Isolation of yeast strains from the samples. Collected
samples were diced and placed in 9 mL of yeast-peptonedextrose
(YPD) broth (1% yeast extract, 2% peptone, 2%
dextrose, pH 4.5) to make a total volume of 10 mL, which
was vortexed vigorously for several minutes. An aliquot
(1.5 mL) was centrifuged for 1 min at 12,000 rpm in a
microcentrifuge (Hanil Co., Seoul, Korea). The precipitate
was resuspended in 200 µL of lysozyme solution (10 mg/
mL) and maintained at room temperature for 5~10 min to
lyse the bacteria. Then, the supernatant (20 µL) was spread
on YPD agar plates containing 10% dextrose and chloramphenicol
(50 µg/mL) to inhibit the growth of filamentous
fungi and bacteria, respectively. The plates were incubated
for 2 days at 30o
C, and colonies with yeast-like morphology
were streaked onto fresh YPD agar plates. Microscopic
observation of the colonies was made using a phase contrast
microscope (DE/Axioplan 2; Carl Zeiss, Oberkochen,
Germany) at ×400 magnification to determine their morphology
and purity
การแยกสายพันธุ์ยีสต์จากกลุ่มตัวอย่าง เก็บ
ตัวอย่างที่ถูกหั่นสี่เหลี่ยมลูกเต๋าและวางไว้ใน 9 มลยีสต์ peptonedextrose
(YPD) น้ำซุป (สารสกัดจาก 1% ยีสต์, 2% เปปโตน, 2%
เดกซ์โทรสค่า pH 4.5) เพื่อให้ปริมาณรวมของ 10 มิลลิลิตรซึ่ง
ได้รับการหมุนวนอย่างจริงจังเป็นเวลาหลายนาที . หาร
(1.5 มิลลิลิตร) ถูกปั่นเป็นเวลา 1 นาทีที่ 12,000 รอบต่อนาทีใน
ไมโคร (Hanil Co. , กรุงโซลประเทศเกาหลี) ตะกอน
ถูก resuspended ใน 200 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาไลโซไซม์ (10 มิลลิกรัม /
มิลลิลิตร) และการบำรุงรักษาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 ~ 10 นาทีถึง
lyse แบคทีเรีย จากนั้นใส (20 ไมโครลิตร) กระจาย
ใน YPD แผ่นวุ้นที่มีเดกซ์โทรส 10% และ chloramphenicol
(50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเส้นใย
เชื้อราและแบคทีเรียตามลำดับ แผ่นถูกบ่ม
เป็นเวลา 2 วันที่ 30o
C และอาณานิคมที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยายีสต์เหมือน
ถูกลายลงบน YPD สดแผ่นวุ้น กล้องจุลทรรศน์
สังเกตของอาณานิคมที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้เฟสตรงกันข้าม
กล้องจุลทรรศน์ (DE / Axioplan 2; Carl Zeiss, Oberkochen,
เยอรมนี) ที่× 400 ขยายเพื่อตรวจสอบลักษณะทางสัณฐานวิทยาของพวกเขา
และความบริสุทธิ์
การแปล กรุณารอสักครู่..

การคัดเลือกสายพันธุ์ยีสต์จากตัวอย่าง รวบรวมจำนวนสี่เหลี่ยมลูกเต๋าและวางไว้ใน peptonedextrose ยีสต์ 9 มิลลิลิตร( ypd ) ซุป ( สารสกัดจากยีสต์ 1% 2% ตามลำดับ 2 % ,เดกซ์โทรส pH 4.5 ) เพื่อให้ปริมาณ 10 ml ซึ่งคือ vortexed อย่างจริงจังเป็นเวลาหลายนาที เป็นส่วนลงตัว( 1.5 ml ) คือระดับ 1 นาทีที่ 12 , 000 รอบต่อนาที ในไมโครเซนตริฟิวจ์ ( Hanil จำกัด , โซล , เกาหลี ) การตกตะกอนคือ resuspended 200 µ L ของไลโซไซม์ โซลูชั่น ( 10 มิลลิกรัมต่อลิตรมิลลิลิตร ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 ~ 10 นาทีทำให้แบคทีเรีย จากนั้น นำ ( 20 µ L ) คือกระจายใน ypd วุ้นแผ่นประกอบด้วยเดกซ์โทรส 10% และคลอแรมเฟนิคอล( 50 µกรัม / มิลลิลิตร ) เพื่อยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อรา และแบคทีเรีย ตามลำดับ จานถูกบ่มเป็นเวลา 2 วัน ที่ 30oC และอาณานิคมกับยีสต์ เช่น สัณฐานลายบนสด ypd วุ้นแผ่น ขนาดจิ๋วการสังเกตของอาณานิคมถูกสร้างโดยใช้ระยะชัดกล้องจุลทรรศน์ ( de / axioplan Carl Zeiss oberkochen , , 2เยอรมนี ) × 400 ขยายเพื่อศึกษาสัณฐานวิทยาของและความบริสุทธิ์
การแปล กรุณารอสักครู่..
