Bovine casein (Sigma Chemical Compa

Bovine casein (Sigma Chemical Company; St. Louis, MO) was dissolved by stirring in buffer at a concentration of 1%. The skim milk powder (SMP; supplied by Fonterra [Australia] Pty. Ltd. Cobden, Australia) substrate was prepared in a similar manner at a concentration of 36 mg mL-1 so that the substrate mixture contained 1%protein. The buffer used was Tris HCl at a concentration of 100 mM(to achieve a final pH in the assay of 7.0) or 3 M(to achieve final pH in the assay of either 7.0 or 8.0). The preservative used was 12 mMthiomersal, of which 92 mL was added per milliliter of assay mixture. The assay mixture comprised 900 mL of substrate and 300 mL of sample. Each mixture was shaken vigorously to ensure thorough mixing. Protease action is reported as the increase in free amino groups, measured by the fluorescamine method, during the incubation period of the assay. For quantification
of free amino groups, the results were compared
with a standard curve (0–40 mM) of the dipeptide Leu-Gly.
The azocasein (Christen and Marshall 1984) and FITCcasein
(Christen and Senica 1987) assays were carried out as
previously described using chemicals obtained from Sigma
Chemical Company. Unless stated otherwise, incubation for
24 h at 37C was used for both the azocasein and FITC-casein
assays. The FITC-casein assay mixture comprised 69 mL of
0.25% type III FITC-casein in 10 mM sodium phosphate
buffer at pH 8.0, and 17 mL of the UHT milk sample. Prior to
fluorometric measurement at a wavelength of 490 nm (excitation)
and 515 nm (emission), casein and unreacted
FITC-caseinwere precipitatedwith 14 mL of 306 mMtrichloroacetic
acid. Following centrifugation, 50 mL of the supernatant
was added to 1.2 mL of 300 mM phosphate buffer at
pH 8.5.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เคซีนวัว (ซิกเคมี บริษัท St. Louis, MO) มีส่วนยุบ โดยกวนในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1% Skim นมผง (SMP โดย Fonterra [ออสเตรเลีย] เนชั่ลแนลจำกัด Cobden ออสเตรเลีย) พื้นผิวเตรียมไว้ในลักษณะคล้ายกันที่ความเข้มข้นของ 36 mg mL-1 เพื่อให้พื้นผิวผสมประกอบด้วยโปรตีน 1% บัฟเฟอร์ที่ใช้มีทริสเรทติ้ง HCl ที่ความเข้มข้น 100 มม. (เพื่อให้ค่า pH สุดท้ายในการทดสอบ 7.0) หรือ 3 M (เพื่อให้ค่า pH สุดท้ายในการทดสอบ 7.0 หรือ 8.0) MMthiomersal 12 ซึ่งเพิ่มมล 92 ละ milliliter ของทดสอบผสม preservative ใช้ได้ วิเคราะห์ส่วนผสมประกอบด้วย 900 mL ของพื้นผิว และ 300 มล.ของตัวอย่าง ส่วนผสมแต่ละถูกเขย่าโยคะให้ผสมอย่างละเอียด รติเอสดำเนินการรายงานเป็นการเพิ่มขึ้นในกลุ่มอะมิโนอิสระ วัดระยะฟักตัวของการวิเคราะห์ โดยวิธี fluorescamine การนับฟรีกลุ่มอะมิโน ผลลัพธ์ได้เปรียบเทียบมาตรฐานโค้ง (0-40 mM) ของ dipeptide Gly ลัวAzocasein (Christen และมาร์แชล 1984) และ FITCcasein(Christen และ Senica 1987) assays ได้ดำเนินการเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยใช้สารเคมีที่ได้รับมาจากซิกมาบริษัทเคมี เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น คณะทันตแพทยศาสตร์สำหรับ24 ชมที่ 37C ใช้สำหรับ azocasein และเคซีน FITCassays ส่วนผสมเคซีน FITC วิเคราะห์ประกอบด้วยมล 69 ของ0.25% พิมพ์ III FITC-เคซีนฟอสเฟตโซเดียม 10 มม.บัฟเฟอร์ที่ pH 8.0 และขนาดของตัวอย่างนมยูเอชที 17 mL ก่อนที่จะfluorometric วัดที่มีความยาวคลื่น 490 นาโนเมตร (ในการกระตุ้น)nm (มลพิษ) และ 515 เคซีน และ unreactedPrecipitatedwith FITC caseinwere 14 mL ของ 306 mMtrichloroaceticกรด Centrifugation, 50 mL ของ supernatant ต่อไปนี้1.2 mL 300 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ถูกเพิ่มpH 8.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เคซีนวัว (Sigma บริษัท เคมีเซนต์หลุยส์) ก็เลือนหายไปโดยกวนในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1% นมผงพร่องมันเนย (SMP; จัดทำโดยฟอนเทียร่า [ออสเตรเลีย] Pty จำกัด Cobden, ออสเตรเลีย.) พื้นผิวที่ถูกจัดทำขึ้นในลักษณะที่คล้ายกันที่ความเข้มข้น 36 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1 เพื่อให้ส่วนผสมสารตั้งต้นที่มีโปรตีน 1% บัฟเฟอร์ที่ใช้เป็น Tris HCl ที่ความเข้มข้น 100 มิลลิเมตร (เพื่อให้บรรลุความเป็นกรดด่างสุดท้ายในการทดสอบของ 7.0) หรือ 3 เมตร (เพื่อให้บรรลุความเป็นกรดด่างสุดท้ายในการทดสอบทั้ง 7.0 หรือ 8.0) สารกันบูดที่ใช้คือ 12 mMthiomersal ซึ่ง 92 มิลลิลิตรถูกเพิ่มเข้ามาต่อมิลลิลิตรผสมทดสอบ ส่วนผสมทดสอบประกอบด้วย 900 มิลลิลิตรของพื้นผิวและ 300 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่าง ส่วนผสมแต่ละเขย่าแรง ๆ เพื่อให้แน่ใจว่าการผสมอย่างละเอียด การกระทำโปรตีเอสมีรายงานการเพิ่มขึ้นในกลุ่มอะมิโนอิสระที่วัดโดยวิธี fluorescamine ในช่วงระยะฟักตัวของการทดสอบ สำหรับปริมาณ
ของกลุ่มอะมิโนอิสระผลที่ได้มาเปรียบเทียบ
กับกราฟมาตรฐาน (0-40 มิลลิเมตร) dipeptide ลื้อ-Gly.
azocasein (ขนานและมาร์แชล 1984) และ FITCcasein
(ขนานและ Senica 1987) การตรวจได้ดำเนินการในขณะที่
ก่อนหน้านี้ อธิบายการใช้สารเคมีที่ได้รับจาก Sigma
บริษัท เคมี ถ้าอย่างนั้นสำหรับบ่ม
24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37C ถูกนำมาใช้สำหรับทั้ง azocasein และ FITC-เคซีน
การตรวจ FITC-เคซีนส่วนผสมทดสอบประกอบด้วย 69 มล
0.25% ประเภท III FITC-เคซีนในโซเดียมฟอสเฟต 10 มม
บัฟเฟอร์ที่ 8.0 ค่า pH, และ 17 มลตัวอย่างนมยูเอชที ก่อนที่จะมี
การวัดฟลูออโรที่ความยาวคลื่น 490 นาโนเมตร (กระตุ้น)
และ 515 นาโนเมตร (ปล่อยก๊าซเรือนกระจก), เคซีนและ unreacted
FITC-caseinwere precipitatedwith 14 มิลลิลิตร 306 mMtrichloroacetic
กรด ต่อไปนี้การหมุนเหวี่ยง 50 มิลลิลิตรใส
ถูกบันทึกอยู่ใน 1.2 มิลลิลิตร 300 มิลลิฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่
พีเอช 8.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เคซีนโปรตีน ( Sigma บริษัทเคมี ; St . Louis , MO ) ถูกละลายโดยกวนในบัฟเฟอร์ความเข้มข้น 1 % ส่วนหางนมผง ( SMP ; จัดโดยฟอนเทียร่า [ ออสเตรเลีย ] Pty . จำกัด Cobden , ออสเตรเลีย ) พื้นผิวที่เตรียมไว้ในลักษณะที่คล้ายกันที่ความเข้มข้นที่แน่นอนเพื่อให้พื้นผิว 36 มิลลิกรัมโปรตีนผสมอยู่ 1%บัฟเฟอร์ที่ใช้โดย HCl ความเข้มข้น 100 มม. ( เพื่อให้บรรลุขั้นสุดท้ายในการทดสอบ pH 7.0 ) หรือ 3 เมตร ( เพื่อให้บรรลุพีเอชสุดท้ายในการทดสอบของ 7.0 หรือ 8.0 ) สารกันบูดที่ใช้ 12 mmthiomersal ซึ่งมล 92 เพิ่มต่อมิลลิลิตร ผสม ตามลำดับ วิเคราะห์ส่วนผสมประกอบด้วย 900 ml ( 300 มล. ของกลุ่มตัวอย่าง ส่วนผสมแต่ละที่ถูกเขย่าอย่างแรงเพื่อให้ละเอียดผสมการสร้างรายงานเป็นเพิ่มอุ้มสม , ที่วัดโดยวิธีฟลูโอเรสคามีน ช่วงฟักตัวของแบคทีเรีย สำหรับปริมาณ
หมู่อะมิโนอิสระเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐาน
( 0 – 40 มม. ) ของไดเปปไทด์ลิว GLY .
azocasein ( คริสเตียนและมาร์แชล 1984 ) และ fitccasein
( คริสเตียน และหมู่บ้าน 1987 ) วิธีทดลองเป็น
ก่อนหน้านี้อธิบายการใช้สารเคมีที่ได้รับจาก บริษัท ซิกม่า
เคมี เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ที่ 37c
ใช้ทั้ง azocasein fitc และเคซีน
) . การ fitc เคซีน ( ส่วนผสมประกอบด้วย 69 มล.
0.25% Type III fitc เคซีนใน 10 มิลลิเมตรโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.0
และ 17 มล. ของนม ยูเอชที ตัวอย่าง ก่อน
fluorometric วัดที่ความยาวคลื่น 290 nm ( i )
515 nm ( มลพิษ ) , เคซีน และเข้าสู่
fitc caseinwere precipitatedwith 14 ml ของ 306 mmtrichloroacetic
กรด ปั่นต่อไป 50 ml ของน่าน
เพิ่ม 1.2 ml 300 มม. ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 8.5
.