โดยใช้ซอฟต์แวร์รุ่น 19 ( SPSS , Chicago , Illinois , สหรัฐอเมริกา ) และDuncan " s Multiple Range Test เปรียบเทียบที่ค่า P < 0.05 ) ของใช้เพื่อกำหนดความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ