2.3. RNA isolationTotal RNA was iso

2.3. RNA isolation
Total RNA was isolated from boll of uninfected and A. flavusinfected
cotton using Spectrum total RNA isolation kit (Sigmae
Aldrich, St. Louis, MO) at different time points after infection. The
RNA was independently extracted from cottonseed and pericarp
from each infected locules (L1) and three adjacent/distal locules
(Adj), respectively. Total RNA was quantified by an ND-1000 spectrophotometer
(Nanodrop Technologies, Wilmington, DE). The RNA
integritywas also assessed by running 2 ml of total RNA in a 1.2% (w/
v) agarose/formaldehyde gel, stained with ethidium bromide, and
visualized under UV light. An aliquot of 1 mg RNA extracted from
adjacent/distal locules (Adj) of cottonseed or pericarp was pooled
for cDNA preparation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 แยกอาร์เอ็นเออาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกต่างหากจาก boll ของเชื้อ และอ. flavusinfectedฝ้ายใช้สเปกตรัมรวมอาร์เอ็นเอแยกชุด (SigmaeAldrich, St. Louis, MO) ณจุดเวลาต่าง ๆ หลังจากการติดเชื้อ ที่อาร์เอ็นเอได้อย่างอิสระแยกจาก pericarp และดัดจากการติดเชื้อ locules (L1) และ locules สามติด/กระดูก(คำคุณศัพท์), ตามลำดับ อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูก quantified โดยเครื่องทดสอบกรดด่างเป็น ND-1000(Nanodrop เทคโนโลยี วิลมิ DE) อาร์เอ็นเอนอกจากนี้ยัง ประเมิน โดยรัน 2 ml ของอาร์เอ็นเอทั้งหมดใน 1.2% (พร้อม integritywasv) agarose/ฟอร์ มาลดีไฮด์เจล สีกับโบรไมด์ ethidium และvisualized ภายใต้แสง UV ส่วนลงตัวที่ของอาร์เอ็นเอที่สกัดจาก 1 mglocules (คำคุณศัพท์) ติดกัน/กระดูกส่วนเกินหรือ pericarp ถูกทางถูกพูสำหรับการเตรียม cDNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 แยก RNA
รวมอาร์เอ็นเอที่แยกได้จาก Boll ของที่ไม่ติดเชื้อเอ flavusinfected และ
ผ้าฝ้ายโดยใช้ชุดแยก RNA รวมสเปกตรัม (Sigmae
ดิช, เซนต์หลุยส์, MO) ที่จุดเวลาที่แตกต่างกันหลังจากการติดเชื้อ
อาร์เอ็นเอถูกสกัดเป็นอิสระจากฝ้ายและเปลือก
จากแต่ละ locules ติดเชื้อ (L1) และสามที่อยู่ติดกัน / ปลาย locules
(Adj) ตามลำดับ รวม RNA ถูกวัดโดย spectrophotometer ND-1000
(Nanodrop Technologies, Wilmington, DE) อาร์เอ็นเอ
ยัง integritywas ประเมินโดยใช้ 2 มิลลิลิตรของอาร์เอ็นเอรวม 1.2% (w /
v) มี agarose / เจลดีไฮด์ย้อมด้วย ethidium bromide และ
มองเห็นภายใต้แสงยูวี aliquot 1 มิลลิกรัมสกัดจากอาร์เอ็นเอ
ที่อยู่ติดกัน / ปลาย locules (adj) ของฝ้ายหรือเปลือกถูกสำรอง
สำหรับการเตรียม cDNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 อาร์เอ็นเอแยก
รวม RNA ถูกแยกจาก โบล ของผู้ที่ไม่ติดเชื้อและ A . flavusinfected
ฝ้ายใช้คลื่นความถี่รวม RNA แยกชุด ( sigmae
Aldrich St . Louis , MO ) ที่จุดเวลาที่ต่างกันหลังจากการติดเชื้อ
RNA ถูกแยกและสกัดจากเมล็ดเปลือก
จากแต่ละช่องติดเชื้อ ( L1 ) และสามติดกัน / ปลายช่อง
( adj ) ตามลำดับอาร์เอ็นเอทั้งหมดถูก quantified โดย nd-1000 Spectrophotometer
( เทคโนโลยี nanodrop Wilmington , DE ) คนเก่ง
integritywas ยังประเมิน โดยวิ่ง 2 ml ของอาร์เอ็นเอทั้งหมดใน 1.2 % ( w /
V ) ( / ฟอร์มัลดีไฮด์เจล เปื้อนทิเดียมโบรไมด์ , และ
มองเห็นภายใต้แสงยูวี เป็นส่วนลงตัวของ 1 rna มิลลิกรัมสกัดจาก
ติดกัน / ปลายช่อง ( 1 ) เมล็ดหรือเปลือกคือ pooled
สำหรับการเตรียม cDNA .