2.3. Lymphocyte blastogenesisSpleen

2.3. Lymphocyte blastogenesis
Spleens were minced in RPM1 1640 medium and
lymphocytes isolated in a Ficoll-Hypaque gradient.
Lymphocytes in complete medium (RPM1 1640, 5%
bovine fetal serum, 2 mM L-glutamine and gentamycin
50 mg/l) were seeded at 2 X 10’ cells/well in 96-well
flat-bottomed microtitre plates. Medium alone or
medium with an optimal concentration of Concanavalin
A (ConA) 0.5 P./well (Sigma, St. Louis, MO)
was added and the plates incubated for 120 h at 37°C
at 5% CO, and 95% air. A dose-response curve for
ConA was performed to determine the optimal mitogen
concentration. The optimal response in unweaned
pups was achieved at 5 days of culture. Tritiated thymidine,
0.5 &i/well (specific activity 6.7 &i/mM NEN,
Boston, MA) was added to the culture wells during the
last 18 h of incubation. Samples were tested in triplicate
(Schlesinger et al., 1992).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 เม็ดเลือดขาว blastogenesis
ม้ามถูกสับใน RPM1 1640 ขนาดกลางและ
เซลล์เม็ดเลือดขาวที่แยกได้ในการไล่ระดับสี Ficoll-Hypaque.
เซลล์เม็ดเลือดขาวในสื่อฉบับสมบูรณ์ (RPM1 1640, 5%
ซีรั่มของทารกในครรภ์วัว 2 มิลลิ L-glutamine และ Gentamycin
50 mg / l) เป็นเมล็ดที่ 2 X 10 'เซลล์ / ดีใน 96 หลุม
ที่ราบต่ำแผ่น microtitre ปานกลางคนเดียวหรือ
ขนาดกลางที่มีความเข้มข้นที่เหมาะสมของ Concanavalin
(Cona) 0.5 P. / ดี (Sigma, เซนต์หลุยส์)
ถูกบันทึกและแผ่นบ่มเป็นเวลา 120 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส
ที่ CO 5% และ 95% ของอากาศ . เส้นโค้งปริมาณการตอบสนองสำหรับ
Cona ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบ mitogen ดีที่สุด
เข้มข้น การตอบสนองที่ดีที่สุดใน unweaned
ลูกก็ประสบความสำเร็จใน 5 วันของวัฒนธรรม thymidine Tritiated,
0.5 และ I / ดี (กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง 6.7 & I / มิลลิ NEN,
Boston, MA) ถูกบันทึกอยู่ในบ่อเพาะเลี้ยงในช่วง
ที่ผ่านมา 18 ชั่วโมงของการบ่ม ตัวอย่างถูกทดสอบในเพิ่มขึ้นสามเท่า
(ชเลซิงเจอร์ et al., 1992)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 โดย blastogenesis
ม้ามถูกสับใน rpm1 1640 ขนาดกลาง และถูกแยกใน ficoll

hypaque ลาด . เม็ดเลือดขาวในสื่อสมบูรณ์ ( rpm1 1640 5 %
เซรั่มของทารกในครรภ์ และ Glutamine 2 มม. และเจนตามัยซิน
50 มก. / ล. ) เป็นเมล็ดที่ 2 x 10 ' เซลล์ / ดีใน 96 ดี
microtitre แบน bottomed แผ่น กลางคนเดียว หรือกับความเข้มข้นที่เหมาะสมของสื่อ

( ถูก cona ) 0 P/ ดี ( Sigma , St . Louis , MO )
เพิ่มและจาน บ่มที่ 37 ° C 120 H
5 % CO และ 95% อากาศ ความคิดเห็นที่โค้ง
cona ทำการศึกษาความเข้มข้นที่เหมาะสมปรากฎ
. การตอบสนองที่เหมาะสมใน unweaned
ลูกหมาอยู่ได้ 5 วัน ของวัฒนธรรม tritiated เพียง 0.5 &
/ ดี ( เฉพาะกิจกรรม 6.7 &ผม / อืมเณร
, Boston , MA ) คือเพิ่มวัฒนธรรมเวลส์ในระหว่าง
เมื่อ 18 ชั่วโมงของการบ่ม ตัวอย่างทดสอบทั้งสามใบ
( Schlesinger et al . , 1992 )