A method for the rapid diagnosis of

A method for the rapid diagnosis of early dengue virus (DENV) infection is highly needed. Here, a prototype reverse transcription- recombinase polymerase amplification (RT-RPA) assay was developed. The assay detected DENV RNA in0.723) with the RTLAMP and qRT-PCR assays in detecting the dengue viremic samples. When used in combination with ELISA, both the RT-RPA and RT-LAMP assays increased the detection of acute DENV infection to>95.7% (>45/47) in samples obtained within 5 days of illness. The results from the study suggest that the RT-RPA assay is the most rapid molecular diagnostic tool available for the detection of DENV. Hence, it is possible to use the RT-RPA assay in a laboratory to complement routine serology testing for dengue.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วของการติดไวรัส (DENV) ไข้เลือดออกก่อนเป็นสิ่งจำเป็นอย่างมาก ที่นี่ ถูกพัฒนาเป็นต้นแบบ recombinase transcription กลับพอลิเมอเรสขยาย (RT-RPA) วิเคราะห์ ทดสอบการตรวจพบ DENV อาร์เอ็นเอใน < 20 นาทีโดยไม่ต้องขยาย thermocycling ทดสอบการเปิดใช้งานการตรวจพบไม่กี่ที่สำเนา 10 ของอาร์เอ็นเอ DENV RT RPA ไพรเมอร์ที่ออกแบบและโพรบเอกโซพบกลุ่ม DENV ของน้อย 12 DENV หมุนเวียนทั่วโลกโดยไม่มี crossreacting กับ arboviruses อื่น ๆ เราประเมินประสิทธิภาพของทดสอบ RPA รังสีสำหรับการตรวจหาอาร์เอ็นเอ DENV ใน 203 ตัวอย่างซีรั่มผู้ป่วยที่มีเลือดออกสงสัยทางคลินิกการวินิจฉัย พร้อมจะถูกทดสอบสำหรับ DENV ใช้วิเคราะห์ย้อนหลัง transcription-วน-mediated isothermal ขยาย (RT-โคมไฟ) เชิงปริมาณ RT-PCR (qRT-PCR), และระบาดของโรค - และ IgGcapture เชื่อมโยงเอนไซม์ immunosorbent assays (ELISA) DENV การติดเชื้ออย่างเฉียบพลันได้รับการยืนยันในตัวอย่าง 130 และ 61 ตัวอย่าง (ร้อยละ 46.9) ถูกจัดประเภทเป็น viremic กับ qRT PCR วิเคราะห์ RT RPA พบสอดคล้องดี (ของ > 0.723) กับ assays RTLAMP และ qRT PCR ในการตรวจสอบตัวอย่าง viremic ไข้เลือดออก เมื่อใช้ร่วมกับ ELISA, assays RT RPA และ RT-หลอดเพิ่มขึ้นการตรวจพบเชื้อ DENV เฉียบพลันไป > 95.7% (> 45/47) ในตัวอย่างที่ได้รับภายใน 5 วันของการเจ็บป่วย ผลจากการศึกษาแนะนำว่า ทดสอบ RT RPA เป็นอย่างรวดเร็วที่สุดโมเลกุลวินิจฉัยเครื่องมือสำหรับการตรวจพบ DENV ดังนั้น จึงสามารถใช้วิเคราะห์ RT RPA ในห้องปฏิบัติการเพื่อเติมเต็มงานประจำวิทยาเซรุ่มทดสอบไข้เลือดออก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการสำหรับการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วของไวรัสไข้เลือดออกในช่วงต้น (DENV) การติดเชื้อเป็นสิ่งจำเป็นอย่างมาก ที่นี่เป็นต้นแบบย้อนกลับ transcription- recombinase ขยายโพลิเมอร์ (RT-RPA) การทดสอบได้รับการพัฒนา การทดสอบที่ตรวจพบในอาร์เอ็นเอ DENV <20 นาทีโดยไม่จำเป็นต้องขยาย thermocycling เปิดการใช้งานการทดสอบการตรวจสอบเป็นเพียง 10 สำเนาของ DENV ตรวจ rna ได้รับการออกแบบไพรเมอร์ RT-RPA และนอกสอบสวนตรวจพบจีโนมของ DENV อย่างน้อย 12 สายพันธุ์ของ DENV ไหลเวียนทั่วโลกโดยไม่ต้อง crossreacting กับ arboviruses อื่น ๆ เราประเมินผลการดำเนินงานของการวินิจฉัยการทดสอบ RT-RPA สำหรับการตรวจสอบของ DENV อาร์เอ็นเอใน 203 ตัวอย่างซีรั่มของผู้ป่วยที่สงสัยว่าคลินิกไข้เลือดออก ซีรั่มได้รับการทดสอบพร้อมกัน DENV ใช้กลับถอดความวงพึ่งขยาย isothermal (RT-โคมไฟ) การวิเคราะห์เชิงปริมาณ RT-PCR (qRT-PCR) และ IgM- IgGcapture และเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการวิเคราะห์อิมมูโน (ELISA) การติดเชื้อเฉียบพลัน DENV ได้รับการยืนยันใน 130 ตัวอย่างและ 61 ของกลุ่มตัวอย่าง (46.9%) ได้รับการจัดเป็น viremic กับ qRT-PCR การทดสอบ RT-RPA แสดงให้เห็นความสอดคล้องที่ดี (? ของ> 0.723) กับ RTLAMP และตรวจ qRT-PCR ในการตรวจสอบตัวอย่าง viremic ไข้เลือดออก เมื่อนำมาใช้ร่วมกับวิธี ELISA ทั้ง RT-RPA และตรวจ RT-โคมไฟที่เพิ่มขึ้นการตรวจหาการติดเชื้อ DENV เฉียบพลันที่> 95.7% (> 45/47) ในตัวอย่างได้ภายใน 5 วันของการเจ็บป่วย ผลจากการศึกษาแสดงให้เห็นว่าการทดสอบ RT-RPA เป็นเครื่องมือในการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วที่สุดโมเลกุลที่มีอยู่ในการตรวจหา DENV จึงเป็นไปได้ที่จะใช้การทดสอบ RT-RPA ในห้องปฏิบัติการเพื่อเสริมการทดสอบเซรุ่มวิทยาประจำสำหรับไข้เลือดออก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการสำหรับการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วของไวรัสเด็งกี่ต้น ( denv ) การติดเชื้อเป็นสิ่งจำเป็นอย่างมาก นี่เป็นต้นแบบย้อนกลับการถอดความ - recombinase amplification ( rt-rpa ) โดยได้รับ ( ตรวจพบ RNA ใน denv < 20 นาทีโดยไม่ต้องเพิ่มปริมาณผื่นแดง . ( เปิดใช้งานตรวจหาน้อยเป็น 10 ฉบับของ denv RNAและออกแบบไพรเมอร์ rt-rpa exo สอบสวนพบ denv จีโนมของอย่างน้อย 12 พันธุ์ denv หมุนเวียนทั่วโลกโดยไม่ crossreacting กับโบไวรัสอื่น ๆ เราประเมินการวินิจฉัยของ rt-rpa การทดสอบเพื่อตรวจหาอาร์เอ็นเอในซีรั่ม denv 203 ตัวอย่างของผู้ป่วยอาการสงสัยไข้เลือดออกได้พร้อมกัน ( ทดสอบ denv โดยใช้ Reverse ถอดความห่วง ( ( ( rt-lamp ) คำนวณโดยวิธีเชิงปริมาณ ( ข้าพเจ้า PCR ) , และ IgM และ iggcapture enzyme-linked immunosorbent assays ( ELISA ) การติดเชื้อเฉียบพลันที่ได้รับการยืนยันใน denv 130 ตัวอย่าง และ 61 ของตัวอย่าง ( 46.9 % ) จำแนกเป็น viremic กับข้าพเจ้า PCRการ rt-rpa assay พบที่ดีความสอดคล้องกัน (  > 0.723 ) กับ rtlamp ข้าพเจ้า PCR ในการตรวจหาและตรวจไข้เลือดออก viremic ตัวอย่าง เมื่อใช้ร่วมกับวิธีทั้ง rt-rpa rt-lamp ) และเพิ่มการตรวจหาการติดเชื้อเฉียบพลันที่จะ denv > 95.7 % ( 45 / 47 ) ในตัวอย่างได้ภายใน 5 วัน ของการเจ็บป่วยผลจากการศึกษาชี้ให้เห็นว่า rt-rpa assay เป็นอย่างรวดเร็วที่สุดของเครื่องมือการวินิจฉัยใช้ได้สำหรับการตรวจหา denv . ดังนั้นจึงเป็นไปได้ที่จะใช้ rt-rpa การทดสอบในห้องปฏิบัติการเพื่อเสริมแปลงทดสอบประจำสำหรับไข้เลือดออก