The bovine viral diarrhea virus (BV

The bovine viral diarrhea virus (BVDV) is the etiological agent responsible for a wide spectrum of clinical diseases in cattle. The glycoprotein E2 is the major envelope protein of this virus and the strongest inductor of the immune response. There are several available commercial vaccines against bovine viral diarrhea (BVD), which show irregular performances. Here, we report the use of tobacco plants as an alternative productive platform for the expression of the truncated version of E2 glycoprotein (tE2) from the BVDV. The tE2 sequence, lacking the transmembrane domain, was cloned into the pK7WG2 Agrobacterium binary vector. The construct also carried the 2S2 Arabidopsis thaliana signal for directing the protein into the plant secretory pathway, the Kozak sequence, an hexa-histidine tag to facilitate protein purification and the KDEL endoplasmic reticulum retention signal. The resulting plasmid (pK-2S2-tE2-His-KDEL) was introduced into Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 by electroporation. The transformed A. tumefaciens was then used to express tE2 in leaves of Nicotiana tabacum plants. Western blot and ELISA using specific monoclonal antibodies confirmed the presence of the recombinant tE2 protein in plant extracts. An estimated amount of 20 μg of tE2 per gram of fresh leaves was regularly obtained with this plant system. Injection of guinea pigs with plant extracts containing 20 μg of rtE2 induced the production of BVDV specific antibodies at equal or higher levels than those induced by whole virus vaccines.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไวรัสโรคอุจจาระร่วงจากเชื้อไวรัสวัว (BVDV) เป็นสาเหตุสำคัญประการรับผิดชอบในการสเปกตรัมกว้างของโรคทางคลินิกในวัว E2 ไกลโคโปรตีนเป็นโปรตีนซองจดหมายที่สำคัญของไวรัสนี้และเหนี่ยวนำที่แข็งแกร่งของการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน มีการฉีดวัคซีนในเชิงพาณิชย์หลายใช้ได้กับโรคอุจจาระร่วงจากเชื้อไวรัสที่มีวัว (BVD) ซึ่งแสดงให้เห็นการแสดงที่ผิดปกติ ที่นี่เราจะรายงานผลการใช้พืชยาสูบเป็นแพลตฟอร์มการผลิตทางเลือกสำหรับการแสดงออกของรุ่นที่ถูกตัดทอนของไกลโคโปรตีน E2 (ที่ Te2) จาก BVDV ลำดับ Te2 ขาดรนโดเมนที่ถูกโคลนเข้าไปใน Agrobacterium pK7WG2 ไบนารีเวกเตอร์ สร้างยังดำเนิน Arabidopsis thaliana 2S2 สัญญาณการกำกับโปรตีนเข้าไปในทางเดินหลั่งพืชลำดับ Kozak, แท็กเฮกซ่า-ฮิสติดีนเพื่ออำนวยความสะดวกให้บริสุทธิ์โปรตีนและ KDEL endoplasmic reticulum สัญญาณการเก็บรักษา พลาสมิดที่เกิด (PK-2S2-Te2 พระองค์-KDEL) ถูกนำเข้าสู่ Agrobacterium tumefaciens EHA101 ความเครียดโดย electroporation A. tumefaciens เปลี่ยนถูกนำมาใช้เพื่อแสดงความ Te2 ในใบของพืช Nicotiana tabacum ดวงตะวันและวิธี ELISA โดยใช้โคลนอลแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงได้รับการยืนยันการปรากฏตัวของโปรตีนรีคอมบิแน Te2 ในสารสกัดจากพืช จำนวนเงินประมาณ 20 ไมโครกรัมของ Te2 ต่อกรัมของใบสดที่ได้รับอย่างสม่ำเสมอด้วยระบบพืชชนิดนี้ ฉีดหนูตะเภาที่มีสารสกัดจากพืชที่มี 20 ไมโครกรัมของ rtE2 เหนี่ยวนำให้เกิดการผลิตของ BVDV แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงในระดับที่เท่ากันหรือสูงกว่าที่เกิดจากการฉีดวัคซีนทั้งไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พระโคไวรัส ( ไวรัสท้องเสีย bvdv ) เป็นเจ้าหน้าที่ที่รับผิดชอบทราบสเปกตรัมกว้างของคลินิกโรคในโค ส่วนโปรตีน E2 เป็นหลัก โปรตีนของไวรัสนี้ ซองและการจบของการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน มีหลายใช้ได้ในเชิงพาณิชย์วัคซีนต่อต้านไวรัสและอาการท้องร่วง ( บีวีดี ) ซึ่งแสดงสมรรถนะผิดปกติ ที่นี่เรารายงานใช้พืชยาสูบเป็นแพลตฟอร์มที่มีประสิทธิภาพทางเลือกสำหรับการแสดงออกของโปรตีนออกรุ่น E2 ( te2 ) จาก bvdv . ลำดับ te2 ไม่มีเยื่อหุ้มเซลล์ ถูกโคลนเข้าไปในเวกเตอร์เลขฐานสอง pk7wg2 Agrobacterium . สร้างยังแบก 2s2 Arabidopsis thaliana สัญญาณสำหรับการโปรตีนในพืชพบทางเดิน ,การลำดับ Kozak , หกีนแท็กเพื่ออำนวยความสะดวกบริสุทธิ์โปรตีนและ kdel เอนโดพลาสมิกเรติคูลัมการเก็บสัญญาณ ผลของพลาสมิด ( pk-2s2-te2-his-kdel ) ที่ใช้เป็น eha101 Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์โดย electroporation . A . tumefaciens เปลี่ยนก็ใช้บริการ te2 ในใบของพืชทาบาคัมขนะ .blot ELISA โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงและตะวันตกยืนยันการแสดงตนของรีคอมบิแนนท์ te2 โปรตีนสารสกัดจากพืช ประมาณจำนวน 20 μกรัม te2 1 กรัม ใบสดมีเสมอได้กับระบบโรงงานฉีดหนูทดลองกับสารสกัดจากพืชที่มี 20 μกรัม rte2 กระตุ้นการผลิตแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจง bvdv ที่เท่ากับหรือสูงกว่าระดับที่สูงกว่าวัคซีนทั้งหมดที่เกิดจากไวรัส .