In vitro Regeneration of Cotyledona

In vitro Regeneration of Cotyledonary Node Explant of Bauhinia racemosa
Abstract: A regeneration protocol was developed using cotyledonary node explant on MS medium
supplemented with different concentrations of cytokinins viz; BA (6-benzylaminopurine), Kn (kinetin) and TDZ
(thidiazuron) individually or in combinations. BA (2.5 mg L ) 1 and Kn (1.0 mg L 1) induced maximum numbers
of multiple shoots with 80% response. Proliferation and elongation were achieved on the same medium
containing lower concentrations of cytokinins BA + Kn (1.5 + 1.0 mg L 1), elongated shoots were rooted on
half strength MS medium containing IBA 5.0 mg L 1 produced maximum number of roots with 60% response.
The plantlets were gradually acclimatized and successfully transferred to field condition with 60% survival rate
was recorded.

Abbreviations: BAP-6-benzylaminopurine; Kn-kinetin; TDZ-Thidiazuron; NAA- -naphthaleneacetic acid;
GA3-Gibberllic acid; IBA Indole-3-butyric acid IAA-indole-3-acetic acid;

Key words: Bauhinia racemosa Cotyledonary node Multiple shoots induction Regeneration
INTRODUCTION
The genus Bauhinia L. is often called as ‘Orchid tree’ ornamental value [1]. Bauhinia racemosa Lam. Fabaceae- Caesalpinioideae is a small deciduous tree with dark brown scabrous bark, distributed in Asian countries like India, Pakistan and Sri Lanka [2]. It is one of the sacred plants of Hindus, worshipped during the great festival of Dusehra. Leaves are exchanged along with Acacia ferruginea as a token of love and respect. The bark is astringent and is used for inflammation, chronic dysentery, diarrhea, glandular inflammations, ulcer also effective for goiter and some skin diseases [3,4]. Decoction of leaves is given to relieve headache in malarial fever, flowers are used to treat haemorrhage, piles, cough and as laxative [2]. A new tetracyclic phenol and other constituents reported from the roots [5] and structural determination of seed polysaccharide by mythylation studies [6]. Methanol extract of stem bark has anti-inflammatory, analgesic and antipyretic [7], antitumor and antioxidant [8], antimicrobial [9] and hepatorenal functions in mice [10].

A traditional method of vegetative propagation is unsuccessful, seed propagation is the only way to reproduced and seed germination rate is low due to seed coat imposed dormancy [11, 12]. The organogenesis in woody legumes has been very difficult [13], but limited success has been achieved in recent years [14,15,16 and 17]. On other hand the application of tissue culture method in forest trees has gained momentum due to growing demand of biomass and other forest products B. racemosa is considered to be recalcitrant to regeneration. Keeping mentioned view, an effort was made to develop regeneration protocol using cotyledonary node explant for propagation and conservation of important medicinal plant.
MATERIALS AND METHODS
Plant Material: Mature pods of Bauhinia racemosa Lam. were collected Gulbarga University campus and Kotnoor Village, Gulbarga, Karnataka, India. Seed coat were scarified [12] and washed in detergent (5% v/v Teepol, Godrej, India) rinsed with sterile distilled water and surface sterilized with mercuric chloride 0.1 % w/v (Hi media, Mumbai) for 5 min. After washings with sterilized distilled water, inoculated in culture tubes of 25x150 mm (Borosil, India). These tube containing distilled water
……………..
Corresponding Author: L.N. Rajanna, Plant Systematics and Medicinal Plant Laboratory,
Department of Post-Graduate Studies and Research in Botany, Gulbarga University,
Gulbarga-585 106, Karnataka, India. E-mail: [e-mail].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการฟื้นฟูการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อของชิ้นโหนด cotyledonary ของ Bauhinia racemosa
นามธรรม: โปรโตคอลการฟื้นฟูได้รับการพัฒนาโดยใช้ชิ้นโหนด cotyledonary ในมิลลิกลาง
เสริมด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของ cytokinins ได้แก่ ; ba (6-benzylaminopu​​rine) kn (kinetin) และ TDZ
(thidiazuron ) เป็นรายบุคคลหรือในชุด ba (2.5 มิลลิกรัมต่อลิตร) และ 1 kn (1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) ตัวเลขสูงสุดเกิด
ของหน่อหลายกับการตอบสนอง 80% การขยายและการยืดตัวก็ประสบความสำเร็จในสื่อเดียวกัน
ที่มีความเข้มข้นต่ำของ ba cytokinins kn (1.5 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1) หน่อยาวถูกฝังบน
แรงครึ่งกลางมิลลิวินาทีที่มี iba 5.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1 ที่ผลิตจำนวนสูงสุดของรากกับการตอบสนอง 60% .
ต้นก็ค่อย ๆ ปรับสภาพและโอนประสบความสำเร็จในสภาพสนามที่มีอัตราการอยู่รอด 60%
บันทึก

ตัวย่อ. bap-6-benzylaminopu​​rine; kn-kinetin; TDZ-thidiazuron; NAA--naphthaleneacetic กรด;
กรด GA3-gibberllic; iba กรดอินโดล-3-butyric IAA-indole-3-กรดอะซิติก;

คำสำคัญ: Bauhinia racemosa cotyledonary หลายโหนดยิงเหนี่ยวนำการฟื้นฟู
การแนะนำ
ลิตรชนิด Bauhinia มักจะถูกเรียกว่าเป็นต้นไม้กล้วยไม้ 'ค่าประดับ [1] Bauhinia racemosa ลำ ซี้อี้-Caesalpinioideae เป็นต้นไม้ผลัดใบขนาดเล็กที่มีสีดำสีน้ำตาลเปลือกไม้ซอมซ่อกระจายในประเทศเอเชียเช่นอิน​​เดียปากีสถานและศรีลังกา [2] มันเป็นหนึ่งในพืชที่ศักดิ์สิทธิ์ของชาวฮินดูบูชาในช่วงเทศกาลที่ยิ่งใหญ่ของ dusehraใบมีการแลกเปลี่ยนพร้อมกับอะเคเชีย ferruginea เป็นสัญลักษณ์ของความรักและความเคารพ เปลือกเป็นยาสมานแผลและใช้สำหรับการอักเสบเรื้อรังโรคบิดท้องเสียอักเสบต่อมแผลนอกจากนี้ยังมีประสิทธิภาพสำหรับโรคคอพอกและโรคผิวหนังบาง [3,4] ยาต้มของใบจะได้รับการบรรเทาอาการปวดหัวเป็นไข้มาเลเรียในดอกไม้ที่ใช้ในการรักษาอาการตกเลือด, กอง, ไอและเป็นยาระบาย [2]ฟีนอล tetracyclic ใหม่และองค์ประกอบอื่น ๆ ที่ได้รับรายงานจากราก [5] และการกำหนดโครงสร้างของ polysaccharide เมล็ดพันธุ์โดยการศึกษา mythylation [6] สารสกัดเมทานอลของเปลือกลำต้นมีต้านการอักเสบยาแก้ปวดลดไข้และ [7] ต้านและสารต้านอนุมูลอิสระ [8], ยาปฏิชีวนะ [9] และ hepatorenal ฟังก์ชั่นในหนู [10]

วิธีการดั้งเดิมของการขยายพันธุ์พืชที่ไม่ประสบความสำเร็จการขยายพันธุ์เมล็ดเป็นวิธีเดียวที่จะทำซ้ำและอัตราการงอกของเมล็ดอยู่ในระดับต่ำเนื่องจากเยื่อหุ้มเมล็ดที่กำหนดพัก [11, 12] organogenesis ในพืชตระกูลถั่วยืนต้นที่ได้รับยากมาก [13] แต่ จำกัด ประสบความสำเร็จได้รับการประสบความสำเร็จในปีที่ผ่านมา [14,15,16 และ 17]ในทางกลับกันการประยุกต์ใช้วิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อในป่าไม้ได้รับแรงผลักดันจากความต้องการที่เพิ่มขึ้นของชีวมวลและผลิตภัณฑ์ป่าอื่น ๆ ข ดอกจะถือเป็นดื้อรั้นที่จะฟื้นฟู การรักษามุมมองที่กล่าวถึงความพยายามที่ได้ทำในการพัฒนาโปรโตคอลการฟื้นฟูโดยใช้ชิ้นโหนด cotyledonary เพื่อการขยายพันธุ์และการอนุรักษ์พืชสมุนไพรที่สำคัญ.
วัสดุและวิธีการ
วัสดุพืชฝักผู้ใหญ่ของ Bauhinia racemosa ลำ ถูกเก็บรวบรวมมหาวิทยาลัยกุลบัรกาและหมู่บ้าน kotnoor, กุลบัรกา, กรรณาฏัก, อินเดีย เยื่อหุ้มเมล็ดถูก scarified [12] และล้างในน้ำยาทำความสะอาด (5% v / v teepol, Godrej, อินเดีย) ​​ล้างด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อและพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วยคลอไรด์ปรอท 0.1% w / v (hi สื่อมุมไบ) เป็นเวลา 5 นาทีหลังจากที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วยการซักน้ำกลั่นเชื้อในหลอดวัฒนธรรมของ 25x150 มม. (borosil, อินเดีย) หลอดที่มีน้ำกลั่นเหล่านี้

................. สอดคล้องผู้เขียน: LN Rajanna, systematics โรงงานและห้องปฏิบัติการพืชสมุนไพร,
แผนกของการศึกษาหลังจบการศึกษาและการวิจัยในพฤกษศาสตร์กุลบัรกามหาวิทยาลัย
กุลบัรกา-585 106, กรรณาฏักอินเดีย, E-mail: [e-mail]
.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพาะเลี้ยงฟื้นฟูของ Cotyledonary โหน Explant ของเนีย racemosa
นามธรรม: โพรโทคอฟื้นฟูถูกพัฒนาโดยใช้โหน cotyledonary explant บน MS กลาง
เสริม ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของ cytokinins viz BA (6 benzylaminopurine), ช็อปปิ้ง (kinetin) และ TDZ
(thidiazuron) แต่ละรายการ หรือ ในชุดงาน BA (2.5 mg L) เกิดจากหมายเลขสูงสุด 1 และช็อปปิ้ง (1.0 มิลลิกรัม L 1)
ของการถ่ายภาพหลายกับการตอบสนอง 80% การงอกและ elongation สำเร็จในสื่อเดียวกัน
ประกอบด้วยความเข้มข้นต่ำของ cytokinins ช็อปปิ้ง BA (1.5 1.0 มิลลิกรัม L 1), ถ่ายภาพอีลองเกตถูกรากบน
กลางแรง MS ครึ่งประกอบด้วยอิบา 5.0 มิลลิกรัม L 1 ผลิตจำนวนของรากกับการตอบสนอง 60%
ค่อย ๆ acclimatized และเสร็จเรียบร้อยแล้วโอนย้ายไปยังฟิลด์เงื่อนไขมี 60% อัตราการอยู่รอด plantlets
บันทึก

คำย่อ: BAP-6-benzylaminopurine ช็อปปิ้ง-kinetin TDZ-Thidiazuron NAA - - naphthaleneacetic กรด;
GA3 Gibberllic กรด อิบาอินโดล-3-butyric กรดอะซิ IAA-อินโดล-3-ติกกรด;

คำสำคัญ: เนีย racemosa โหน Cotyledonary หลายหน่อเหนี่ยวนำฟื้นฟู
แนะนำ
สกุล L. เนียมักจะเรียกว่าเป็น 'ต้น' ประดับค่า [1] เนีย racemosa Lam. สมุนไพร Caesalpinioideae เป็นต้นไม้ผลัดใบขนาดเล็ก มีสีดำสีน้ำตาล scabrous เปลือก กระจายในประเทศเอเชียเช่นประเทศอินเดีย ปากีสถาน และศรีลังกา [2] มันเป็นพืชศักดิ์สิทธิ์ของฮินดู บูชาในช่วงเทศกาลที่ยิ่งใหญ่ของ Dusehra อย่างใดอย่างหนึ่ง ใบไม้มีการแลกเปลี่ยนกับ ferruginea เซียเป็นโทเค็นของรักและเคารพ เปลือกเป็น astringent และใช้อักเสบ โรคบิดเรื้อรัง โรคท้องร่วง inflammations ต่อม นอกจากนี้ยังมีผลบังคับใช้สำหรับ goiter เข้า ๆ และบางผิวโรค [3, 4] Decoction ใบไม้ให้บรรเทาอาการปวดศีรษะในไข้มาลาเรีย ดอกไม้ใช้รักษา haemorrhage กอง ไอ และ laxative [2] วาง tetracyclic ใหม่และอื่น ๆ constituents รายงานจากราก [5] และกำหนดโครงสร้างของเมล็ด polysaccharide โดย mythylation ศึกษา [6] สารสกัดเมทานอลของเปลือกก้านมีต้านการอักเสบ ยาระงับปวด และสวะ [7], antitumor และสารต้านอนุมูลอิสระ [8], [9] antimicrobial และฟังก์ชัน hepatorenal ในหนู [10]

วิธีการดั้งเดิมของการแพร่กระจายผักเรื้อรังไม่สำเร็จ การแพร่กระจายเมล็ดพันธุ์เป็นวิธีเดียวที่จะทำซ้ำ และอัตราการงอกของเมล็ดจะต่ำเนื่องจากเมล็ดพันธุ์ตราบังคับ dormancy [11, 12] เกิดของอวัยวะในวู้ดดี้กินได้ยากมาก [13], แต่ได้รับความสำเร็จจำกัดในปีที่ผ่านมา [14,15,16 และ 17] บนมืออื่น ๆ การประยุกต์วิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อในป่าต้นไม้ได้รับโมเมนตัมเนื่องจากการเติบโตความต้องการของชีวมวล และอื่น ๆ ป่าผลิตภัณฑ์เกิด racemosa ถือเป็น recalcitrant เพื่อฟื้นฟู รักษากล่าวถึงมุมมอง ความพยายามที่จะพัฒนาโพรโทคอลฟื้นฟูใช้โหน cotyledonary explant สำหรับเผยแพร่และอนุรักษ์พืชสมุนไพรที่สำคัญ
วิธีการและวัสดุ
วัสดุพืช: ฝักสุกของเนีย racemosa Lam. ได้รวบรวมศึกษา Gulbarga และ Kotnoor วิลเลจ Gulbarga นิรภัย อินเดีย หุ้มเมล็ดได้ scarified [12] และล้างผงซักฟอก (5% v/v Teepol, Godrej อินเดีย) rinsed ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อและผิว sterilized กับ mercuric คลอไรด์ 0.1% w/v (Hi สื่อ มุมไบ) ใน 5 นาที หลังจาก washings น้ำกลั่น sterilized, inoculated ในท่อวัฒนธรรม 25 x 150 มม. (Borosil อินเดีย) เหล่านี้หลอดที่มีน้ำกลั่น
...
ผู้เขียนสอดคล้องกัน: อกัสติ Rajanna อนุกรมวิธาน ของพืช และห้อง ปฏิบัติการโรงงานยา,
แผนกหลังบัณฑิตศึกษาและวิจัยสมุนไพร มหาวิทยาลัย Gulbarga,
Gulbarga-585 106 นิรภัย อินเดีย อีเมล์: [e-mail].

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการสร้างเองของ cotyledonary โหนด explant ของชงโค racemosa
นามธรรม:การสร้างโปรโตคอลได้รับการพัฒนาขึ้นโดยใช้ cotyledonary explant โหนดใน MS ขนาดกลาง
ซึ่งจะช่วยเสริมมีความแตกต่างกันความเข้มข้นของ cytokinins อันได้แก่; BA ( 6 - benzylaminopurine ), kN ( kinetin )และ tdz
( thidiazuron )แบบเฉพาะรายหรือในการใช้ร่วมกัน BA ( 2.5 มก. L ) 1 และเซนต์คิตส์และเนวิส( 1.0 มก. L 1 )ก่อขึ้นตัวเลขสูงสุด
การยิงประตูด้วยการตอบสนองหลาย 80% . elongation และการขยายตัวก็ทำได้ในขนาดกลางเหมือนกับที่ประกอบด้วย
ซึ่งจะช่วยลดความเข้มข้นของ cytokinins BA kN ( 1.5 1.0 มก. L 1 )ยิงซอกซอนเข้าลึกถึงเนื้อผ้าทุกคนในขนาดกลาง MS
แบบครึ่งความแรงของกลุ่มบริการด้านที่มี 5.0 มก. L 1 ผลิตจำนวนสูงสุดของรากกับการตอบคำถาม 60% .
ที่ plantlets เคยชินอยู่อย่างค่อยเป็นค่อยไปและประสบความสำเร็จจะพาท่านไปส่งถึงยังฟิลด์ สภาพ พร้อมด้วย 60% อัตราการอยู่รอด
ถูกบันทึกไว้.

ตัวย่อ:, BAP - 6 - benzylaminopurine ;เซนต์คิตส์และเนวิส - kinetin ; tdz - thidiazuron ; NAA - - naphthaleneacetic ชนิดตะกั่วกรดแบบซีล;
, GA 3 - gibberllic กรด;กลุ่มบริการด้าน indole - 3 - butyric ชนิดตะกั่วกรดแบบซีล, iaa , iata , ide , - indole - 3 - กรดอะซิติกกรด;

ปุ่มคำกาหลง racemosa cotyledonary โหนดยิงประตูหลายเตาแม่เหล็กไฟฟ้าสร้าง
การแนะนำ
กาหลงอ.ล.กะจะเรียกว่า"ค่าประดับ'ทรีกล้วยไม้[ 1 ]บ่อยครั้ง ชงโค racemosa ลำ. fabaceae - caesalpinioideae เป็นต้นไม้ป่าเบญจพรรณขนาดเล็กที่พร้อมด้วยเปลือกสีน้ำตาลเข้ม scabrous ออกจำหน่ายในประเทศในเอเชียเช่นอินเดียและปากีสถานศรีลังกา[ 2 ] โรงแรมคือหนึ่งในพันธุ์ไม้อันศักดิ์สิทธิ์ของชาวฮินดูนมัสการในช่วงเทศกาลที่ยิ่งใหญ่ของ dusehraจะมีการแลกเปลี่ยนใบพร้อมด้วย ferruginea อะคาเซียเป็นโทเค็นที่มีความเคารพและความรัก เปลือกเป็นยาสมานและใช้สำหรับอาการอักเสบโรคเรื้อรังโรคท้องร่วง inflammations เกี่ยวกับต่อมแผลยังมีผลบังคับใช้สำหรับคอพอกและโรคเกี่ยวกับผิวหนังบางรายการ[ 3.4 ] ต้มขึ้นของใบจะได้รับการบรรเทาอาการปวดในไข้เกี่ยวกับไข้จับสั่นดอกไม้ถูกนำมาใช้เพื่อการรักษาตกเลือดกองไอและเป็นยาระบาย[ 2 ]พีทีทีฟีนอล tetracyclic ใหม่และส่วนประกอบอื่นๆรายงานจากราก[ 5 ]และการกำหนดโครงสร้างของ polysaccharide เมล็ดพันธุ์โดยการศึกษา mythylation [ 6 ] โรงงานเมธานอลแตกของเปลือกก้านไมโครโฟนมีการป้องกันการแก้อักเสบขั้นรุนแรง(ยา)บรรเทาความเจ็บปวดและแก้ไข้แก้[ 7 ], antitumor และต่อต้านอนุมูลอิสระด้วย[ 8 ][ 9 ]ชนิดและฟังก์ชันการทำงาน hepatorenal ในหนู[ 10 ]

วิธีการแบบดั้งเดิมของคลื่นเป็นอัมพาตไม่สำเร็จคลื่นเมล็ดพันธุ์เป็นวิธีเดียวที่จะทำซ้ำและอัตราดอกเบี้ยอยู่ในระดับต่ำเมล็ดเพาะตัวขึ้นเนื่องจากในการสวมเสื้อเมล็ดพันธุ์พืชกำหนด( ภูเขา ไฟ)สงบ[ 1112 ] organogenesis ในพืชตระกูลถั่วเป็นป่าได้รับการทำได้ยากมาก[ 13 ]แต่ความสำเร็จจำกัด(มหาชน)ได้รับความสำเร็จในปีที่ผ่านมา[ 14,15,16 และ 17 ]ในอีกด้านหนึ่งแอปพลิเคชันของวิธีการทางวัฒนธรรมในเนื้อเยื่อต้นไม้ป่าได้รับแรงเนื่องจากมีความต้องการเพิ่มขึ้นของป่าจากชีวมวลและอื่นๆ racemosa B .ได้รับการพิจารณาให้เป็นอาละวาดในการสร้าง การทำให้ดูได้กล่าวถึงความพยายามที่จะทำให้การพัฒนาโปรโตคอลการสร้างโดยใช้ explant โหนด cotyledonary สำหรับแพร่กระจายและการอนุรักษ์ของโรงงานผลิตเป็นยาที่สำคัญ.
วัสดุและวิธีการผลิตวัสดุ
ลำพ็อดที่อุดมสมบรูณ์ของ racemosa Bauhinia .จะถูกรวบรวม kotnoor หมู่บ้านและแคมปัสมหาวิทยาลัย gulbarga gulbarga กรณาฏกะประเทศอินเดีย เมล็ดพันธุ์เสื้อก็ดูแลเอาใจใ[ 12 ]และล้างด้วยน้ำยาทำความสะอาด( 5% v / v teepol , godrej ,อินเดีย)ล้างทำความสะอาดฆ่าเชื้อขวดนมด้วยน้ำกลั่นและพื้นที่ฆ่าเชื้อคลอไรด์ก็ยังพร้อมด้วย 0.1% w / v ( Hi มีเดีย,มุมไบ)เป็นเวลา 5 นาทีหลังจากน้ำซาวพร้อมด้วย inoculated น้ำกลั่นฆ่าเชื้อได้ในท่อวัฒนธรรมของ 25 x 150 มม.( borosil อินเดีย) ท่อดูดฝุ่นเหล่านี้ประกอบด้วยน้ำกลั่น
.................
ที่เกี่ยวข้องผู้เขียน L . N . rajanna โรงงาน systematics เป็นยาโรงงานและห้องปฏิบัติการ
กรม gulbarga post-graduate มหาวิทยาลัยการศึกษาและการวิจัยในพฤกษศาสตร์
gulbarga -585 106 กรณาฏกะประเทศอินเดีย. E - mail : [e-mail] ..