2. Materials and methods2.1. Sample

2. Materials and methods
2.1. Samples and investigation process
P. monodon postlarvae (PL) and juveniles were obtained from
hatcheries and commercial ponds experiencing MSGS in Thailand.
The age and size of the juveniles varied from one to four months in
culture and from 1 to 10 g body weight (BW). The PLs were mostly
PL15 stage, with an approximate BW of 0.1 g. The hepatopancreas
was dissected out and portions were smeared onto glass microscope
slides and stained with haematoxylin and eosin (H&E). Other
hepatopancreatic tissue specimens fixed, embedded, sectioned and
stained for light (LM) and transmission electron (TEM) microscopy.
Samples from individuals positively diagnosed with microsporidian
infections via smears or histology were processed for ultrastructural
investigation. The size of the microsporidian spores was
determined from fresh spores prepared by differential centrifugation
of homogenized, infected hepatopancreatic tissue ending with
Percoll (GE Life Sciences) density gradient centrifugation. The
spore band was removed from the gradient and examined directly
in wet mounts. For LM and TEM, 10 juveniles and 10 PL15 were
sampled. For molecular biology, DNA was extracted from more
than 1000 juveniles and 10,000 PL15.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. ตัวอย่าง และกระบวนการตรวจสอบลูกกุ้ง P. monodon (PL) และสัตว์ได้รับจากhatcheries และพาณิชย์บ่อพบ MSGS ในประเทศไทยอายุและขนาดของสัตว์แตกต่างกันจากหนึ่งในสี่เดือนวัฒนธรรมและ จาก 1 ไป 10 กรัมน้ำหนัก (BW) PLs การทาสีระยะ PL15 กับ BW ประมาณ 0.1 กรัม การ hepatopancreasถูก dissected ออก และบางส่วนถูกป้ายลงบนกระจกกล้องจุลทรรศน์สไลด์ และย้อมสี haematoxylin และ eosin (H & E) อื่น ๆhepatopancreatic เนื้อเยื่ออย่างถาวร ฝัง จัดแบ่งเป็นส่วน ๆ และสีแสง (LM) และส่งผ่าน (TEM) อิเล็กตรอนตัวอย่างจากบุคคลที่วินิจฉัยบวกกับ microsporidianติดเชื้อผ่านทาง smears หรือมิญชวิทยาถูกประมวลผลสำหรับการศึกษาลักษณะชนิดตรวจสอบ ขนาดของรา microsporidianกำหนดจากราสดโดยหมุนเหวี่ยงแตกต่างเนื้อเยื่อ hepatopancreatic homogenized ติดไวรัสที่ลงท้ายด้วยPercoll (GE ชีวิตวิทยาศาสตร์) หมุนไล่ระดับความหนาแน่น การวงสปอร์ออกจากไล่ระดับสี และตรวจสอบโดยตรงในตัวเปียก สำหรับ LM และ TEM สัตว์ 10 และ 10 PL15 ได้ตัวอย่าง สำหรับอณูชีววิทยา ดีเอ็นเอแยกจากเพิ่มเติมกว่าสัตว์ 1000 และ 10000 PL15

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ตัวอย่างและขั้นตอนการสอบสวน
พี กุลาดำระยะโพสท์ลาวา (PL) และเยาวชนที่ได้รับจาก
โรงเพาะฟักและบ่อเชิงพาณิชย์ประสบ msgs ในประเทศไทย.
อายุและขนาดของหนุ่มสาวที่แตกต่างกัน 1-4 เดือนใน
วัฒนธรรมและตั้งแต่ 1 ถึงน้ำหนักตัว 10 กรัม (BW) PLs ส่วนใหญ่เป็น
เวที PL15 มีประมาณ BW 0.1 กรัม ตับ
ถูกผ่าออกและบางส่วนถูกป้ายบนกระจกกล้องจุลทรรศน์
ภาพนิ่งและย้อมด้วยสี haematoxylin และ Eosin (H & E) อื่น ๆ
ตัวอย่างเนื้อเยื่อ Hepatopancreatic คงฝังตัวตัดและ
ย้อมสีแสง (LM) และการส่งผ่านอิเล็กตรอน (TEM) กล้องจุลทรรศน์.
ตัวอย่างจากบุคคลที่ได้รับการวินิจฉัยเชิงบวกกับ microsporidian
การติดเชื้อผ่านทางรอยเปื้อนหรือจุลถูกประมวลผลสำหรับ ultrastructural
สอบสวน ขนาดของสปอร์ microsporidian ถูก
กำหนดจากสปอร์สดจัดทำโดยการหมุนเหวี่ยงค่า
ของหดหายติดเชื้อเนื้อเยื่อ Hepatopancreatic ลงท้ายด้วย
Percoll (GE Life Sciences) ความหนาแน่นของการไล่ระดับสีหมุนเหวี่ยง
วงสปอร์จะถูกลบออกจากการไล่ระดับสีและตรวจสอบโดยตรง
ในเมาท์เปียก สำหรับ LM และ TEM 10 หนุ่มสาวและ 10 PL15 ถูก
เก็บตัวอย่าง ชีววิทยาโมเลกุลดีเอ็นเอถูกสกัดจาก
มากกว่า 1000 หนุ่มสาวและ 10,000 PL15

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . ตัวอย่างและตรวจสอบกระบวนการกุ้งกุลาดำ กุ้งกุลาดำ ( PL ) และเยาวชนที่ได้รับจากโรงเพาะฟักและเลี้ยงเชิงพาณิชย์ที่ประสบ msgs ในประเทศไทยอายุและขนาดของเด็กและเยาวชนที่หลากหลายจากหนึ่งถึงสี่เดือนวัฒนธรรมและจาก 1 ถึง 10 กรัมต่อน้ำหนักตัว ( BW ) pls ส่วนใหญ่เวที pl15 ที่มีน้ำหนักตัวประมาณ 0.1 กรัมตับคือผ่าออก และบางส่วนถูกละเลงลงบนกระจก ด้วยกล้องจุลทรรศน์สไลด์และย้อมสีด้วยฮีมาท๊อกซีลินและ eosin ( H & E ) อื่น ๆhepatopancreatic เนื้อเยื่อตัวอย่างถาวร ฝังตัวและคุณสมบัติย้อมแสง ( LM ) และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( TEM ) .ตัวอย่างจากบุคคลที่มีการวินิจฉัย ด้วยไมโครสปอริเดียนเชื้อผ่านละเลงหรือเนื้อเยื่อถูกแปรรูปเพื่อการการสืบสวน ขนาดของไมโครสปอริเดียนสปอร์ คือพิจารณาจากค่าสปอร์เตรียมปั่นสดของโฮโมติดเชื้อ hepatopancreatic เนื้อเยื่อที่ลงท้ายด้วยpercoll ( ชีวิต GE วิทยาศาสตร์ ) ความหนาแน่นของการปั่นเหวี่ยง ที่กลุ่มสปอร์จะถูกลบออกจากการไล่ระดับสีและตรวจสอบโดยตรงในเดือนเปียก และสำหรับผมเต็ม 10 และ 10 pl15 คือการเก็บข้อมูล ชีววิทยาระดับโมเลกุลดีเอ็นเอจากเพิ่มเติมกว่า 1 , 000 , 000 pl15 เยาวชนและ .