1 × 105 cells/mL were treated with

1 × 105 cells/mL were treated with IC50 of CLG and incubated for 24 and 48 h while untreated cells acted as control. The cells were lysed by the addition of 50 μL of chilled Cell Lysis Buffer and incubated on ice for 10 min. The resulting cell lysate was centrifuged for 1 min at 10,000 ×g, and the supernatant was collected. Fifty microliters of 2X Reaction Buffer (containing 10 mM DTT) was added to each sample. Then 5 μL of DEVD-pNA (caspase-3 substrate) was added and incubated in the dark at 37°C for 1 h. At the end of the incubation period, the samples were read at 405 nm in a microplate reader (TECAN, SunriseTM, Männedorf, Switzerland). Data was presented as optical density (405 nm; ).

lysed

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1 × 105 เซลล์/มล.ได้รับ IC50 CLG และ incubated ใน 24 และ 48 h ในขณะที่เซลล์ไม่ถูกรักษาได้ปฏิบัติเป็นตัวควบคุม เซลล์ถูก lysed โดยการเพิ่ม μL 50 เย็นเซลล์ Lysis บัฟเฟอร์ และ incubated บนน้ำแข็ง 10 นาที เซลล์ผลลัพธ์ lysate ถูก centrifuged ใน 1 นาทีที่ 10000 × g และ supernatant รวบรวมไว้ Microliters 50 2 X บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา (ประกอบด้วย 10 มม. DTT) ถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละอย่าง แล้ว μL 5 ของ DEVD-pNA (พื้นผิว caspase-3) ได้เพิ่ม และ incubated ในมืดที่ 37° C สำหรับ 1 h เมื่อสิ้นสุดระยะฟักตัว ตัวอย่างได้อ่านที่ 405 nm ในอ่าน microplate (TECAN, SunriseTM, Männedorf สวิตเซอร์แลนด์) นำเสนอข้อมูลเป็นความหนาแน่นออปติคอล (405 nm;)lysed

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1 × 105 เซลล์ / มิลลิลิตรได้รับการรักษาที่มีค่า IC50 ของ CLG และบ่มเป็นเวลา 24 และ 48 ชั่วโมงในขณะที่ได้รับการรักษาเซลล์ที่ทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม เซลล์ถูก lysed โดยนอกเหนือจาก 50 ไมโครลิตรแช่เย็นเซลล์สลายบัฟเฟอร์และบ่มบนน้ำแข็งเป็นเวลา 10 นาที lysate เซลล์ส่งผลให้ได้รับการหมุนเหวี่ยงเวลา 1 นาทีที่ 10,000 ×กรัมและใสถูกเก็บรวบรวม ห้าสิบ microliters ของ 2X ปฏิกิริยาบัฟเฟอร์ (ที่มี 10 มิลลิ DTT) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละตัวอย่าง จากนั้น 5 ไมโครลิตรของ Devd-PNA (caspase-3 พื้นผิว) ถูกบันทึกและบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เมื่อสิ้นสุดระยะเวลาการบ่มตัวอย่างที่ถูกอ่านได้ที่ 405 นาโนเมตรในเครื่องอ่าน microplate (ที่ TECAN, SunriseTM, Mannedorf วิตเซอร์แลนด์) ข้อมูลที่ถูกนำเสนอเป็นความหนาแน่นของออปติคอล (405 นาโนเมตร;). lysed

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 × 105 เซลล์ / มล. ได้รับการรักษาด้วย ic50 ของ clg บ่มเป็นเวลา 24 และ 48   H ในขณะที่รักษาเซลล์ทำหน้าที่ควบคุม เซลล์ก็ lysed โดยนอกเหนือจาก 50  μผมเย็นจากการสลายเซลล์บัฟเฟอร์ และบ่มแข็ง 10  นาที ส่งผลให้เซลล์ lysate คือระดับ 1  มินที่× 10 กรัม และนำกำลังรวบรวม50 ตัวเลขของบัฟเฟอร์ปฏิกิริยา 2x ( บรรจุ 10 20 มม.   ) ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่าง แล้ว 5  μ l devd PNA ( การศึกษาลักษณะพื้นผิว ) คือการเพิ่มและบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 37 องศา C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง  ที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา ตัวอย่าง ( อ่าน 405   nm ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( อ่าน TECAN sunrisetm , M , และ nnedorf , สวิตเซอร์แลนด์ ) ข้อมูลที่นำเสนอเป็นค่าแสง ( 405   nm ; )

lysed