Transient and stable expression of

Transient and stable expression of gfp gene
Segments of cotton hypocotyls were used for co-cul-
ture with the Agrobacterium and sampled at different
time points, then checked for the GFP expression un-
der the UV light. After co-culture with Agrobacterium,
transient expressions in cotton hypocotyls were visible
as early as 42 h after infection and reached maximum
levels on day 3 (Fig. 1-A, B). The majority of the cells
showing transient expression were close to the wounded
edge. Interestingly, most explants showed a ring of
transient GFP activity around the primary vascular struc-
ture 42 h after co-culture (Fig. 1-A). Stronger fluores-
cence was observed on day 3 in the vascular region
(Fig. 1-B). Agrobacterium emitted dull, pale green fluo-
rescence as observed under our fluorescence
microscope; however, this was quite distinct from the
bright green fluorescence of GFP-expressing cotton
cells which was consistent with the results described
by Sunilkumar and Rathore (2001). The transient ac-
tivity was predominant at the cut surface in the
hypocotyls, and very few of the transient transforma-
tion events were observed in the unwounded parts of
hypocotyls in the epidermal cells (Fig. 1-C). The re-sults on transient transformation of hypocotyl cells sug-gest that Agrobacterium-mediated transfering of T-DNA
into cotton genome is highly efficient. Although some
earliest transient GFP activity was seen in the epider-
mal cells, only a few cell division activity was detected
in these cells, approximately 0.25% stable expression
rate was obtained in this study (Fig. 1-D).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นิพจน์แบบฉับพลัน และมีเสถียรภาพของยีน gfpส่วนของ hypocotyls ฝ้ายใช้สำหรับ co-cul -ture ด้วยอโกรแบคทีเรียมการ และตัวอย่างที่แตกต่างกันเวลาจุด แล้ว ตรวจสอบนิพจน์ GFP un -der UV แสง หลังจากวัฒนธรรมร่วมกับอโกรแบคทีเรียมนิพจน์แบบฉับพลันใน hypocotyls ฝ้ายได้เห็นเริ่มต้นที่ 42 h หลังจากการติดเชื้อและการเดินทางสูงสุดระดับในวันที่ 3 (Fig. 1 A, B) ส่วนใหญ่ของเซลล์แสดงนิพจน์แบบฉับพลันได้ใกล้กับที่ได้รับบาดเจ็บขอบ เป็นเรื่องน่าสนใจ explants ส่วนใหญ่แสดงให้เห็นว่าวงแหวนของชั่วคราว GFP กิจกรรมสถานหลักของหลอดเลือด struc-ture h 42 หลังวัฒนธรรมร่วมกิน 1-A) แข็งแกร่ง fluores-cence ถูกตรวจสอบในวันที่ 3 ในภูมิภาคของหลอดเลือดกิน 1-B) อโกรแบคทีเรียมออกมาน่าเบื่อ ซีดเขียว fluo-rescence เท่าที่สังเกตภายใต้ fluorescence ของเรากล้องจุลทรรศน์ อย่างไรก็ตาม นี้เป็นค่อนข้างแตกต่างจากการfluorescence สีเขียวสดใสฝ้ายแสดง GFPเซลล์ซึ่งสอดคล้องกับผลการอธิบายโดย Sunilkumar และห้องพักทุก (2001) การชั่วคราว ac-tivity ถูกกันที่ตัดพื้นผิวในการhypocotyls และน้อยของชั่วคราว transforma-เหตุการณ์สเตรชันสุภัคส่วนดูจะของhypocotyls ในเซลล์ epidermal กิน 1 C) Sults ใหม่ในการเปลี่ยนแปลงแบบฉับพลันของ hypocotyl เซลล์ sug gest ที่โอน mediated อโกรแบคทีเรียม T-เอ็นเป็นผ้าฝ้าย จีโนมจะมีประสิทธิภาพสูง แม้ว่าบางกิจกรรม GFP ชั่วคราวแรกสุดที่เห็นใน epiderพบเซลล์ mal เพียงไม่กี่เซลล์ฝ่ายกิจกรรมในเซลล์เหล่านี้ ประมาณ 0.25% นิพจน์ที่มีเสถียรภาพอัตราได้รับในการศึกษานี้กิน 1 D)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแสดงออกชั่วคราวและมีเสถียรภาพของยีน GFP
ส่วนของส่วนใต้ใบเลี้ยงฝ้ายถูกนำมาใช้เพื่อร่วม cul-
ข้อมูล ture กับ Agrobacterium และตัวอย่างที่แตกต่างกัน
จุดเวลาที่ตรวจสอบแล้วสำหรับการแสดงออก GFP ยกเลิก
der แสงยูวี หลังจากที่ร่วมกับ Agrobacterium วัฒนธรรม,
การแสดงออกชั่วคราวในส่วนใต้ใบเลี้ยงฝ้ายมองเห็นได้
เร็วที่สุดเท่าที่ 42 ชั่วโมงหลังจากการติดเชื้อและสูงสุด
ระดับในวันที่ 3 (รูปที่. 1-A, B) ส่วนใหญ่ของเซลล์
แสดงแสดงออกชั่วคราวได้ใกล้เคียงกับที่ได้รับบาดเจ็บ
ขอบ ที่น่าสนใจมากที่สุดชิ้นแสดงให้เห็นแหวนของ
กิจกรรม GFP ชั่วคราวรอบโครงสร้างหลักหลอดเลือด
Ture 42 ชั่วโมงหลังจากที่ร่วมวัฒนธรรม (รูปที่. 1) fluores- แข็งแรง
cence ถูกพบในวันที่ 3 ในภูมิภาคหลอดเลือด
(รูป. 1-B) Agrobacterium ปล่อยออกมาหมองคล้ำ fluo- สีเขียวอ่อน
rescence สังเกตภายใต้การเรืองแสงของเรา
กล้องจุลทรรศน์; แต่นี้ค่อนข้างแตกต่างจาก
การเรืองแสงสีเขียวสดใสของ GFP-แสดงฝ้าย
เซลล์ซึ่งสอดคล้องกับผลการอธิบาย
โดย Sunilkumar และ Rathore (2001) AC- ชั่วคราว
ประสิทธิภาพในการเป็นเด่นที่พื้นผิวการตัดใน
ส่วนใต้ใบเลี้ยงและมากน้อยของชั่วคราว transforma-
เหตุการณ์การถูกตั้งข้อสังเกตในส่วนกรี๊ดกร๊าดของ
ส่วนใต้ใบเลี้ยงในเซลล์ผิวหนัง (รูป. 1-C) อีกไสในการเปลี่ยนแปลงชั่วคราวของเซลล์ hypocotyl SuG-เกสที่โอน Agrobacterium พึ่งของ T-DNA
เข้าไปในจีโนมผ้าฝ้ายมีประสิทธิภาพสูง แม้ว่าบาง
กิจกรรม GFP ชั่วคราวที่เก่าแก่ที่สุดที่เห็นใน epider-
เซลล์ Mal เพียงกิจกรรมการแบ่งเซลล์ไม่กี่ที่ตรวจพบ
ในเซลล์เหล่านี้ประมาณ 0.25% การแสดงออกที่มีเสถียรภาพ
อัตราที่ได้รับในการศึกษานี้ (รูปที่. 1-D)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และมีการแสดงออกของยีน GFP ชั่วคราว
ส่วนของฝ้ายสารใช้สำหรับ Co CUL -
จริงด้วย Agrobacterium และเก็บตัวอย่างที่แตกต่างกัน
เวลาจุดแล้วตรวจสอบสำหรับการแสดงออกและ GFP -
เดอร์แสงยูวี . หลังจาก Co วัฒนธรรมด้วย Agrobacterium
ชั่วคราว , การแสดงออกในฝ้ายเป็นสารที่มองเห็น
เร็ว 42 ชั่วโมงหลังจากการติดเชื้อและสูงสุด
ระดับใน 3 วัน ( ภาพที่ 1-a , B )ส่วนใหญ่ของเซลล์
แสดงสีหน้าชั่วคราวใกล้บาดเจ็บ
ขอบ น่าสนใจ อาหารส่วนใหญ่มีแหวนของ GFP
ชั่วคราวกิจกรรมรอบอาคาร - หลอดเลือดหลัก
ture 42 ชั่วโมงหลังจากวัฒนธรรม CO ( รูป 1-a ) แข็งแกร่ง fluores -
cence สังเกตได้ใน 3 วัน ในเขตของหลอดเลือด
( รูปที่ 1-b ) อโกรแบคทีเรียมออกมาทึบ ฟลู - สีเขียวอ่อน
rescence เท่าที่สังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์
ของเรา แต่นี้ค่อนข้างแตกต่างจากการเรืองแสงของ GFP แสดงสีเขียวสดใส

ฝ้ายเซลล์ซึ่งสอดคล้องกับผลและอธิบาย
โดย sunilkumar ราเธอร์ ( 2001 ) ชั่วคราว AC -
tivity เป็นโดดที่หน้าตัดใน
สารและมากน้อยของ transforma ชั่วคราว -
เหตุการณ์ที่พบใน unwounded tion ส่วน
สารในเซลล์ epidermal ( รูปที่ 1 c ) Re sults บนการเปลี่ยนแปลงชั่วคราวของระบบเซลล์ที่ผ่านการถ่ายทอดของซากุเกส Agrobacterium t-dna
เป็นผ้าฝ้าย ) มีประสิทธิภาพสูง แม้ว่าบาง
แรกสุดชั่วคราว GFP กิจกรรมที่เห็นใน epider -
มัลเซลล์ เพียงไม่กี่เซลล์ ส่วนกิจกรรมที่ตรวจพบ
ในเซลล์เหล่านี้ประมาณ 0.25% เท่ากันคงแสดงออกได้ในการศึกษานี้

( ภาพภายใน )