- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
2. Materials and methods2.1. Microo
2. Materials and methods
2.1. Microorganism and growth conditions
The strain of the pathogen used in this study was S. reilianum
isolated from teliospores obtained from corn crops in the state of
Hidalgo, central Mexico, in 2008.
The fungal strain was grown in Petri dishes containing potato
dextrose agar medium (PDA Difco™) and YEPD solid medium (1%
yeast extract, 2% peptone, 2% dextrose, and 2% agar). The plates
were maintained at 28 C for 8 days. The fungus was stored in
tubes with PDA and mineral oil at ambient temperature.
B. subtilis strain isolate numbers 13, 35, 55, 135 and 160 were
isolated from soil samples taken from cornfields in Hidalgo, Mexico,
where the disease is present. The isolation and identification
of these strains is described in a study reported previously by
Petatán-Sagahón et al. (2011).
The following media were used to grow the bacterial strains:
potato dextrose agar medium (PDA Difco™), and potato dextrose
broth medium (PDB), which were obtained by boiling 240 g of
potato in 1 L of water for 20 min and then filtering, before supplementing
this infusion with 2% glucose. The solid media were incubated
at 28 C and the liquid medium was incubated in a rotary
shaker at 200 rpm and 28 C. Each strain was then stored in 25%
glycerol at 80 C.
2.2. Selection of B. subtilis strains with anti-fungal activity
The B. subtilis strains were tested in vitro for antifungal activity
as follows: plates of YEPD were inoculated onto the surface with
3 mL of a diluted YEPD overlay (0.5% yeast extract, 1% peptone,
1% dextrose, and 0.6% agar) containing 0.1 mL of S. reilianum, and
cultivated for 18 h at 28 C and 180 rpm. Then B. subtilis was sown
with a sterile stick. The plates were incubated at 28 C for 72 h and
observed every 12 h. The B. subtilis strains that showed the capacity
to inhibit proliferation of the fungus were selected.
2.3. Antifungal activity of extracellular fractions from cultures of
B. subtilis
To obtain extracellular filtrates with antifungal activity, 500 mL
of PDB were inoculated to obtain an absorbance of 0.2 at 600 nm
with an overnight culture of each strain in PDB, and then incubated
at 28 C and 180 rpm. Samples of 5 mL were taken at 12, 24 and
60 h, which corresponds to the logarithmic, stationary, and late
stationary phases of growth of each strain, and were centrifuged
at 8000 rpm. The supernatants (extracellular fraction) were sterilized
in an autoclave. Then 200 ll was added to small bottomless
tubes placed on the surface overlaid with S. reilianum, and inoculated
in YEPD plates as described above. The plates were incubated
at 28 C for 120 h and observed every 12 h. The filtrates with antifungal
activity were those that inhibited the development of the
fungus. In this case, inhibition halos were observed, which were
measured in mm. For the control, 200 ll of PDB medium ware
added.
2.4. Field test
The application of B. subtilis was conducted in the first week of
May 2010 and the last week of April in 2012 near Mixquiahuala
Hidalgo, Mexico, where a history of corn smut exists. The commercial
corn hybrid AS150, known to be susceptible to head smut treated
with the insecticide Poncho 600 FS (clothianidin), was used
for the test.
Seed treatment was done using a suspension of B. subtilis (strain
160) at 1 108 cells/mL, obtained from a 60 h PDB culture by infiltration
into the seeds using a vacuum. The control seeds were infiltrated
with an equal volume of PDB without the bacteria, diluted in
water at the same proportion as the suspension of B. subtilis. The
sensitivity of B. subtilis to the insecticide Poncho 600 FS was
tested as follows: 5 seeds treated with insecticide and B. subtilis
were sown in plates with PDA and incubated at 28 C for 48 h.
Development of the bacteria was observed.
The evaluation was carried out on experimental plots. A completely
randomized design was used that involved 6 repetitions
containing 4 furrows 5 m in length with 80 cm of separation
between each one; the experiments were established randomly.
Two seeds were sown at a separation of 17.5 cm, such that 58 were
2.1. Microorganism and growth conditions
The strain of the pathogen used in this study was S. reilianum
isolated from teliospores obtained from corn crops in the state of
Hidalgo, central Mexico, in 2008.
The fungal strain was grown in Petri dishes containing potato
dextrose agar medium (PDA Difco™) and YEPD solid medium (1%
yeast extract, 2% peptone, 2% dextrose, and 2% agar). The plates
were maintained at 28 C for 8 days. The fungus was stored in
tubes with PDA and mineral oil at ambient temperature.
B. subtilis strain isolate numbers 13, 35, 55, 135 and 160 were
isolated from soil samples taken from cornfields in Hidalgo, Mexico,
where the disease is present. The isolation and identification
of these strains is described in a study reported previously by
Petatán-Sagahón et al. (2011).
The following media were used to grow the bacterial strains:
potato dextrose agar medium (PDA Difco™), and potato dextrose
broth medium (PDB), which were obtained by boiling 240 g of
potato in 1 L of water for 20 min and then filtering, before supplementing
this infusion with 2% glucose. The solid media were incubated
at 28 C and the liquid medium was incubated in a rotary
shaker at 200 rpm and 28 C. Each strain was then stored in 25%
glycerol at 80 C.
2.2. Selection of B. subtilis strains with anti-fungal activity
The B. subtilis strains were tested in vitro for antifungal activity
as follows: plates of YEPD were inoculated onto the surface with
3 mL of a diluted YEPD overlay (0.5% yeast extract, 1% peptone,
1% dextrose, and 0.6% agar) containing 0.1 mL of S. reilianum, and
cultivated for 18 h at 28 C and 180 rpm. Then B. subtilis was sown
with a sterile stick. The plates were incubated at 28 C for 72 h and
observed every 12 h. The B. subtilis strains that showed the capacity
to inhibit proliferation of the fungus were selected.
2.3. Antifungal activity of extracellular fractions from cultures of
B. subtilis
To obtain extracellular filtrates with antifungal activity, 500 mL
of PDB were inoculated to obtain an absorbance of 0.2 at 600 nm
with an overnight culture of each strain in PDB, and then incubated
at 28 C and 180 rpm. Samples of 5 mL were taken at 12, 24 and
60 h, which corresponds to the logarithmic, stationary, and late
stationary phases of growth of each strain, and were centrifuged
at 8000 rpm. The supernatants (extracellular fraction) were sterilized
in an autoclave. Then 200 ll was added to small bottomless
tubes placed on the surface overlaid with S. reilianum, and inoculated
in YEPD plates as described above. The plates were incubated
at 28 C for 120 h and observed every 12 h. The filtrates with antifungal
activity were those that inhibited the development of the
fungus. In this case, inhibition halos were observed, which were
measured in mm. For the control, 200 ll of PDB medium ware
added.
2.4. Field test
The application of B. subtilis was conducted in the first week of
May 2010 and the last week of April in 2012 near Mixquiahuala
Hidalgo, Mexico, where a history of corn smut exists. The commercial
corn hybrid AS150, known to be susceptible to head smut treated
with the insecticide Poncho 600 FS (clothianidin), was used
for the test.
Seed treatment was done using a suspension of B. subtilis (strain
160) at 1 108 cells/mL, obtained from a 60 h PDB culture by infiltration
into the seeds using a vacuum. The control seeds were infiltrated
with an equal volume of PDB without the bacteria, diluted in
water at the same proportion as the suspension of B. subtilis. The
sensitivity of B. subtilis to the insecticide Poncho 600 FS was
tested as follows: 5 seeds treated with insecticide and B. subtilis
were sown in plates with PDA and incubated at 28 C for 48 h.
Development of the bacteria was observed.
The evaluation was carried out on experimental plots. A completely
randomized design was used that involved 6 repetitions
containing 4 furrows 5 m in length with 80 cm of separation
between each one; the experiments were established randomly.
Two seeds were sown at a separation of 17.5 cm, such that 58 were
0/5000
2. Materials and methods2.1. Microorganism and growth conditionsThe strain of the pathogen used in this study was S. reilianumisolated from teliospores obtained from corn crops in the state ofHidalgo, central Mexico, in 2008.The fungal strain was grown in Petri dishes containing potatodextrose agar medium (PDA Difco™) and YEPD solid medium (1%yeast extract, 2% peptone, 2% dextrose, and 2% agar). The plateswere maintained at 28 C for 8 days. The fungus was stored intubes with PDA and mineral oil at ambient temperature.B. subtilis strain isolate numbers 13, 35, 55, 135 and 160 wereisolated from soil samples taken from cornfields in Hidalgo, Mexico,where the disease is present. The isolation and identificationof these strains is described in a study reported previously byPetatán-Sagahón et al. (2011).The following media were used to grow the bacterial strains:potato dextrose agar medium (PDA Difco™), and potato dextrosebroth medium (PDB), which were obtained by boiling 240 g ofpotato in 1 L of water for 20 min and then filtering, before supplementingthis infusion with 2% glucose. The solid media were incubatedat 28 C and the liquid medium was incubated in a rotaryshaker at 200 rpm and 28 C. Each strain was then stored in 25%glycerol at 80 C.2.2. Selection of B. subtilis strains with anti-fungal activityThe B. subtilis strains were tested in vitro for antifungal activityas follows: plates of YEPD were inoculated onto the surface with3 mL of a diluted YEPD overlay (0.5% yeast extract, 1% peptone,1% dextrose, and 0.6% agar) containing 0.1 mL of S. reilianum, andcultivated for 18 h at 28 C and 180 rpm. Then B. subtilis was sownwith a sterile stick. The plates were incubated at 28 C for 72 h andobserved every 12 h. The B. subtilis strains that showed the capacityto inhibit proliferation of the fungus were selected.2.3. Antifungal activity of extracellular fractions from cultures ofB. subtilisTo obtain extracellular filtrates with antifungal activity, 500 mLof PDB were inoculated to obtain an absorbance of 0.2 at 600 nmwith an overnight culture of each strain in PDB, and then incubatedat 28 C and 180 rpm. Samples of 5 mL were taken at 12, 24 and60 h, which corresponds to the logarithmic, stationary, and latestationary phases of growth of each strain, and were centrifugedat 8000 rpm. The supernatants (extracellular fraction) were sterilizedin an autoclave. Then 200 ll was added to small bottomlesstubes placed on the surface overlaid with S. reilianum, and inoculatedin YEPD plates as described above. The plates were incubatedat 28 C for 120 h and observed every 12 h. The filtrates with antifungalactivity were those that inhibited the development of thefungus. In this case, inhibition halos were observed, which weremeasured in mm. For the control, 200 ll of PDB medium wareadded.
2.4. Field test
The application of B. subtilis was conducted in the first week of
May 2010 and the last week of April in 2012 near Mixquiahuala
Hidalgo, Mexico, where a history of corn smut exists. The commercial
corn hybrid AS150, known to be susceptible to head smut treated
with the insecticide Poncho 600 FS (clothianidin), was used
for the test.
Seed treatment was done using a suspension of B. subtilis (strain
160) at 1 108 cells/mL, obtained from a 60 h PDB culture by infiltration
into the seeds using a vacuum. The control seeds were infiltrated
with an equal volume of PDB without the bacteria, diluted in
water at the same proportion as the suspension of B. subtilis. The
sensitivity of B. subtilis to the insecticide Poncho 600 FS was
tested as follows: 5 seeds treated with insecticide and B. subtilis
were sown in plates with PDA and incubated at 28 C for 48 h.
Development of the bacteria was observed.
The evaluation was carried out on experimental plots. A completely
randomized design was used that involved 6 repetitions
containing 4 furrows 5 m in length with 80 cm of separation
between each one; the experiments were established randomly.
Two seeds were sown at a separation of 17.5 cm, such that 58 were
2.4. Field test
The application of B. subtilis was conducted in the first week of
May 2010 and the last week of April in 2012 near Mixquiahuala
Hidalgo, Mexico, where a history of corn smut exists. The commercial
corn hybrid AS150, known to be susceptible to head smut treated
with the insecticide Poncho 600 FS (clothianidin), was used
for the test.
Seed treatment was done using a suspension of B. subtilis (strain
160) at 1 108 cells/mL, obtained from a 60 h PDB culture by infiltration
into the seeds using a vacuum. The control seeds were infiltrated
with an equal volume of PDB without the bacteria, diluted in
water at the same proportion as the suspension of B. subtilis. The
sensitivity of B. subtilis to the insecticide Poncho 600 FS was
tested as follows: 5 seeds treated with insecticide and B. subtilis
were sown in plates with PDA and incubated at 28 C for 48 h.
Development of the bacteria was observed.
The evaluation was carried out on experimental plots. A completely
randomized design was used that involved 6 repetitions
containing 4 furrows 5 m in length with 80 cm of separation
between each one; the experiments were established randomly.
Two seeds were sown at a separation of 17.5 cm, such that 58 were
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . จุลินทรีย์และสภาวะการเจริญเติบโต
สายพันธุ์ของเชื้อที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ เอส reilianum
ที่แยกได้จาก teliospores ที่ได้จากข้าวโพดพืชในรัฐ
Hidalgo , กลางเม็กซิโก ใน 2008 .
สายพันธุ์เชื้อราโตในจานเลี้ยงเชื้อที่มีมันฝรั่ง
Dextrose Agar ( PDA ) difco ™ ) และอาหารเลี้ยงเชื้อแข็งปานกลาง ( 1 %
% extract สารสกัดจากยีสต์ , 2 2 % dextrose ,และ 2 % Agar ) จาน
ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 28 C เป็นเวลา 8 วัน เชื้อราที่ถูกเก็บไว้ในหลอดด้วย
PDA และน้ำมันแร่ที่อุณหภูมิห้อง .
B . subtilis สายพันธุ์แยกหมายเลข 13 , 35 , 55 , 135 และ 160 ) ที่แยกได้จากตัวอย่างดิน
ถ่ายจากไร่ข้าวโพดใน Hidalgo , เม็กซิโก ,
ที่โรคที่เป็นปัจจุบัน การแยกและจำแนก
สายพันธุ์ที่อธิบายไว้ในการศึกษานี้รายงานก่อนหน้านี้โดย
petat . kgm n-sagah เลออง et al . ( 2011 )
สื่อต่อไปนี้ที่ใช้ปลูกสายพันธุ์แบคทีเรีย :
อาหาร Potato Dextrose Agar ( PDA ) difco ™ ) และอาหาร potato dextrose broth medium
( PDB ) ซึ่งได้จากการต้ม 240 กรัมในน้ำ 1 ลิตร
มันฝรั่งสำหรับ 20 นาทีแล้วกรองก่อนเสริม
แช่นี้ กลูโคส 2 %สื่อที่เป็นของแข็งถูกบ่ม
ที่ 28 C และอาหารเหลวถูกบ่มในเครื่องปั่นหมุน
ที่ 200 รอบต่อนาทีและ 28 C แต่ละสายพันธุ์ก็เก็บไว้ใน 25 %
กลีเซอรอลที่ 80 C .
2.2 . เลือก B . subtilis สายพันธุ์ที่มีกิจกรรมต่อต้านเชื้อรา
B . subtilis สายพันธุ์มาทดสอบในหลอดทดลองเพื่อป้องกันเชื้อราสำหรับกิจกรรม
ดังนี้ จานอาหารเลี้ยงเชื้อปลูกเชื้อลงบนพื้นผิวด้วย
3 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อซ้อนทับเจือจาง ( 0.5% 1% extract สารสกัดจากยีสต์ , ,
1 % dextrose และ 0.6% วุ้น ) ที่มีสหรัฐอเมริกา reilianum 0.1 มิลลิลิตร และปลูก 18 H
ที่ 28 C 180 รอบ / นาที แล้ว B . subtilis หว่าน
กับติดเป็นหมัน แผ่นอุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียส นาน 72 ชั่วโมง และ
สังเกตทุก 12 ชั่วโมง B . subtilis สายพันธุ์พบว่าสามารถยับยั้งการแพร่กระจายของเชื้อรา
ถูกเลือก 2.3ฤทธิ์ต้านราของเศษส่วนและจากวัฒนธรรมของ B . subtilis
เพื่อให้ได้สารละลายนอกเซลล์ที่มีฤทธิ์ต้านรา , 500 ml
ของ PDB ปลูกเชื้อเพื่อขอรับค่า 0.2 ที่ 600 nm
กับวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของแต่ละสายพันธุ์เส้นใยแล้วบ่ม
ที่ 28 C 180 รอบ / นาที ตัวอย่างของ 5 มิลลิลิตร ถ่ายที่ 12 , 24 และ
60 H ซึ่งสอดคล้องกับลอการิทึม , เครื่องเขียนและสาย
นิ่งระยะของการเจริญเติบโตของแต่ละสายพันธุ์ และที่ระดับ
ที่ 8 , 000 รอบต่อนาที การ supernatants ( Extracellular เศษส่วน ) ฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดัน
. 200 แล้วจะถูกเพิ่มขนาดเล็กลึก
หลอดวางไว้บนพื้นผิวที่หุ้มด้วย . reilianum และเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อ
แผ่นตามที่อธิบายไว้ข้างต้น จานถูกบ่ม
ที่ 28 C 120 H และสังเกตทุก 12 ชั่วโมงในสารละลายที่มีฤทธิ์ต้านรา
เป็นผู้ที่ยับยั้งการพัฒนา
เห็ดรา ในกรณีนี้ การประมาณจำนวนที่
วัดในมิลลิเมตร สำหรับการควบคุมของเครื่องขนาดกลาง 200 จะเพิ่มเส้นใย
.
2.4 . สนามทดสอบ
ใบสมัครของ B . subtilis การทดลองในสัปดาห์แรกของเดือนพฤษภาคม 2010 และ
สัปดาห์สุดท้ายของเดือนเมษายน 2012 ใกล้ mixquiahuala
Hidalgo , เม็กซิโกที่ประวัติของหนังโป๊ข้าวโพดอยู่ โฆษณา
ข้าวโพดลูกผสม as150 , ที่รู้จักกันเป็นเสี่ยงหัวก็ถือว่า
กับยาฆ่าแมลงปอนโช 600 FS ( clothianidin ) , ถูกใช้เพื่อทดสอบ
.
รักษาเมล็ดใช้ระงับ B . subtilis ( สายพันธุ์
160 ) ที่ 1 108 เซลล์ / มิลลิลิตร ที่ได้จากเส้นใย 60 ชม. วัฒนธรรมที่แทรกซึมเข้าไปในเมล็ด
ใช้สุญญากาศ . เมล็ดพันธุ์ควบคุมแทรกซึมอยู่
กับปริมาณของเส้นใยเท่ากับไม่มีแบคทีเรียในน้ำที่เจือจาง
สัดส่วนเช่นเดียวกับช่วงล่างของ B . subtilis .
ความไวของ B . subtilis กับยาฆ่าแมลงปอนโช 600 FS คือ
ทดสอบดังนี้ : 5 เมล็ดพันธุ์ที่ได้รับการรักษาด้วยยาฆ่าแมลงและ B . subtilis
ถูกหว่านลงในจานกับ PDA และบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง การพัฒนาของแบคทีเรีย
)การประเมินผลได้ดำเนินการในแปลงทดลอง ใช้แผนการทดลองแบบสุ่มสมบูรณ์
ที่เกี่ยวข้อง 6 repetitions ที่มี 4 ใน 5 เมตรยาว 80 ซม. แยก
ระหว่างแต่ละหนึ่ง ซึ่งสร้างแบบสุ่ม .
2 เมล็ดหว่านในการแยก 17.5 เซนติเมตร เช่น 58 คือ
2.1 . จุลินทรีย์และสภาวะการเจริญเติบโต
สายพันธุ์ของเชื้อที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ เอส reilianum
ที่แยกได้จาก teliospores ที่ได้จากข้าวโพดพืชในรัฐ
Hidalgo , กลางเม็กซิโก ใน 2008 .
สายพันธุ์เชื้อราโตในจานเลี้ยงเชื้อที่มีมันฝรั่ง
Dextrose Agar ( PDA ) difco ™ ) และอาหารเลี้ยงเชื้อแข็งปานกลาง ( 1 %
% extract สารสกัดจากยีสต์ , 2 2 % dextrose ,และ 2 % Agar ) จาน
ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 28 C เป็นเวลา 8 วัน เชื้อราที่ถูกเก็บไว้ในหลอดด้วย
PDA และน้ำมันแร่ที่อุณหภูมิห้อง .
B . subtilis สายพันธุ์แยกหมายเลข 13 , 35 , 55 , 135 และ 160 ) ที่แยกได้จากตัวอย่างดิน
ถ่ายจากไร่ข้าวโพดใน Hidalgo , เม็กซิโก ,
ที่โรคที่เป็นปัจจุบัน การแยกและจำแนก
สายพันธุ์ที่อธิบายไว้ในการศึกษานี้รายงานก่อนหน้านี้โดย
petat . kgm n-sagah เลออง et al . ( 2011 )
สื่อต่อไปนี้ที่ใช้ปลูกสายพันธุ์แบคทีเรีย :
อาหาร Potato Dextrose Agar ( PDA ) difco ™ ) และอาหาร potato dextrose broth medium
( PDB ) ซึ่งได้จากการต้ม 240 กรัมในน้ำ 1 ลิตร
มันฝรั่งสำหรับ 20 นาทีแล้วกรองก่อนเสริม
แช่นี้ กลูโคส 2 %สื่อที่เป็นของแข็งถูกบ่ม
ที่ 28 C และอาหารเหลวถูกบ่มในเครื่องปั่นหมุน
ที่ 200 รอบต่อนาทีและ 28 C แต่ละสายพันธุ์ก็เก็บไว้ใน 25 %
กลีเซอรอลที่ 80 C .
2.2 . เลือก B . subtilis สายพันธุ์ที่มีกิจกรรมต่อต้านเชื้อรา
B . subtilis สายพันธุ์มาทดสอบในหลอดทดลองเพื่อป้องกันเชื้อราสำหรับกิจกรรม
ดังนี้ จานอาหารเลี้ยงเชื้อปลูกเชื้อลงบนพื้นผิวด้วย
3 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อซ้อนทับเจือจาง ( 0.5% 1% extract สารสกัดจากยีสต์ , ,
1 % dextrose และ 0.6% วุ้น ) ที่มีสหรัฐอเมริกา reilianum 0.1 มิลลิลิตร และปลูก 18 H
ที่ 28 C 180 รอบ / นาที แล้ว B . subtilis หว่าน
กับติดเป็นหมัน แผ่นอุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียส นาน 72 ชั่วโมง และ
สังเกตทุก 12 ชั่วโมง B . subtilis สายพันธุ์พบว่าสามารถยับยั้งการแพร่กระจายของเชื้อรา
ถูกเลือก 2.3ฤทธิ์ต้านราของเศษส่วนและจากวัฒนธรรมของ B . subtilis
เพื่อให้ได้สารละลายนอกเซลล์ที่มีฤทธิ์ต้านรา , 500 ml
ของ PDB ปลูกเชื้อเพื่อขอรับค่า 0.2 ที่ 600 nm
กับวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของแต่ละสายพันธุ์เส้นใยแล้วบ่ม
ที่ 28 C 180 รอบ / นาที ตัวอย่างของ 5 มิลลิลิตร ถ่ายที่ 12 , 24 และ
60 H ซึ่งสอดคล้องกับลอการิทึม , เครื่องเขียนและสาย
นิ่งระยะของการเจริญเติบโตของแต่ละสายพันธุ์ และที่ระดับ
ที่ 8 , 000 รอบต่อนาที การ supernatants ( Extracellular เศษส่วน ) ฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดัน
. 200 แล้วจะถูกเพิ่มขนาดเล็กลึก
หลอดวางไว้บนพื้นผิวที่หุ้มด้วย . reilianum และเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อ
แผ่นตามที่อธิบายไว้ข้างต้น จานถูกบ่ม
ที่ 28 C 120 H และสังเกตทุก 12 ชั่วโมงในสารละลายที่มีฤทธิ์ต้านรา
เป็นผู้ที่ยับยั้งการพัฒนา
เห็ดรา ในกรณีนี้ การประมาณจำนวนที่
วัดในมิลลิเมตร สำหรับการควบคุมของเครื่องขนาดกลาง 200 จะเพิ่มเส้นใย
.
2.4 . สนามทดสอบ
ใบสมัครของ B . subtilis การทดลองในสัปดาห์แรกของเดือนพฤษภาคม 2010 และ
สัปดาห์สุดท้ายของเดือนเมษายน 2012 ใกล้ mixquiahuala
Hidalgo , เม็กซิโกที่ประวัติของหนังโป๊ข้าวโพดอยู่ โฆษณา
ข้าวโพดลูกผสม as150 , ที่รู้จักกันเป็นเสี่ยงหัวก็ถือว่า
กับยาฆ่าแมลงปอนโช 600 FS ( clothianidin ) , ถูกใช้เพื่อทดสอบ
.
รักษาเมล็ดใช้ระงับ B . subtilis ( สายพันธุ์
160 ) ที่ 1 108 เซลล์ / มิลลิลิตร ที่ได้จากเส้นใย 60 ชม. วัฒนธรรมที่แทรกซึมเข้าไปในเมล็ด
ใช้สุญญากาศ . เมล็ดพันธุ์ควบคุมแทรกซึมอยู่
กับปริมาณของเส้นใยเท่ากับไม่มีแบคทีเรียในน้ำที่เจือจาง
สัดส่วนเช่นเดียวกับช่วงล่างของ B . subtilis .
ความไวของ B . subtilis กับยาฆ่าแมลงปอนโช 600 FS คือ
ทดสอบดังนี้ : 5 เมล็ดพันธุ์ที่ได้รับการรักษาด้วยยาฆ่าแมลงและ B . subtilis
ถูกหว่านลงในจานกับ PDA และบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง การพัฒนาของแบคทีเรีย
)การประเมินผลได้ดำเนินการในแปลงทดลอง ใช้แผนการทดลองแบบสุ่มสมบูรณ์
ที่เกี่ยวข้อง 6 repetitions ที่มี 4 ใน 5 เมตรยาว 80 ซม. แยก
ระหว่างแต่ละหนึ่ง ซึ่งสร้างแบบสุ่ม .
2 เมล็ดหว่านในการแยก 17.5 เซนติเมตร เช่น 58 คือ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- Were your parents there?
- fine
- การจ้างงานน้อย
- but it is also a result of Harrah’s stra
- ฟังและจินตนาการตาม
- 3.5. Antibacterial evaluation
- ลาบหมู
- มาปรับแก้รายงานให้สมบูรณ์
- จุดคุ้มทุน
- Uncertainty in the internal organization
- the link between an infrared remote cont
- เพราะตอนนี้ฉันยังหาความรักไม่ได้Why? may
- This suggested that alloxan induce freer
- eters show an almost identical trajector
- วาฬ อยู่แบบสันโดด
- How you go
- We start by giving some comments on “gen
- 玉田：米澤円（平沢憂、赤沢泉美）福田：大空直美（伏見いなり、緒方智絵里）ローズヒ
- Crowd
- Conservatives
- eters show an almost identical trajector
- abroad
- What do u do in life ?
- As mentioned in Section III-B, transpare
