Enterotoxigenic Escherichia coli (E

Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) are endemic pathogens in the developing world. They frequently cause illness in travelers, and are among the most prevalent causes of diarrheal disease in children. Pathogenic ETEC strains employ fimbriae as adhesion factors to bind the luminal surface of the intestinal epithelium and establish infection. Accordingly, there is marked interest in immunoprophylactic strategies targeting fimbriae to protect against ETEC infections. Multiple strategies have been reported for purification of ETEC fimbriae, however none is ideal. Purification has typically involved the use of highly virulent wild-type strains. We report here a simple and improved method to purify ETEC fimbriae, which was applied to obtain two different Class 5 fimbriae types of clinical relevance (CFA/I and CS4) expressed recombinantly in E. coli production strains. Following removal from cells by shearing, fimbriae proteins were purified by orthogonal purification steps employing ultracentrifugation, precipitation, and ion-exchange membrane chromatography. Purified fimbriae demonstrated the anticipated size and morphology by electron microscopy analysis, contained negligible levels of residual host cell proteins, nucleic acid, and endotoxin, and were recognized by convalescent human anti-sera.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) ตรวจโรคในประเทศกำลังพัฒนาได้ พวกเขามักทำให้เกิดการเจ็บป่วยในนักท่องเที่ยว และเป็นสาเหตุของโรคในเด็ก diarrheal แพร่หลายมากที่สุด สายพันธุ์ ETEC pathogenic จ้าง fimbriae เป็นปัจจัยยึดติดผูกผิว luminal epithelium ลำไส้ และสร้างเชื้อ ดังนั้น มีไว้สนใจในกลยุทธ์ immunoprophylactic fimbriae เพื่อป้องกันการติดเชื้อ ETEC กำหนดเป้าหมาย มีการรายงานหลายกลยุทธ์สำหรับฟอก ETEC fimbriae แต่ไม่เหมาะ ฟอกได้โดยทั่วไปเกี่ยวข้องกับการใช้สายพันธุ์ป่าชนิด virulent สูง เรารายงานนี่ง่าย และปรับปรุงวิธีการสถานที่พักผ่อนที่ fimbriae ETEC ซึ่งถูกใช้เพื่อขอรับสองคลาส 5 fimbriae ชนิดต่าง ๆ ของความเกี่ยวข้องทางคลินิก (CFA / ฉันและ CS4) แสดง recombinantly ใน E. coli สายพันธุ์ผลิต ต่อไปนี้ออกจากเซลล์โดยการตัด fimbriae โปรตีนที่บริสุทธิ์ โดยขั้นตอนฟอก orthogonal ใช้ ultracentrifugation ฝน และ chromatography เยื่อแลกเปลี่ยนไอออน Fimbriae บริสุทธิ์แสดงขนาดที่คาดไว้และสัณฐานวิทยา โดยการวิเคราะห์อิเล็กตรอน microscopy ประกอบด้วยระยะ และระดับ ของโปรตีนเซลล์โฮสต์เหลือ กรดนิวคลีอิก endotoxin และพักฟื้นจะป้องกันมนุษย์ได้รู้จัก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

enterotoxigenic เชื้อ Escherichia coli (ETEC) เป็นเชื้อก่อโรคประจำถิ่นในประเทศกำลังพัฒนา พวกเขามักจะทำให้เกิดการเจ็บป่วยในนักท่องเที่ยวและเป็นหนึ่งในสาเหตุที่พบบ่อยที่สุดของโรคอุจจาระร่วงในเด็ก สายพันธุ์ที่ทำให้เกิดโรค ETEC จ้าง fimbriae เป็นปัจจัยในการผูกยึดเกาะพื้นผิวของเยื่อบุผิว luminal ลำไส้และสร้างการติดเชื้อ ดังนั้นมีความสนใจการทำเครื่องหมายในกลยุทธ์ immunoprophylactic fimbriae กำหนดเป้​​าหมายในการป้องกันการติดเชื้อ ETEC กลยุทธ์หลายได้รับการรายงานสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ ETEC fimbriae แต่ไม่มีใครเหมาะ การทำให้บริสุทธิ์ได้มีส่วนร่วมโดยทั่วไปแล้วจะใช้ความรุนแรงสูงสายพันธุ์ป่าชนิด เรารายงานที่นี่วิธีที่ง่ายและดีขึ้นในการชำระล้าง ETEC fimbriae ซึ่งถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้สองระดับที่แตกต่างกัน 5 fimbriae ประเภทความเกี่ยวข้องทางคลินิก (CFA / I และ CS4) แสดง recombinantly ในอีโคไลสายพันธุ์ที่ผลิต ต่อไปนี้ออกจากเซลล์โดยการตัดโปรตีน fimbriae ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์มุมฉากจ้าง ultracentrifugation ฝนและแลกเปลี่ยนไอออนโคเมมเบรน fimbriae บริสุทธิ์แสดงให้เห็นขนาดและสัณฐานวิทยาที่คาดการณ์ไว้โดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการวิเคราะห์ที่มีอยู่ในระดับที่เล็กน้อยของโปรตีนของเซลล์เจ้าบ้านที่เหลือกรดนิวคลีและสารพิษและได้รับการยอมรับจากพักฟื้นมนุษย์ต่อต้านซีรั่ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

E Escherichia coli ( ผู้เชี่ยวชาญ ) และเชื้อโรคในประเทศกำลังพัฒนา พวกเขามักก่อให้เกิดโรคในคน และเป็นหนึ่งในสาเหตุที่แพร่หลายมากที่สุดของโรคอุจจาระร่วงในเด็ก บทความหลัก : เชื้อโรคสายพันธุ์ใช้ฟิมเบรียเป็นปัจจัยที่ผูกยึดติดพื้นผิว + ของเยื่อบุผิวลำไส้ และสร้างการติดเชื้อ ตามมีเครื่องหมายความสนใจใน immunoprophylactic กลยุทธ์เป้าหมายฟิมเบรีย เพื่อป้องกันเชื้อผู้เชี่ยวชาญ . กลยุทธ์หลายได้รับการรายงานเพื่อผลิตผู้เชี่ยวชาญฟิมเบรีย แต่ไม่เหมาะ บริสุทธิ์ได้โดยทั่วไปที่เกี่ยวข้องกับการใช้ความรุนแรงสูงของสายพันธุ์ เรารายงานมาง่าย และปรับปรุงวิธีการฟอกฟิมเบรีย ผู้เชี่ยวชาญ ,ซึ่งถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้สองแตกต่างกัน 5 ชั้นฟิมเบรีย ประเภทของความเกี่ยวข้องทางคลินิก ( CFA / ฉันและ CS4 ) แสดง recombinantly ใน E . coli สายพันธุ์ที่ผลิต ต่อเอาจากเซลล์โดยการตัดโปรตีนบริสุทธิ์โดยวิธีฟอกฟิมเบรีย มีขั้นตอนการ ultracentrifugation การตกตะกอน และเยื่อแลกเปลี่ยนไอออนโครมาโทกราฟีบริสุทธิ์ฟิมเบรียแสดงขนาดและรูปร่าง โดยการวิเคราะห์จากกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนชนิดส่องกราด ที่มีอยู่น้อย ระดับเหลือเซลล์เจ้าบ้าน โปรตีน กรดนิวคลีอิก และชีวพิษภายในตัว และเป็นที่รู้จักโดยพักฟื้นมนุษย์ต่อต้านเซรา