Cryo-SEM was performed using a Pola

Cryo-SEM was performed using a Polaron PP2000 Cryo Transfer system (Quorum Technologies, Ringmer, UK) attached to an FEI Quanta 250 Scanning Electron Microscope (FEI,Hillsboro,OR,USA.) Frozen tissue was mounted in sample holders containing a mixture of colloidal graphite and OCT compound (Sakura Finetek,Zoeterwoude,NL)under an argon atmosphere and immersed liquid nitrogen with about half the sample protruding, Samples were transferred to the sample handling chamber of the PP2000 in liquid nitrogen then transferred under vacuum to the PP2000 preparation stage at-150 c and the protruding tissue fractured using a cooled metal blade or probe.Ice sublimation was then carried out at-90 c for between 1 and 7 min to improve surface contrast. The temperature was then returned to -150c before the fractured surface was sputter coated with gold/palladium (60s) and transferred to the cryo-SEM for observation on a stage cooled to -150c using accelerating voltages of between 5 and 15 kV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำ Cryo SEM ใช้ Polaron PP2000 Cryo โอนระบบ (ควอรัมเทคโนโลยี Ringmer, UK) แนบไปหุย Quanta 250 การสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (หุย Hillsboro, OR สหรัฐอเมริกา) เนื้อเยื่อแช่แข็งถูกติดตั้งในตัวอย่างผู้ที่ประกอบด้วยส่วนผสมของแกรไฟต์ colloidal และ OCT ผสม (Finetek ซากุระ ZoeterwoudeNL) ภายใต้บรรยากาศอาร์กอนและดื่มด่ำกับไนโตรเจนเหลว มีประมาณครึ่งตัวอย่างแหล่งน้ำมี ตัวอย่างถูกโอนย้ายไปหอจัดการตัวอย่างของ PP2000 ในไนโตรเจนเหลว แล้วโอนย้ายภายใต้สุญญากาศ PP2000 เตรียมเวทีที่ 150 c และเนื้อเยื่อเกิน fractured ใช้ใบมีดโลหะเย็น ๆ หรือโพรบแล้วทำการระเหิดน้ำแข็งออกที่ 90 c ในระหว่าง 1 ถึง 7 นาทีเพื่อเพิ่มความคมชัดพื้นผิว อุณหภูมิได้แล้วส่งคืนถึง c -150 ก่อนผิว fractured ถูก sputter เคลือบ ด้วยทอง/พาลาเดียม (ยุค 60s) และโอนย้ายไป SEM cryo สำหรับสังเกตบนเวทีระบายความร้อนด้วยการใช้ปัจจุบันแรงดันของระหว่าง 5 และ 15 เควีซี -150

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Cryo-SEM ได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบการถ่ายโอน Polaron PP2000 Cryo (องค์ประชุมเทคโนโลยี Ringmer, UK) ที่แนบมากับเฟควอนตั้ม 250 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (FEI โบโร, OR, USA.) แช่แข็งเนื้อเยื่อถูกติดตั้งในผู้ถือตัวอย่างที่มีส่วนผสมของ ไฟท์คอลลอยด์และตุลาคมสารประกอบ (ซากุระ FineTek, Zoeterwoude, NL) ภายใต้บรรยากาศอาร์กอนและไนโตรเจนเหลวแช่ด้วยประมาณครึ่งหนึ่งของกลุ่มตัวอย่างที่ยื่นออกมาที่ตัวอย่างถูกถ่ายโอนไปตัวอย่างการจัดการห้องของ PP2000 ในไนโตรเจนเหลวจากนั้นก็ย้ายไปอยู่ภายใต้สูญญากาศการเตรียม PP2000 คขั้นตอนที่ 150 และเนื้อเยื่อยื่นออกมาหักใช้ใบมีดโลหะเย็นหรือ probe.Ice ระเหิดได้ดำเนินการแล้วออกที่ 90 คระหว่าง 1 และ 7 นาทีในการปรับปรุงพื้นผิวที่แตกต่าง อุณหภูมิถูกนำตัวกลับไปแล้วก่อนที่จะ 150c ร้าวพื้นผิวที่ถูกเคลือบด้วยทองพ่น / แพลเลเดียม (60s) และย้ายไปแช่-SEM สำหรับการสังเกตบนเวทีระบายความร้อนด้วยการใช้แรงดันไฟฟ้าที่ 150c เร่งของระหว่าง 5 และ 15 กิโลโวลต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สามารถทำการแช่แข็งโดยใช้ปฏิยานุพันธ์ pp2000 แช่แข็ง ระบบการโอน ( เทคโนโลยี องค์ประชุม ringmer , UK ) แนบมากับเฟต้า 250 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( Fei , Hillsboro , หรือ , USA ) ติดตั้งในผู้ถือเนื้อเยื่อแช่แข็งตัวอย่างผสม colloidal แกรไฟต์และต.ค. สารประกอบ ( ซากุระ finetek zoeterwoude , ,NL ) ภายใต้บรรยากาศอาร์กอน และแช่ไนโตรเจนเหลวด้วยประมาณครึ่งหนึ่งของตัวอย่างที่ยื่นออกมาอย่างที่ถูกโอนไปยังตัวอย่างการจัดการห้องของ pp2000 ในไนโตรเจนเหลวแล้วโอนภายใต้สุญญากาศเพื่อขั้นตอนการเตรียม pp2000 at-150 C และยื่นทิชชู่หักใช้ระบายความร้อนด้วยโลหะใบมีดหรือสอบสวนน้ำแข็งระเหิดได้ดำเนินการ at-90 C ระหว่าง 1 และ 7 นาทีเพื่อเพิ่มความคมชัดผิว อุณหภูมิก็กลับมา - 150C ก่อนที่พื้นผิวแตกก็ละล่ำละลักเคลือบด้วยทอง / แพลเลเดียม ( 60 ) และโอนไปยังเครื่อง Cryo SEM เพื่อสังเกตการณ์บนเวทีเย็น - 150C ใช้เร่งแรงดันไฟฟ้าระหว่าง 5 - 15 kV .