Extraction and Isolation. A homogen

Extraction and Isolation. A homogenate, in 70% aqueous acetone (2L × 3), of the dried leaves (300 g) of Q. coccifera was filtered. The filtrate was concentrated and extracted with Et2O (0.6 L × 4), EtOAc (0.6 L × 5), and n-BuOH saturated with water (0.6 L × 5), successively. Fractionations were achieved by monitoring normal- and/or reversed-phase HPLC. A part (4.5 g) of the EtOAc extract (7.5 g) was chromato- graphed over Toyopearl HW-40 (2.2 i.d. × 59 cm) with aqueous MeOH (20% f 30% f 40% f 50% f 60% f 70% MeOH) f MeOH-H2O-acetone (3:2:1 f 3:1:2) f 70% aqueous acetone. The 40%, 50%, 60%, and 70% MeOH eluates yielded (+)- catechin (204 mg), pedunculagin (18) (66 mg), kaempferol 3-O- (6 -O-galloyl)-โ-D-glucopyranose (61 mg), and valoneic acid dilactone (77 mg), respectively. The eluate of MeOH-H2O- acetone (3:2:1) was further chromatographed over MCI GEL CHP-20P and/or YMC-GEL ODS AQ 120-50S (each 1.1 i.d. ×
25 cm) with aqueous MeOH to give cocciferin D1 (1) (87 mg), casuarictin (16) (4 mg), tellimagrandin II (13) (5 mg), and phillyraeoidins A (6) (336 mg) and E (6 mg). The MeOH-H2O- acetone (3:1:2) eluate was purified by Mega Bond Elut C18 with aqueous MeOH to give ellagic acid (15 mg). The rest (3.0 g) of the EtOAc extract was similarly fractionated and purified by a combination of column chromatography over Toyopearl HW-
40, MCI GEL CHP-20P, and/or YMC-GEL ODS AQ 120-50S to furnish additional crops of 1 (104 mg), 6 (306 mg), 18 (56 mg), (+)-catechin (123 mg), valoneic acid dilactone (25 mg), and kaempferol 3-O-(6 -O-galloyl)-โ-D-glucopyranose (42 mg). A part (8.0 g) of the n-BuOH extract (17.1 g) was chromato- graphed over Diaion HP-20 (6.5 i.d. × 45 cm) with H2O f aqueous MeOH (10% f 20% f 30% f 40% f 60% MeOH) f MeOH f 70% aqueous acetone. The 20% and 30% MeOH eluates were separately chromatographed over Toyopearl HW-
40 (2.2 i.d. × 40 cm) with aqueous MeOH (20% f 30% f 40% f 50% f 60% f 70% MeOH) f MeOH-H2O-acetone (3:2:1 f 3:1:2 f 1:1:1) f 70% aqueous acetone, to afford acutissimin B (45 mg in total) from 20% and 30% MeOH eluates. The MeOH-H2O-acetone (3:1:2) eluate from the separation by column chromatography over Toyopearl HW-40 of 40% and
60% MeOH eluates were combined and further purified on MCI GEL CHP-20P and/or YMC-GEL ODS AQ 120-50S with aqueous MeOH to furnish 6 (50 mg), phillyraeoidins B (7) (12 mg) and C (8) (15 mg), and cocciferin T1 (4) (11 mg). A part (16.0 g) of the aqueous extract (34.7 g) was chromatographed

over Diaion HP-20 (6.5 i.d. × 40 cm) with H2O containing increasing amounts of MeOH in a stepwise gradient mode. The eluates of 10%, 20%, and 30% MeOH were separately subjected to column chromatography over Toyopearl HW-40 (2.2 i.d. ×
40 cm), yielding 7 (107 mg), castalagin (17) (179 mg in total), and vescalagin (132 mg). The MeOH-H2O-acetone (1:1:1) fraction from the 30% MeOH eluate was further purified by MCI GEL CHP-20P (1.1 i.d. × 20 cm) column chromatography and/or Mega Bond Elut C18 cartridge column chromatography to give cocciferin D2 (2) (26 mg).
The dried leaves (800 g) of Q. suber were homogenized in
70% aqueous acetone (2 L × 5), and the concentrated solution
(650 mL) was extracted with Et2O (0.6 L × 5), EtOAc (0.6 L ×
8), and n-BuOH saturated with water (0.6 L × 8), successively.
A part (5.0 g) of the EtOAc extract (9.7 g) was chromato- graphed over Toyopearl HW-40 (2.2 i.d. × 60 cm) with aqueous
MeOH (40% f 50% f 60% f 70% MeOH) f MeOH-H2O-
acetone (3:1:1 f 1:1:1) f 70% aqueous acetone. The 50% and
60% MeOH eluates afforded 18 (210 mg) and tellimagrandin I (23) (67 mg), respectively. The eluates of 40% and 70% MeOH were separately subjected to column chromatographies over MCI GEL CHP-20P and/or YMC-GEL ODS AQ 120-50S with aqueous MeOH to give quercetin (10 mg), quercitrin (11 mg), and kaempferol 3-O-(6 -O-galloyl)-โ-D-glucopyranose (14 mg) from the former and mongolicain A (35 mg) from the latter. The aqueous extract (50.0 g) was fractionated by column chromatography over Diaion HP-20 (7.0 i.d. × 70 cm) and developed with H2O and increasing amounts of MeOH [H2O f 20% MeOH f 40% MeOH f 60% MeOH f MeOH] and
70% aqueous acetone in a stepwise gradient mode. The 20% MeOH eluate was further chromatographed over Toyopearl HW-40 (2.2 i.d. × 60 cm) with aqueous MeOH (20% f 30% f
50% f 60% f 70% MeOH) f MeOH-H2O-acetone (7:2:1) f
70% aqueous acetone and finally purified on YMC-GEL ODS
AQ 120-50S (1.1 i.d. × 45 cm) with aqueous MeOH to yield 17 (13 mg), acutissimin B (5 mg), vescalagin (42 mg), casta- valoninic acid (24) (11 mg), isocastavaloninic acid (4 mg), desgalloylstachyurin (3 mg), and cocciferin T2 (5) (6 mg). The eluate of 40% MeOH from the Diaion HP-20 column was similarly fractionated and purified on Toyopearl HW-40 (2.2 i.d. × 60 cm) and YMC-GEL ODS AQ 120-50S (1.1 i.d. × 40 cm) with aqueous MeOH to give 2 (57 mg), 3 (10 mg), 5 (67 mg), 17 (5 mg), and 24 (2 mg).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดและการแยก homogenate ใน 70% น้ำอะซิโตน (2L × 3) ของใบแห้ง (300 กรัม) Q. coccifera ถูกกรอง กรองเข้มข้นและสกัดด้วย Et2O (0.6 L × 4) EtOAc (0.6 L × 5) และ n-BuOH อิ่มตัวด้วยน้ำ (0.6 L × 5) อย่างต่อเนื่อง Fractionations กำลังประสบความสำเร็จโดยการตรวจสอบจำหน่ายทั่วไปและ / หรือกลับเฟส HPLC เป็นส่วนหนึ่ง (4.5 กรัม) ของสารสกัดจาก EtOAc (7.5 กรัม) ได้กราฟ chromato- มากกว่า Toyopearl HW-40 (2.2 ×รหัส 59 ซม.) น้ำกับเมธานอล (20% 30% ฉฉฉ 40% 50% 60% ฉฉ 70 % เมธานอล) ฉเมธานอล-H2O-อะซิโตน (3: 2: 1 เอฟ 3: 1: 2) ฉ 70% อะซีโตนน้ำ 40%, 50%, 60% และ 70% ให้ผล eluates เมธานอล (+) - catechin (204 มก.) pedunculagin (18) (66 มก.) เฟอรอล 3 O- (6 -O-galloyl) - โ - D-glucopyranose (61 มก.) และกรด valoneic dilactone (77 มก.) ตามลำดับ eluate ของเมธานอล-H2O- อะซิโตน (3: 2: 1) ได้รับการ chromatographed ต่อไปมากกว่า MCI GEL CHP-20P และ / หรือ YMC GEL-ODS AQ 120-50S (รหัสแต่ละ 1.1 ×
25 ซม.) กับเมธานอลที่จะให้น้ำ cocciferin D1 (1) (87 มก.) casuarictin (16) (4 มก.) tellimagrandin ครั้งที่สอง (13) (5 มก.) และ phillyraeoidins A (6) (336 มิลลิกรัม) และ E (6 มก.) เมธานอลอะซีโตน-H2O- (3: 1: 2) eluate บริสุทธิ์โดยบอนด์เมกะ Elut C18 กับเมธานอลในน้ำเพื่อให้กรด ellagic (15 มก.) ส่วนที่เหลือ (3.0 กรัม) สารสกัด EtOAc เป็นทำนองเดียวกัน fractionated และบริสุทธิ์โดยการรวมกันของคอลัมน์มากกว่า Toyopearl HW-
40 MCI GEL CHP-20P และ / หรือ YMC GEL-ODS AQ 120-50S ให้แก่พืชที่เพิ่มขึ้นของ 1 (104 มก.), 6 (306 มก.), 18 (56 มก.), (+) - catechin (123 มก.) dilactone กรด valoneic (25 มก.) และเฟอรอล 3 O- (6 -O-galloyl) - โ -D-glucopyranose (42 มก.) เป็นส่วนหนึ่ง (8.0 กรัม) ของสารสกัดจาก n-BuOH (17.1 กรัม) ได้กราฟ chromato- มากกว่า Diaion HP-20 (6.5 รหัส× 45 ซม.) กับ H2O น้ำฉเมธานอล (10% ฉฉ 20% 30% 40% ฉฉ เมธานอล 60%) ฉฉเมธานอล 70% น้ำอะซิโตน 20% และ 30% eluates เมธานอลถูกแยก chromatographed มากกว่า Toyopearl HW-
40 (2.2 รหัส× 40 ซม.) น้ำกับเมธานอล (20% 30% ฉฉฉ 40% 50% 60% ฉฉเมธานอล 70%) ฉเมธานอล-H2O -acetone (3: 2: 1 เอฟ 3: 1: 2 เอฟ 1: 1: 1) ฉ 70% อะซีโตนน้ำที่จะจ่าย acutissimin B (45 มก. ทั้งหมด) จาก 20% และ 30% เมธานอล eluates เมธานอล-H2O-อะซิโตน (3: 1: 2) eluate จากแยกจากคอลัมน์มากกว่า Toyopearl HW-40 40% และ
60% eluates เมธานอลมารวมกันและบริสุทธิ์เพิ่มเติมเกี่ยวกับเเมเจล CHP-20P และ / หรือ YMC-GEL ODS AQ 120-50S เมธานอลกับน้ำให้แก่ 6 (50 มก.) phillyraeoidins B (7) (12 มก.) และ C (8) (15 มก.) และ cocciferin T1 (4) (11 มก.) เป็นส่วนหนึ่ง (16.0 กรัม) ของสารสกัด (34.7 กรัม) ถูก chromatographed มากกว่า Diaion HP-20 (6.5 รหัส× 40 ซม.) กับ H2O ที่มีจำนวนเพิ่มมากขึ้นของเมธานอลในโหมดการไล่ระดับสีแบบขั้นตอน eluates 10%, 20% และ 30% เมธานอลถูกยัดเยียดแยกคอลัมน์มากกว่า Toyopearl HW-40 (2.2 รหัส× 40 ซม.) ยอม 7 (107 มก.) castalagin (17) (179 มก. ในทั้งหมด) และ vescalagin (132 มก.) เมธานอล-H2O-อะซิโตน (1: 1: 1) ส่วนจาก 30% eluate เมธานอลบริสุทธิ์ต่อไปโดย MCI GEL CHP-20P (1.1 รหัส× 20 ซม) คอลัมน์และ / หรือเมกะบอนด์ Elut C18 คอลัมน์ตลับหมึกที่จะให้ cocciferin D2 (2) (26 มก.). ใบแห้ง (800 กรัม) suber Q. ถูกปั่นใน70% น้ำอะซิโตน (2 L × 5) และวิธีการแก้ปัญหาที่มีความเข้มข้น(650 มิลลิลิตร) ถูกสกัดด้วย Et2O (0.6 L × 5) EtOAc (0.6 L × 8) และ n-BuOH อิ่มตัวด้วยน้ำ (0.6 L × 8) อย่างต่อเนื่อง. ส่วน (5.0 กรัม) ของสารสกัดจาก EtOAc (9.7 กรัม) ถูก chromato- กราฟมากกว่า Toyopearl HW- 40 (2.2 รหัส× 60 ซม.) น้ำกับเมธานอล(40% ฉฉ 50% 60% 70% ฉเมธานอล) ฉเมธานอล-H2O- อะซิโตน (3: 1: 1 เอฟ 1: 1: 1) ฉ 70% อะซีโตนน้ำ 50% และ60% เมธานอล eluates อึด 18 (210 มิลลิกรัม) และ tellimagrandin ฉัน (23) (67 มก.) ตามลำดับ eluates 40% และ 70% เมธานอลถูกยัดเยียดแยก chromatographies คอลัมน์มากกว่า MCI GEL CHP-20P และ / หรือ YMC GEL-ODS AQ 120-50S เมธานอลกับน้ำที่จะให้ quercetin (10 มก.) quercitrin (11 มก.) และ เฟอรอล 3 O- (6 -O-galloyl) - โ -D-glucopyranose (14 มก.) จากอดีตและ mongolicain A (35 มก.) จากหลัง สารสกัดน้ำ (50.0 กรัม) ถูก fractionated โดยคอลัมน์มากกว่า Diaion HP-20 (7.0 รหัส× 70 ซม.) และการพัฒนากับ H2O และจำนวนเงินที่เพิ่มขึ้นของเมธานอล [H2O ฉ 20% เมธานอลเอฟ 40% เมธานอลเอฟ 60% เมธานอลฉเมธานอล] และ70% อะซีโตนน้ำในโหมดการไล่ระดับสีแบบขั้นตอน 20% eluate เมธานอลถูก chromatographed ต่อไปมากกว่า Toyopearl HW-40 (2.2 รหัส× 60 ซม.) กับน้ำเมธานอล (20% ฉ 30 f% 50% ฉ 60 f% 70% เมธานอล) ฉเมธานอล-H2O-อะซิโตน (7: 2 1) ฉ70% อะซีโตนและน้ำบริสุทธิ์ที่สุด YMC GEL-ODS AQ 120-50S (1.1 รหัส× 45 ซม.) กับเมธานอลที่จะให้ผลผลิตน้ำ 17 (13 มก.) acutissimin B (5 มก.) vescalagin (42 มก.) , casta- กรด valoninic (24) (11 มก.) กรด isocastavaloninic (4 มก.) desgalloylstachyurin (3 มก.) และ cocciferin T2 (5) (6 มก.) eluate ของเมธานอล 40% จากคอลัมน์ Diaion HP-20 เป็นทำนองเดียวกัน fractionated และบริสุทธิ์ใน Toyopearl HW-40 (2.2 รหัส× 60 ซม.) และ YMC GEL-ODS AQ 120-50S (1.1 รหัส× 40 ซม.) กับน้ำที่จะเมธานอล ให้ 2 (57 มก.) 3 (10 mg), 5 (67 mg), 17 (5 มก.) และ 24 (2 มก.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดและการแยก . เป็นปริมาณ 70% ในสารละลายอะซิโตน ( 2L × 3 ) ของใบแห้ง ( 300 กรัม ) Q coccifera ถูกกรอง หนักก็เข้มข้นและสกัดด้วย et2o ( 0.6 ลิตร× 4 ) , etoac ( 0.6 ลิตร× 5 ) , และนอร์มัล - บิวทานอลที่อิ่มตัวด้วยน้ำ ( 0.6 ลิตร× 5 ) อย่างต่อเนื่อง fractionations ถูกบรรลุโดยการตรวจสอบปกติและ / หรือ reversed-phase HPLC . ส่วนหนึ่ง ( 4.5 กรัม ) ของ etoac สกัด ( 75 g ) chromato - กราฟมากกว่า toyopearl hw-40 ( 2.2 บัตรประจำตัว× 59 ซม. ) กับปริมาณน้ำ ( 20% 30% 40% F F F F F 50% 60% 70% ปริมาณ ) F meoh-h2o-acetone ( 3:2:1 F 3:1:2 ) F 70 % สารละลายอะซิโตน 40% , 50% , 60% , 70% และ eluates เมทิลแอลกอฮอล์ ( ) - catechin ( 204 mg ) pedunculagin ( 18 ) ( 66 มิลลิกรัม ) แคมเฟอรอล ( 3-o - 6 - o-galloyl ) - โ - d-glucopyranose ( 61 มิลลิกรัม และ valoneic กรด dilactone ( 77 มิลลิกรัม ตามลำดับในสารละลาย ( eluate ) ของ meoh-h2o - อะซิโตน ( 3:2:1 ) ยัง chromatographed มากกว่าว่ะ chp-20p เจลและ / หรือ ymc-gel ODS AQ 120-50s ( แต่ละ 1.1 บัตรประจำตัว×
25 ซม. ) กับปริมาณน้ำ เพื่อให้ cocciferin D1 ( 1 ) ( 87 casuarictin มิลลิกรัม ) ( 16 ) ( 4 มิลลิกรัม ) tellimagrandin II ( 13 ) ( 5 มิลลิกรัม ) และ phillyraeoidins ( 6 ) ( 336 mg ) และ E ( 6 มก. ) การ meoh-h2o - อะซิโตน ( 3 : 1 :2 ) สารละลาย ( eluate ) บริสุทธิ์ โดย c18 พันธบัตร elut เด่นด้วยปริมาณน้ำให้ลาจิคแอซิด ( 15 มก. ) ส่วนที่เหลือ ( 3.0 G ) ของ etoac สกัดเป็นลำดับเดียวกันและทำให้บริสุทธิ์ โดยการรวมกันของคอลัมน์โครมาโตกราฟฟีไป toyopearl hw -
40 มิลลิคูรี เจล chp-20p และ / หรือ ymc-gel ODS AQ 120-50s แก่พืชเพิ่มเติม 1 ( 104 มิลลิกรัม ) , 6 ( 306 มิลลิกรัม ) , 18 ( 56 มิลลิกรัม ) ( ) - catechin ( 123 มิลลิกรัม )valoneic กรด dilactone ( 25 มิลลิกรัม ) และเคมเฟอรอล 3-o - 6 - o-galloyl ) - โ - d-glucopyranose ( 42 มิลลิกรัม ) ส่วนหนึ่ง ( 8.0 กรัม ) ของนอร์มัล - บิวทานอล สารสกัด ( 17.1 กรัม ) คือ chromato - กราฟมากกว่า diaion hp-20 ( 6.5 บัตร× 45 ซม. ) กับปริมาณน้ำ ( H2O F F F 10% 20% 30% 40% 60% ปริมาณ F F F F 70 % ) ปริมาณสารละลายอะซิโตน 20 % และ 30 % ปริมาณ eluates ถูกแยก chromatographed กว่า toyopearl hw -
40 ( 2.2 บัตรประจำตัว× 40 ซม. ) กับปริมาณน้ำ ( 20% 30% 40% F F F F F 50% 60% 70% ปริมาณ ) F meoh-h2o-acetone ( 3:2:1 3:1:2 F F F 1 : 1 : 1 ) ร้อยละ 70 สารละลายอะซิโตน จ่าย acutissimin B ( 45 มก. ในทั้งหมด ) จาก 20% และ 30% eluates เมทิลแอลกอฮอล์ . การ meoh-h2o-acetone ( 3:1:2 ) สารละลาย ( eluate ) จากการแยกด้วยคอลัมน์โครมาโทกราฟี toyopearl hw-40 กว่า 40% และ
60 % eluates เมทิลแอลกอฮอล์ถูกรวมและเพิ่มเติมใน MCI chp-20p บริสุทธิ์เจลและ / หรือ ymc-gel ODS AQ 120-50s กับน้ำเพื่อให้ปริมาณ 6 ( 50 มิลลิกรัม ) phillyraeoidins B ( 7 ) ( 12 มิลลิกรัม ) และ C ( 8 ) ( 15 มก. ) และ cocciferin T1 ( 4 ) ( 11 มิลลิกรัม ) ส่วนหนึ่ง ( 16.0 กรัม ) สารสกัดน้ำ ( 34.7 g ) chromatographed

กว่า diaion hp-20 ( 6.5 ID× 40 ซม. ) กับ H2O ที่มีปริมาณที่เพิ่มขึ้นของปริมาณในโหมดสีคน การ eluates 10% , 20% และ 30% ปริมาณถูกแยกภายใต้คอลัมน์โครมาโตกราฟฟีไป toyopearl hw-40 ( 2.2 บัตรประจำตัว×
40 ซม. ) สูง 7 ( 107 มิลลิกรัม ) castalagin ( 17 ) ( 179 มิลลิกรัมในทั้งหมด ) , และ vescalagin ( 250 มิลลิกรัม ) การ meoh-h2o-acetone ( 1 : 1 :