The host cell used for the transfor

The host cell used for the transformant is not particularly limited, and
examples of the host cell include microorganisms, plants or animals. In the
present invention, microorganisms include microalgae. Among these,
microorganisms and plants are preferable, and microorganisms are more
preferable, from the viewpoints of production efficiency and the usability of lipids.
As the microorganisms for the host cell, prokaryotes and eukaryotes can
be used. Prokaryotes include microorganisms which belong to the genus
Escherichia or microorganisms which belong to the genus Bacillus. Eukaryotes
include yeast or filamentous fungi. Among them, from the viewpoint of the
productivity of lipids, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Rhodosporidium toruloides, 5 and Mortierella sp. are preferable, and Escherichia coli is more preferable.
As the microorganisms for the host cell, microalgae are also preferable.
As microalgae, from a viewpoint of establishment of a gene recombination
technique, algae belonging to the genus Chlamydomonas, algae belonging to the
genus Chlorella, algae belonging to the genus Phaeodactylum, and algae
10 belonging to the genus Nannochloropsis are preferable, and algae belonging to
the genus Nannochloropsis are more preferable. Specific examples of the algae
belonging to the genus Nannochloropsis include Nannochloropsis oculata,
Nannochloropsis gaditana, Nannochloropsis salina, Nannochloropsis oceanica,
Nannochloropsis atomus, Nannochloropsis maculata, Nannochloropsis granulata, 15 and Nannochloropsis sp. Among them, from the viewpoint of the productivity of
lipids, Nannochloropsis oculata or Nannochloropsis gaditana is preferable, and
Nannochloropsis oculata is more preferable.
As the plants for the host cell, from the viewpoint of a lipid content of
seeds, Arabidopsis thaliana, rapeseed, Cocos nucifera, palm, cuphea, and 20 Jatropha curcas are preferable, and Arabidopsis thaliana is more preferable.
{0034}
A vector for use as the expression vector may be any vector capable of
introducing the เอซิล-ACP thioesterase gene of the present invention into a host
cell, and expressing the gene in the host cell. For example, a vector which has 25 expression regulation regions such as a promoter and a terminator in accordance
with the type of the host cell to be used, and has a replication initiation point, a
selection marker or the like, can be used. Furthermore, the vector may also be
a vector capable of self-proliferation and self-replication outside the chromosome,
such as a plasmid, or may also be a vector which is incorporated into the chromosome.
Specific examples of the vector include, in the case of using a
microorganism as the host cell, pBluescript II SK(-) (manufactured by Stratagene 5 Corp.), pUC-based vector (manufactured by Takara Shuzo Co., Ltd.), a pET-
based vector (manufactured by Takara Bio, Inc.), a pGEX-based vector
(manufactured by GE Healthcare, Inc.), a pCold-based vector (manufactured by
Takara Bio, Inc.), pHY300PLK (manufactured by Takara Bio, Inc.), pUB110
(Mckenzie, T. et al., (1986), Plasmid 15 (2); p. 93-103), pBR322 (manufactured by 10 Takara Bio, Inc.), pRS403 (manufactured by Stratagene Corp.), and
pMW218/219 (manufactured by Nippon Gene Co., Ltd.). Particularly, in the case of using Escherichia coli as the host cell, pBluescript II SK(-) or
pMW218/219 is preferably used.
When the algae is used as the host cell, specific examples of the vector
15 include P66 (Chlamydomonas Center), P-322 (Chlamydomonas Center), pPha-
T1 (see Non-Patent Literature 2 described above) and pJET1 (manufactured by
COSMO BIO co., ltd.). In particular, in the case of using the algae belonging to
the genus Nannochloropsis as the host cell, pPha-T1 or pJET1 is preferably used.
Moreover, when the host cell is the algae belonging to the genus
20 Nannochloropsis, the host cell can be transformed, with referring to the method
described in the literature, Oliver Kilian, et al., Proceedings of the National
Academy of Sciences of the United States of America, Dec 27; 108(52), 2011, by
using the DNA fragment consisting of the gene of the present invention, a
promoter and a terminator. Specific examples of this DNA fragment include a 25 PCR-amplified DNA fragment and a restriction enzyme-cut DNA fragment.
In the case of using a plant cell as the host cell, examples of the vector include a pRI-based vector (manufactured by Takara Bio, Inc.), a pBI-based vector (manufactured by Clontech Laboratories, Inc.), and an 1N3-based vector
(manufactured by lnplanta Innovations, Inc.). Particularly, in the case of using
Arabidopsis thaliana as the host cell, a pRI-based vector or a pBI-based vector is preferably used.
The expression regulation regions such as a promoter and a terminator,
and the selection marker are not particularly limited, and CaO be appropriately
selected from ordinarily used promoters, markers and the like in accordance with the type of the host cell to be used.
Specific examples of the promoter include lac promoter, trp promoter, tac 10 promoter, trc promoter. T7 promoter, SpoVG promoter, cauliflower mosaic virus
35S RNA promoter, promoters for housekeeping genes such as tubulin, actin and
ubiquitin, rapeseed-derived Napin gene promoter, plant-derived Rubisco
promoter, and a promoter of a violaxanthin/(chlorophyll a)-binding protein gene
derived from the genus Nannochloropsis.
15 Examples of the selection marker include drug resistance genes such as
antibiotic resistance genes (e.g. an ampicillin resistance gene, a chloramphenicol resistance gene, an erythromycin resistance gene, a neomycin resistance gene, a kanamycin resistance gene, a spectinomycin resistance gene, a tetracycline
resistance gene, a blasticidin S resistance gene, a bialaphos resistance gene, a 20 zeocin resistance gene, a paromomycin resistance gene, and a hygromycin
resistance gene). Further, it is also possible to use a deletion of an auxotrophy-
related gene or the like as the selection marker.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์โฮสต์ที่ใช้สำหรับการ transformant ไม่จำกัดโดยเฉพาะอย่างยิ่ง และตัวอย่างของเซลล์โฮสต์รวมจุลินทรีย์ พืช หรือสัตว์ ใน ปัจจุบันประดิษฐ์ จุลินทรีย์ได้แก่ microalgae ในหมู่เหล่านี้จุลินทรีย์และพืชกว่า และจุลินทรีย์เป็นกว่า จากมุมมองของประสิทธิภาพการผลิตและการใช้งานของโครงการ เป็นจุลินทรีย์สำหรับเซลล์โฮสต์ prokaryotes และ eukaryotes สามารถสามารถใช้ Prokaryotes รวมถึงจุลินทรีย์ที่อยู่ในตระกูลนี้Escherichia หรือจุลินทรีย์ที่อยู่ในตระกูลนี้คัด Eukaryotes ใส่ยีสต์หรือเชื้อรา filamentous ในหมู่พวกเขา จากแง่มุมของการ ผลผลิตของโครงการ Escherichia coli คัด subtilis, Rhodosporidium toruloides, 5 และ Mortierella sp.กว่า และ Escherichia coli เป็นยิ่งกว่านั้น เป็นจุลินทรีย์สำหรับเซลล์โฮสต์ microalgae จะยังกว่าเป็น microalgae จากมุมมองของของ recombination ยีนเทคนิค สาหร่ายของสกุล Chlamydomonas สาหร่ายของ พืชสกุล Chlorella สาหร่ายของพืชสกุล Phaeodactylum และสาหร่าย 10 ของพืชสกุล Nannochloropsis มีกว่า และสาหร่ายที่อยู่ ตระกูลนี้ Nannochloropsis มีมากขึ้นกว่า ตัวอย่างเฉพาะของสาหร่าย ของตระกูลนี้ได้แก่ Nannochloropsis Nannochloropsis oculata Nannochloropsis gaditana, Nannochloropsis โรงแรมสลี Nannochloropsis oceanica Nannochloropsis atomus, Nannochloropsis maculata, Nannochloropsis granulata, 15 และ Nannochloropsis sp ในหมู่พวกเขา จากมุมมองของประสิทธิภาพของ โครงการ Nannochloropsis oculata หรือ Nannochloropsis gaditana ใช้ และ Nannochloropsis oculata เป็นยิ่งกว่าเป็นพืชเซลล์โฮสต์ จากแง่มุมของกระบวนการเนื้อหาของ เมล็ด Arabidopsis thaliana เมล็ดต้นเรพ โคโคส nucifera ปาล์ม cuphea และ 20 curcas สบู่ดำมีกว่า และ Arabidopsis thaliana เป็นยิ่งกว่า {0034}A เวกเตอร์สำหรับการใช้เป็นเวกเตอร์นิพจน์อาจเป็นเวกเตอร์ใด ๆ สามารถ แนะนำยีน thioesterase เอซิล ACP ของประดิษฐ์อยู่ในโฮสต์ เซลล์ และแสดงยีนในเซลล์โฮสต์ ตัวอย่าง เวกเตอร์ซึ่งมีขอบเขตบังคับนิพจน์ 25 เป็นโปรโมเตอร์และเทอร์มิเนเตอร์ใน กับชนิดของเซลล์โฮสต์ใช้ และมีจุดเริ่มต้นจำลอง การ สามารถใช้เครื่องหมายตัวเลือกหรือเหมือน นอกจากนี้ เวกเตอร์อาจ เวกเตอร์สามารถจำลองตนเองอยู่นอกโครโมโซม และการแพร่หลายของตนเอง เช่น plasmid หรืออาจเป็นเวกเตอร์ซึ่งจะรวมอยู่ในโครโมโซมตัวอย่างเฉพาะของเวกเตอร์รวม ในกรณีที่ใช้การจุลินทรีย์เซลล์โฮสต์ pBluescript II SK(-) (ผลิต โดย Stratagene 5 Corp.), pUC ตามเวกเตอร์ (ผลิต โดย Takara Shuzo Co., Ltd.) สัตว์เลี้ยงแบบ ใช้ (ผลิต โดย Takara ชีวภาพ Inc.), เวกเตอร์เวกเตอร์ตาม pGEX (ผลิต โดย GE สุขภาพ Inc.), เวกเตอร์ตาม pCold ที่ (ผลิตโดย Takara ไบโอ Inc.), pHY300PLK (ผลิต โดย Takara ชีวภาพ Inc.), pUB110 (Mckenzie ต.ร้อยเอ็ด al., (1986), Plasmid 15 (2) p. 93-103), pBR322 (ผลิต โดยไบโอ 10 Takara, Inc.), pRS403 (ผลิต โดย Stratagene Corp.), และpMW218/219 (ผลิต โดยนิปปอนยีน Co., Ltd.) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ในกรณีของ Escherichia coli โดยใช้เซลล์โฮสต์ pBluescript II SK(-) หรือ ควรใช้ pMW218/219เมื่อใช้สาหร่ายในเซลล์โฮสต์ ตัวอย่างเฉพาะของเวกเตอร์15 รวม P66 (Chlamydomonas เซ็นเตอร์), P-322 (Chlamydomonas เซ็นเตอร์), pPha -T1 (ดูสิทธิบัตรไม่ใช่วรรณคดี 2 ข้าง) และ pJET1 (ผลิตโดยไบโอคอสโม co., ltd) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ในกรณีที่ใช้สาหร่ายเป็นของควรใช้พืชสกุล Nannochloropsis เป็นเซลล์โฮสต์ pPha T1 หรือ pJET1 นอกจากนี้ เมื่อเซลล์โฮสต์เป็นสาหร่ายที่เป็นของตระกูลนี้ Nannochloropsis 20 เซลล์โฮสต์สามารถที่แตกต่าง อ้างอิงถึงวิธีการ ในวรรณคดี Oliver สถาปัตยกรรม et al. วิชาการแห่งนี้ สถาบันวิทยาศาสตร์ของสหรัฐอเมริกา 27 dec 108(52), 2011 โดย ใช้ส่วนของดีเอ็นเอที่ประกอบด้วยยีนของสิ่งประดิษฐ์ในปัจจุบัน การ โปรโมเตอร์และแบบ ตัวอย่างเฉพาะเจาะจงของดีเอ็นเอส่วนนี้รวมถึงส่วนขยายของ PCR ดีเอ็นเอ 25 และส่วนดีเอ็นเอเอนไซม์จำกัดตัดในกรณีใช้เซลล์พืชเซลล์โฮสต์ ตัวอย่างของเวกเตอร์รวมเวกเตอร์ตามลำดับที่ (ผลิต โดย Takara ชีวภาพ Inc.), เวกเตอร์ตาม pBI ที่ (ผลิต โดยห้องปฏิบัติการ Clontech, Inc.), และเวกเตอร์ที่ใช้ 1N3 (ผลิต โดย lnplanta นวัตกรรม Inc.) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ในกรณีที่ใช้ควรใช้ Arabidopsis thaliana เป็นเซลล์โฮสต์ เวกเตอร์ตามลำดับ หรือเวกเตอร์ตาม pBI ภูมิภาคระเบียบนิพจน์เป็นโปรโมเตอร์และมีเทอร์มิเนเตอร์เครื่องหมายตัวเลือกไม่จำกัดโดยเฉพาะอย่างยิ่ง และโจได้อย่างเหมาะสมเลือกจากปกติใช้ก่อ เครื่องหมาย และดังตามชนิดของเซลล์โฮสต์จะใช้ตัวอย่างเฉพาะของโปรโมเตอร์ที่มีโปรโมเตอร์ลัค โปรโมเตอร์ trp โปรโมเตอร์มาตรวัด 10, trc โปรโมเตอร์ โปรโมเตอร์ T7, SpoVG โปรโมเตอร์ ไวรัสโมเสกกะหล่ำ โปรโมเตอร์ 35S อาร์เอ็นเอ ก่อสำหรับยีนทำความสะอาดเช่น tubulin แอกติน และ ubiquitin มาเรพซีดนพินยีนโปรโมเตอร์ Rubisco มาโรงงาน โปรโมเตอร์ และโปรโมเตอร์ของยีน violaxanthin /(chlorophyll a) ผูกเป็น ได้มาจากพืชสกุล Nannochloropsis15 ตัวอย่างของเครื่องหมายตัวเลือกได้แก่ยีนต้านทานยาเสพติดเช่นยีนต้านทานยาปฏิชีวนะ (เช่นมียีนต้านทานแอมพิซิลลิน ยีนต้านทานการ chloramphenicol ยีนต้านทานการ erythromycin ยีนต้านทานนีโอมัยซิน ยีนต้านทานการกานามัยซิน ยีนต้านทาน spectinomycin เตตราไซคลีนเป็นยีนต้านทาน ยีนต้านทาน blasticidin S ยีนต้านทาน bialaphos ยีนต้านทาน 20 zeocin ยีนต้านทานการ paromomycin และ hygromycin เป็น ต้านทานยีน) เพิ่มเติม ก็ยังสามารถใช้การลบของการ auxotrophy- ยีนที่เกี่ยวข้องหรือเหมือนเป็นเครื่องหมายที่เลือก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์โฮสต์ที่ใช้สำหรับ transformant ไม่ได้ จำกัด อยู่เฉพาะอย่างยิ่งและ
ตัวอย่างของเซลล์โฮสต์รวมถึงจุลินทรีย์พืชหรือสัตว์ ในการ
ประดิษฐ์ในปัจจุบันจุลินทรีย์รวมถึงสาหร่าย ระหว่างนี้
จุลินทรีย์และพืชเป็นที่นิยมและจุลินทรีย์ที่มีมากขึ้น
กว่าจากมุมมองของประสิทธิภาพการผลิตและการใช้งานของไขมัน.
ในฐานะที่เป็นจุลินทรีย์เซลล์โฮสต์ prokaryotes ยูคาริโอและสามารถ
นำมาใช้ prokaryotes รวมถึงจุลินทรีย์ที่เป็นชนิด
Escherichia หรือจุลินทรีย์ที่อยู่ในสกุล Bacillus ยูคาริโอ
รวมถึงยีสต์หรือเชื้อรา ในหมู่พวกเขาจากมุมมองของ
ผลผลิตของไขมันเชื้อ Escherichia coli, เชื้อ Bacillus subtilis, Rhodosporidium toruloides, 5 และ Mortierella SP เป็นที่นิยมและอีโคเป็นที่นิยมมากขึ้น.
ในฐานะที่เป็นจุลินทรีย์เซลล์โฮสต์สาหร่ายนี้ยังดีกว่า.
ในฐานะที่เป็นสาหร่ายจากมุมมองของการจัดตั้งการรวมตัวกันของยีน
เทคนิคสาหร่ายที่เป็นสกุล Chlamydomonas สาหร่ายที่เป็นของ
คลอเรลล่าสกุล สาหร่ายที่เป็นสกุล Phaeodactylum และสาหร่าย
10 ที่เป็นสกุล Nannochloropsis เป็นที่นิยมและสาหร่ายที่เป็น
สกุล Nannochloropsis เป็นที่นิยมมากขึ้น ตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงของสาหร่าย
ที่อยู่ในสกุล Nannochloropsis รวม Nannochloropsis oculata,
Nannochloropsis gaditana, Nannochloropsis ซาลินา Nannochloropsis oceanica,
Nannochloropsis Atomus, Nannochloropsis maculata, Nannochloropsis granulata 15 และ Nannochloropsis SP ในหมู่พวกเขาจากมุมมองของผลผลิตของ
ไขมัน Nannochloropsis oculata หรือ Nannochloropsis gaditana เป็นที่นิยมและ
Nannochloropsis oculata เป็นที่นิยมมากขึ้น.
ในฐานะที่เป็นพืชสำหรับเซลล์โฮสต์จากมุมมองของไขมันของ
เมล็ดพืช Arabidopsis thaliana เรพซีด, Cocos nucifera ปาล์ม cuphea 20 และสบู่ดำเป็นที่นิยมและ Arabidopsis thaliana เป็นที่นิยมมากขึ้น.
{0034}
เวกเตอร์สำหรับใช้เป็นเวกเตอร์การแสดงออกอาจจะเป็นเวกเตอร์ใด ๆ ที่มีความสามารถใน
การแนะนำเอซิล -ACP thioesterase ยีนในปัจจุบัน สิ่งประดิษฐ์เข้าสู่โฮสต์
เซลล์และการแสดงของยีนในเซลล์โฮสต์ ตัวอย่างเช่นเวกเตอร์ที่มีภูมิภาค 25 การควบคุมการแสดงออกเช่นโปรโมเตอร์และเทอร์มิสอดคล้อง
กับชนิดของเซลล์โฮสต์ที่จะใช้และมีจุดเริ่มต้นการทำแบบจำลอง,
เครื่องหมายเลือกหรือชอบสามารถนำมาใช้ นอกจากเวกเตอร์ก็อาจจะเป็น
เวกเตอร์ความสามารถในการแพร่กระจายตัวเองและการจำลองตัวเองนอกโครโมโซม
เช่นพลาสมิดหรืออาจจะเป็นเวกเตอร์ที่รวมอยู่ในโครโมโซม.
เฉพาะตัวอย่างของเวกเตอร์รวมถึงในกรณีที่ ของการใช้
จุลินทรีย์ที่เป็นเซลล์โฮสต์ pBluescript ครั้งที่สองเอสเค (-) (ผลิตโดย Stratagene 5 คอร์ป), เวกเตอร์ PUC-based (ผลิตโดย Takara Shuzo จำกัด ) ซึ่งเป็นสัตว์เลี้ยง
ตามเวกเตอร์ (ผลิตโดย Takara Bio , Inc), เวกเตอร์ pGEX-based
(ผลิตโดย GE Healthcare, Inc), เวกเตอร์ pCold-based (ผลิตโดย
Takara Bio, Inc), pHY300PLK (ผลิตโดย Takara Bio, Inc), pUB110
(Mckenzie, T. et al, (1986), พลาสมิด 15 (2). พี. 93-103) pBR322 (10 ผลิตโดย Takara Bio, Inc), pRS403 (ผลิตโดย Stratagene คอร์ป) และ
pMW218 / 219 (ผลิต โดยยีนนิปปอน จำกัด ) โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีของการใช้เชื้อ Escherichia coli เป็นเซลล์โฮสต์, SK II pBluescript (-) หรือ
. pMW218 / 219 ถูกนำมาใช้โดยเฉพาะอย่างยิ่ง
เมื่อสาหร่ายถูกใช้เป็นเซลล์โฮสต์ตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงของเวกเตอร์
15 รวม P66 (Chlamydomonas ศูนย์) , P-322 (Chlamydomonas ศูนย์) pPha-
T1 (ดูไม่สิทธิบัตร 2 วรรณกรรมอธิบายไว้ข้างต้น) และ pJET1 (ผลิตโดย
COSMO BIO co., ltd.) โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีของการใช้สาหร่ายที่อยู่ใน
สกุล Nannochloropsis เป็นเซลล์โฮสต์, PPHA-T1 หรือ pJET1 ถูกนำมาใช้โดยเฉพาะอย่างยิ่ง.
นอกจากนี้เมื่อเซลล์โฮสต์เป็นสาหร่ายที่เป็นสกุล
20 Nannochloropsis เซลล์โฮสต์สามารถ เปลี่ยนด้วยหมายถึงวิธีการที่
อธิบายไว้ในวรรณกรรมโอลิเวอร์ Kilian, et al, การดำเนินการของชาติ.
Academy of Sciences ของสหรัฐอเมริกา ธ.ค. 27 108 (52) 2011 โดย
ใช้ชิ้นดีเอ็นเอประกอบด้วยยีนของสิ่งประดิษฐ์ในปัจจุบัน
โปรโมเตอร์และเทอร์มิ ตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงของชิ้นดีเอ็นเอนี้ ได้แก่ ชิ้นดีเอ็นเอ PCR-25 ขยายและชิ้นดีเอ็นเอเอนไซม์ตัดข้อ จำกัด .
ในกรณีที่ใช้เซลล์พืชเป็นเซลล์โฮสต์ตัวอย่างของเวกเตอร์รวมเวกเตอร์ PRI-based (ผลิตโดย Takara ไบโอ, Inc), เวกเตอร์ pBI-based (ผลิตโดย Clontech Laboratories, Inc) และเวกเตอร์ 1N3-based
(ผลิตโดยนวัตกรรม lnplanta, Inc) โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีของการใช้
Arabidopsis thaliana เซลล์โฮสต์ PRI เวกเตอร์หรือเวกเตอร์ pBI ตามถูกนำมาใช้โดยเฉพาะอย่างยิ่ง.
ภูมิภาคการควบคุมการแสดงออกเช่นโปรโมเตอร์และเทอร์มิ,
และเครื่องหมายเลือกไม่ได้ จำกัด เฉพาะอย่างยิ่ง และ CaO เหมาะสมจะ
เลือกจากโปรโมเตอร์ปกติใช้เครื่องหมายและชอบให้สอดคล้องกับชนิดของเซลล์โฮสต์ที่จะใช้.
เฉพาะตัวอย่างของการก่อการรวมถึงการก่อการครั่งก่อการ TRP, แทค 10 ก่อการก่อการ TRC โปรโมเตอร์ T7 ก่อการ SpoVG ไวรัสโมเสกกะหล่ำ
ก่อการ 35S RNA ก่อการยีนดูแลทำความสะอาดเช่น tubulin, โปรตีนและ
ubiquitin เรพซีดมา Napin ก่อการยีนมาโรงงาน Rubisco
ก่อการและผู้ก่อการ violaxanthin / (คลอโรฟิล) - มีผลผูกพันยีนโปรตีน
ที่ได้จากพืชและสัตว์ Nannochloropsis.
15 ตัวอย่างของเครื่องหมายเลือก ได้แก่ ยีนต้านทานยาเสพติดเช่น
ยีนต้านทานยาปฏิชีวนะ (เช่นยีนต้านทาน ampicillin ยีนต้านทาน chloramphenicol, ยีนต้านทาน erythromycin, ยีนต้านทาน neomycin, ยีนต้านทาน kanamycin , ยีนต้านทาน spectinomycin, tetracycline
ยีนต้านทานยีนต้านทาน blasticidin S ยีนต้านทาน bialaphos, ยีนต้านทาน 20 zeocin, ยีนต้านทาน paromomycin และไฮโกรไม
ยีนต้านทาน) นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่จะใช้การลบ auxotrophy-
ยีนที่เกี่ยวข้องหรือเหมือนเป็นเครื่องหมายการเลือก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์โฮสต์ที่ใช้สำหรับการถ่ายยีนจะไม่ จำกัด และ
ตัวอย่างของเซลล์โฮสต์ ได้แก่ จุลินทรีย์ พืช หรือสัตว์ ใน
สิ่งประดิษฐ์ปัจจุบันจุลินทรีย์รวม Server ระหว่างนี้
จุลินทรีย์และพืชที่เป็นที่นิยม และจุลินทรีย์มากขึ้น
กว่า จากมุมมองของประสิทธิภาพการผลิตและการใช้งานของลิปิด
เป็นจุลินทรีย์ สำหรับโฮสต์เซลล์โพรคาริโ และยูแคริโอตสามารถ
ใช้ . โปรคาริโอทส์ ประกอบด้วยจุลินทรีย์ที่เป็นของสกุล
Escherichia หรือจุลินทรีย์ซึ่งอยู่ในจีนัส Bacillus . ยูแคริโอต
รวมยีสต์ หรือเป็นเชื้อรา ในหมู่พวกเขาจากมุมมองของ
ผลผลิตของไขมัน , Escherichia coli , Bacillus subtilis , toruloides rhodosporidium ,5 mortierella sp . ที่เป็นที่นิยมและ Escherichia coli ที่เป็นที่นิยมมากขึ้น
เป็นจุลินทรีย์สำหรับโฮสต์เซลล์จุลสาหร่ายยังเป็นที่นิยม .
เป็นสาหร่าย จากมุมมองของการใช้ยีนการ
, สาหร่ายเป็นของสกุลคลาไมโดโมแนส สาหร่ายเป็นของ
สกุล สาหร่าย สาหร่ายเป็นพืช phaeodactylum
และสาหร่าย10 เป็นของสกุล nannochloropsis เป็นที่นิยม และสาหร่ายที่เป็นของ
สกุล nannochloropsis เป็นที่นิยมมากขึ้น เฉพาะเจาะจงตัวอย่างสาหร่าย
เป็นของสกุล nannochloropsis รวม nannochloropsis oculata
nannochloropsis gaditana nannochloropsis ซาลินา , , ,
nannochloropsis OCEANICA nannochloropsis , atomus nannochloropsis maculata nannochloropsis granulata , , ,15 nannochloropsis sp . และในหมู่พวกเขาจากมุมมองของการผลิตของ
ไขมัน nannochloropsis oculata หรือ nannochloropsis gaditana เป็นที่นิยมและ

nannochloropsis oculata เป็นที่นิยมมากขึ้น เป็นพืชเซลล์โฮสต์จากมุมมองของปริมาณไขมันของ
พันธุ์ Arabidopsis thaliana , rapeseed , มะพร้าว , ปาล์ม , cuphea และ 20 curcas สบู่ดำมีกว่าArabidopsis thaliana และเป็นที่นิยมมากขึ้น
{ }
หยุดเวกเตอร์สำหรับใช้เป็นนิพจน์เวกเตอร์เวกเตอร์อาจใด ๆสามารถ
แนะนำเอซิล - ACP thioesterase ยีนของปัจจุบันการประดิษฐ์เป็นเจ้าภาพ
เซลล์และการแสดงออกของยีนในเซลล์โฮสต์ ตัวอย่างเช่น นิพจน์เวกเตอร์ที่มี 25 ระเบียบภูมิภาคเช่น promoter และ Terminator ตาม
กับชนิดของเซลล์โฮสต์ที่จะใช้และมีการเริ่มต้นจุด เครื่องหมาย
เลือกหรือชอบ , สามารถใช้ นอกจากนี้ ยังอาจ
เวกเตอร์เวกเตอร์สามารถของตนเองและการแนะนำตนเองนอกโครโมโซม
เช่นพลาสมิด หรืออาจเป็นเวกเตอร์ซึ่งรวมอยู่ในโครโมโซม
ตัวอย่างเฉพาะของเวกเตอร์รวมในกรณีของการใช้
จุลินทรีย์เป็นเซลล์เจ้าบ้าน SK II ) ( - ) ( ผลิตโดย stratagene 5 คอร์ป ) , เวกเตอร์โภคพื้นฐาน ( ผลิตโดย Takara ชูโซะ จำกัด ) , สัตว์เลี้ยง -
แบบเวกเตอร์ ( ผลิตโดย Takara ชีวภาพ , Inc . ) , pgex เวกเตอร์
ตาม ( ผลิตโดยจี การดูแลสุขภาพ , Inc . ) , เวกเตอร์ pcold ตาม ( ผลิตโดย
ทาคาระไบโอ , Inc . ) phy300plk ( ผลิตโดย Takara ชีวภาพ , Inc . )pub110
( McKenzie , T . et al . ( 1986 ) , 15 สายพันธุ์ ( 2 ) ; P 93-103 ) pbr322 ( ผลิตโดย Takara ไบโอ 10 , Inc . ) prs403 ( ผลิตโดย stratagene Corp . ) และ
pmw218 / 219 ( ผลิตโดย NIPPON ยีน Co . , Ltd . ) โดยเฉพาะในกรณีของการใช้เป็นเซลล์เจ้าบ้าน Escherichia coli , SK II ) ( - ) หรือ
pmw218 / 219 เป็นกุญแจใช้ .
เมื่อสาหร่ายถูกใช้เป็นเซลล์เจ้าบ้านเฉพาะเจาะจงตัวอย่างเวกเตอร์
15 รวม p66 ( คลาไมโดโมแนส ( กลาง ) p-322 คลาไมโดโมแนสกลาง ) ppha -
T1 ( เห็นไม่มีสิทธิบัตรวรรณกรรม 2 อธิบายไว้ข้างต้น ) และ pjet1 ( ผลิตโดย
- ไบโอจำกัด โดยเฉพาะในกรณีของการใช้สาหร่ายเป็นของ
สกุล nannochloropsis เป็นเซลล์เจ้าบ้าน ppha-t1 หรือ pjet1 เป็นกุญแจที่ใช้
นอกจากนี้เมื่อเซลล์โฮสต์เป็นสาหร่ายที่อยู่ในจีนัส
20 nannochloropsis , โฮสต์เซลล์สามารถเปลี่ยนกับหมายถึงวิธี
อธิบายไว้ในวรรณกรรม โอลิเวอร์ เลี่ยน , et al . , การดําเนินการของสถาบันการศึกษาแห่งชาติ
วิทยาศาสตร์ของสหรัฐอเมริกา , 27 ธ.ค. ; 108 ( 52 ) , 2011 โดย
โดยใช้ดีเอ็นเอที่ประกอบด้วยยีนของการประดิษฐ์ในปัจจุบันเป็น
โปรโมเตอร์และคนเหล็ก เฉพาะเจาะจงตัวอย่างดีเอ็นเอนี้รวม 25 เพิ่มขยายดีเอ็นเอและเอนไซม์ตัดจำเพาะ DNA .
ในกรณีของการใช้พืชเซลล์เป็นเซลล์เจ้าบ้าน ตัวอย่างของเวกเตอร์เวกเตอร์องค์รวมตาม ( ผลิตโดย Takara ชีวภาพ , Inc . ) , เวกเตอร์ pbi ตาม ( ผลิตโดยห้องปฏิบัติการ , clontech Inc ) , และ 1n3 เวกเตอร์
ตาม( ผลิตโดย lnplanta นวัตกรรม , Inc . ) โดยเฉพาะในกรณีของการใช้
Arabidopsis thaliana เป็นเซลล์โฮสต์ , PRI ตามเวกเตอร์หรือเวกเตอร์ตาม pbi เป็นกุญแจที่ใช้ การควบคุมการแสดงออก
ภูมิภาค เช่น โปรโมเตอร์และ Terminator
, และเลือกเครื่องหมายจะไม่ จำกัด และกาว สามารถเลือกใช้
โดยปกติโปรเครื่องหมาย และชอบตามชนิดของเซลล์โฮสต์จะใช้ ตัวอย่างเฉพาะของโปรโมเตอร์
รวมครั่ง promoter , โปรโมเตอร์ TRP และ 10 โปรโมเตอร์ , โปรโมเตอร์ศจย . * * 3 โปรโมเตอร์ , โปรโมเตอร์ spovg กะหล่ำดอกฝังไวรัส
35s RNA โปรโมเตอร์ยีนโปรโมเตอร์สำหรับแม่บ้าน เช่น ทิวบูลิน actin และ
, ข้างนอก , rapeseed ได้มาบ้านนาพินยีนส่งเสริม พืชได้รับการ rubisco
,และโปรโมเตอร์ของไวโอลาแซนทิน ( คลอโรฟิลล์ ) โปรตีนที่ได้มาจากพืช nannochloropsis ยีน
.
15 ตัวอย่างของการทำเครื่องหมายที่มียีนต้านทานยา เช่น ยีนต้านทานยาปฏิชีวนะ ( เช่น
เป็นแอมพิซิลลินต้านทานยีน , ยีน chloramphenicol ทน , erythromycin ต้านทานยีน , ยีน kanamycin มีเดียวิกิต้านทาน , ต่อต้านยีนเป็นสเปกติโนมัยซินต้านทานยีน , ยีนต้านทาน tetracycline
, s blasticidin ต้านทานยีน ยีนต้านทานไบลาฟอส , 20 zeocin ต้านทานยีน , ยีนต้านทานพาโรโมไมซิน และยีนต้านยา hygromycin
ต้านทานยีน ) นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่จะใช้ลบของ auxotrophy -
ที่เกี่ยวข้องกับยีน หรือเหมือนการทำเครื่องหมาย .