Polymerase chain reaction PCR was s

Polymerase chain reaction
PCR was set up in 5Opl volume as described in a thermal cycler . The temperature profile for the amplification of the two rRNA gene fragments was 95°C for 30 s, 40°C for 1 min and 72°C for 1 min for ten cycles followed by twenty-five cycles of 95°C for 30 s, 50°C for 1 min and 72°C for 1 min. For the amplification of the NADH dehydrogenase and the COI gene fragments, the temperature profile was 95°C for 30 s, 45°C for 1 min and 72°C for 1 min for thirty-five cycles. For both temperature profiles, an initial denatur- ation step of 95°C for 3 min and a final extension step of 72°C for 7
min were added. After amplification, the products were electrophoresed on 1 Yo agarose gels containing 50,d per litre of 10 mglml ethidium bromide. No contamination was detected in negative
controls.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส PCR ถูกตั้งค่าไว้ใน 5Opl เสียงใน cycler ร้อน โพรไฟล์อุณหภูมิสำหรับขยายของชิ้นส่วนยีน rRNA สองได้ 95° C สำหรับ 30 s, 40° C ใน 1 นาที และ 72 องศาเซลเซียสใน 1 นาทีสำหรับรอบสิบตามรอบยี่สิบห้าของ 95° C สำหรับ 30 s, 50 องศาเซลเซียส 1 นาที และ 72 องศาเซลเซียสใน 1 นาที สำหรับขยาย NADH dehydrogenase และบางส่วนของยีน COI ค่าอุณหภูมิ 95° C สำหรับ 30 s, 45° C 1 นาที และ 72 องศาเซลเซียสใน 1 นาทีสำหรับรอบสามสิบห้า ทั้งค่าอุณหภูมิ ขั้นตอนการเริ่มต้น denatur-ation 95 องศาเซลเซียสสำหรับ 3 นาที และขั้นสุดท้ายส่วนขยาย 72° C 7 เพิ่ม min หลังจากขยาย ผลิตภัณฑ์ถูก electrophoresed ใน 1 เจ agarose โยประกอบด้วย 50, d ต่อลิตรของ 10 mglove โบรไมด์ ethidium ชีวิตของฉัน ปนไม่พบค่าลบ ควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
PCR ตั้งขึ้นในหมวด 5opl ตามที่อธิบายไว้ในวงจรความร้อน โปรไฟล์อุณหภูมิสำหรับการเพิ่มปริมาณของยีนสอง rRNA เศษ 95 องศา C 30 , 40 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที ตามด้วยรอบสิบยี่สิบห้ารอบ 95 องศา C 30 , 50 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที เพื่อเพิ่มจำนวน ของ NADH dehydrogenase และผมยีนการกระจายตัวอุณหภูมิ 95 องศา C เป็นเวลา 30 , 45 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาทีสามสิบห้ารอบ ทั้งรูปแบบของอุณหภูมิ , denatur - 95 องศา C ขั้นตอนเริ่มต้น ation สำหรับ 3 นาที และสุดท้ายการก้าวของ 72 ° C
7 นาทีเพิ่ม หลังจากขยายผลิตภัณฑ์ electrophoresed 1 โย่ , เจลที่มี 50 D ต่อลิตร 10 โบรไมด์คู่ mglml .ไม่มีการปนเปื้อนที่ตรวจพบในการควบคุมค่า