Cellular proteins were extracted us

Cellular proteins were extracted using RIPA buffer supplemented with 1 mM PMSF. Proteins concentrations were determined kit (Beyotime institute of Biotechnology). Equal amounts of sample lysate were separated using 8% SDS-poly gel electrophoresis(SDS-PAGE) and transferred onto polyvinylidene fluoride(PVDF) membranes. After incubation with primary antibodies including rabbit polyclonal anti-Drosha (Abcam) and mouse monoclonal anti-beta-actin, blots were incubated with goat anti-rabbit or anti-mouse secondary antibody. Finally, signals were detected using a chemiluminescence ECL detection system (pierce)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลลูลาร์โปรตีนถูกสกัดโดยใช้บัฟเฟอร์ริป้าราคาเสริม ด้วย PMSF 1 มม. มีกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนชุด (Beyotime สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ) จำนวนตัวอย่าง lysate เท่าถูกแบ่งใช้ 8% SDS-โพลีเจ electrophoresis(SDS-PAGE) และโอนย้ายไปยังเยื่อหุ้ม fluoride(PVDF) polyvinylidene หลังจากบ่มกับแอนตี้หลักรวมทั้งกระต่าย polyclonal ต่อต้าน-Drosha (Abcam) และเมาส์โมโนต่อต้าน-beta-แอกติน กันบล็อทได้ incubated กับกระต่ายป้องกัน หรือต่อต้านเมาส์แอนติบอดีรองแพะ สุดท้าย สัญญาณพบใช้ระบบตรวจสอบ chemiluminescence ECL (เพียร์ซ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนเซลลูลาร์ถูกสกัดโดยใช้บัฟเฟอร์ RIPA เสริมด้วย 1 มิลลิ PMSF ความเข้มข้นของโปรตีนที่ได้รับการพิจารณาชุด (Beyotime สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพ) จำนวนเงินที่เท่ากันของ lysate ตัวอย่างถูกแยกออกโดยใช้ 8% ข่าวคราว SDS-โพลี (SDS-PAGE) และโอนไปยังฟลูออไร Polyvinylidene (PVDF) เยื่อ หลังจากการบ่มกับแอนติบอดีหลักรวมถึงกระต่ายโพลีต่อต้าน Drosha (Abcam) แล​​ะโมโนโคลนอลเมาส์ต้านเบต้าโปรตีน, blots ถูกบ่มกับแพะกระต่ายต่อต้านหรือป้องกันเมาส์รองแอนติบอดี ในที่สุดสัญญาณตรวจพบโดยใช้ระบบการตรวจสอบ chemiluminescence ECL (เพียร์ซ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนในเซลล์ถูกสกัดโดยใช้ RIPA กันชนเสริม PMSF 1 มิลลิเมตร โปรตีนเข้มข้นเป็นชุด ( สถาบัน beyotime เทคโนโลยีชีวภาพ ) เท่ากับจํานวนเงินของตัวอย่าง lysate แยกกันโดยใช้ 8 % SDS poly gel electrophoresis ( SDS-PAGE ) และโอนไปยังีนฟลูออไรด์ ( PVDF ) เยื่อหลังจากบ่มด้วยแอนติบอดีหลักรวมถึงกระต่ายใช้ anti drosha ( ABCAM ) และโมโนโคลนอลแอนเบต้าแอคตินไม้ถูกบ่มกับแพะ , ป้องกันกระต่ายหรือป้องกันเมาส์ ) รอง ในที่สุด สัญญาณที่ถูกตรวจพบการใช้เคมีลูมิเนสเซนต์ ECL ระบบตรวจจับ ( แทง )