2. Materials and methods
2.1. Plants, growth conditions, and experimental design
Maize (Zea mays L.), cultivar “Marignan” and tomato (Solanum
lycopersicum L.), cultivar “Maeva F1” plants were grown in a computer controlled greenhouse in 1 dm3 dark glass pots filled
with a modified Hoagland nutrient solution (see Tables 1 and 2 for
the components of microelements solution A and B). Solutions
were supplied by air continuously and replaced every 3 days. The
medium pH was about 5.0 for all solutions types. The average
temperature for day/night was 26/18 C, respectively, relative humidity
was 50e60%, the photoperiod for the day/night cycle was
16/8 h, and the maximum photosynthetically active radiation was
about 1400 mmol (photons) m2 s1. After 7 days of growth, the
seedlings were subjected to nutrient deficiency stress. Later,14 days
after the stress application (21 days after emergence) prompt
chlorophyll a fluorescence (PF) measurements were done on 9 fully
developed leaves for each treatment. At this stage (21 days of
emergence), only slight visual symptoms of nutrients deficiencies
were observed.
2.2. Chlorophyll fluorescence measurement
Photo-induced transients of prompt fluorescence in leaves
were measured by M-PEA (Multi-Function Plant Efficiency Analyser,
Hansatech, UK). In the M-PEA instrument emitter wavelength
ranges are: (1) 635 10 nm, for the actinic light LED
(light-emitting diode); (2) 820 25 nm, for the modulated light
LED, and (3) 735 15 nm, for the far-red light LED; for the latter,
a RG9 long pass filter was used to remove any visible light
component (for more details see Goltsev et al., 2009; Strasser
et al., 2010). Before measuring the experimental signals, plants
were kept in dark at least for 30 min. Measurements were carried
out on the abaxial surface of 3 fully developed leaves (top, middle
and bottom of the plant), on the middle part of chosen leaf.
Chlorophyll a (Chl a) fluorescence was recorded after illumination
by red actinic light (635 nm, 5000 mmol hn m2 s1). The DF dark
relaxation kinetics were recorded for 3 s after turning the actinic
light off.
Measured signal were analysed by M-PEA-data analyzer
version 5.4 software (this software is laboratory designed in
Dept. Biophysics and Radiobiology, Sofia University by Petko
Chernev).
2.3. JIP test parameters
The characteristics points of photoinduced chlorophyll fluorescence
transients were used to calculate specific characteristics of
the light phase of photosynthesis according to the JIP-test algorithm,
described by Strasser et al. (2004, 2010). The analysed parameters
are described in Table 3.
2.4. Statistical analysis
All experiments were carried out at least at 9 repetitions and
data were statistically analysed. The non-parametric Kruskale
Wallis one-way analysis of variance by ranks was applied using Sigma Stat v.3.5 software. Principal Component Analysis was performed as per MatLab 7.5 Toolbox.
2. วัสดุและวิธีการ2.1. พืช สภาพการเจริญเติบโต และออกแบบการทดลองข้าวโพด (ซี mays L.), cultivar "มาริญอง" และมะเขือ (Solanum"Maeva F1" พืชที่ปลูกในเรือนกระจกควบคุมคอมพิวเตอร์ในกระถางแก้วเข้ม 1 dm3 เติม cultivar lycopersicum L.),มีปัญหาแก้ไข Hoagland ธาตุอาหาร (ดูตารางที่ 1 และ 2 สำหรับส่วนประกอบของโซลูชัน microelements A และ B) โซลูชั่นมา โดยอากาศอย่างต่อเนื่อง และเปลี่ยนทุก 3 วัน ที่ปานกลาง pH ประมาณ 5.0 สำหรับชนิดทั้งหมดของโซลูชันได้ ค่าเฉลี่ยอุณหภูมิสำหรับต่อคืนวัน 26/18 C ตามลำดับ ความชื้นสัมพัทธ์50e60% วงจรการชั่วโมงวัน/คืน16/8 h และรังสี photosynthetically active สูงสุดเกี่ยวกับ mmol 1400 (photons) m 2 s 1 หลังจาก 7 วันเจริญเติบโต การกล้าไม้อยู่ภายใต้การขาดธาตุอาหารความเครียด ภายหลัง 14 วันหลังพร้อมแอพลิเคชัน (21 วันหลังจากเกิดความเครียดวัด fluorescence (PF) คลอโรฟิลล์ a ทำใน 9 อย่างใบพัฒนาสำหรับแต่ละ ในระยะนี้ (21 วันอาการภาพเล็กน้อยเกิดขึ้น), เฉพาะของสารอาหารทรงได้ดำเนินการ2.2. วัด fluorescence คลอโรฟิลล์แม้แต่ผู้ที่ทำให้เกิดภาพของพร้อมท์ fluorescence ในใบไม้ถูกวัด โดย M-ดอกอัญชัญ (มัลติฟังก์ชั่นพืชประสิทธิภาพ AnalyserHansatech, UK) ใน M-ถั่วตราตัวส่งความยาวคลื่นช่วงคือ: (1) 635 10 nm, actinic แสง LED(แสง–ไดโอดเปล่ง); (2) 820 25 nm เบาซ้อนLED และ (3) 735 15 nm สำหรับแสง far-red LED สำหรับหลังตัวยาวผ่าน RG9 ถูกใช้เพื่อเอาแสงที่มองเห็นใด ๆส่วนประกอบ (สำหรับดูเพิ่มเติมรายละเอียด Goltsev et al., 2009 ชตราสเซอร์ร้อยเอ็ด al., 2010) ก่อนที่จะวัดสัญญาณทดลอง พืชที่ถูกเก็บไว้ในความมืด น้อยสำหรับ 30 นาที วัดได้ดำเนินการออกบนผิว abaxial สมบูรณ์พัฒนา 3 ใบ (ด้านบน ตรงกลางและด้านล่างของโรงงาน), ในส่วนกลางของใบที่ท่านคลอโรฟิลล์ a (Chl เป็น) fluorescence ถูกบันทึกหลังจากรัศมีโดยแดง actinic แสง (635 nm, 5000 mmol hn m 2 s 1) DF เข้มจลนพลศาสตร์เป็นบันทึกสำหรับ 3 s หลังจากเปิด actinicปิดไฟวัดสัญญาณได้ analysed โดยวิเคราะห์ข้อมูล M ดอกอัญชัญรุ่น 5.4 ซอฟต์แวร์ (ซอฟต์แวร์นี้เป็นห้องปฏิบัติการออกแบบฝ่ายชีวฟิสิกส์ได้และ Radiobiology มหาวิทยาลัยโซเฟีย โดย PetkoChernev)2.3. จิ๊บทดสอบพารามิเตอร์คะแนนลักษณะของ photoinduced fluorescence คลอโรฟิลล์แม้แต่ผู้ใช้ในการคำนวณลักษณะเฉพาะของระยะแสงสังเคราะห์ด้วยแสงตามอัลกอริทึมจิ๊บทดสอบอธิบายโดย al. et ชตราสเซอร์ (2004, 2010) พารามิเตอร์ analysedไว้ในตาราง 32.4. สถิติวิเคราะห์ทดลองทั้งหมดได้น้อยที่ทำการทำซ้ำ 9 และข้อมูลทางสถิติได้ analysed Kruskale ไม่ใช่พาราเมตริกวาลลิทางเดียวการวิเคราะห์ของผลต่าง โดยยศถูกใช้โดยใช้ซอฟต์แวร์สถิติซิก v.3.5 วิเคราะห์ส่วนประกอบหลักที่ดำเนินการตามเครื่องมือ MatLab 7.5
การแปล กรุณารอสักครู่..

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 พืชสภาพการเจริญเติบโตและการออกแบบการทดลอง
ข้าวโพด (Zea mays L. ) พันธุ์ "Marignan" และมะเขือเทศ (มะเขือ
lycopersicum L. ) พันธุ์ "Maeva F1" พืชที่ปลูกในเรือนกระจกคอมพิวเตอร์ควบคุม 1 dm3 หม้อแก้วมืดที่เต็มไป
ด้วย การแก้ปัญหา Hoagland สารอาหารที่ปรับเปลี่ยน (ดูตารางที่ 1 และ 2 สำหรับ
ส่วนประกอบของการแก้ปัญหา microelements A และ B) การแก้ปัญหาที่
ถูกจัดทำโดยอากาศอย่างต่อเนื่องและเปลี่ยนทุก 3 วัน
ค่าความเป็นกรดกลางประมาณ 5.0 สำหรับการแก้ปัญหาทุกชนิด เฉลี่ย
อุณหภูมิกลางวัน / กลางคืนเป็น 26/18 องศาเซลเซียสตามลำดับความชื้นสัมพัทธ์
เป็น 50e60% แสงสำหรับรอบกลางวัน / กลางคืนเป็น
16/8 ชั่วโมงและการสังเคราะห์แสงรังสีสูงสุดที่ใช้งานได้
ประมาณ 1,400 มิลลิโมล (โฟตอน) ม. ? 2 วินาที? 1 หลังจากวันที่ 7 ของการเจริญเติบโต
ต้นกล้าถูกยัดเยียดให้ความเครียดการขาดสารอาหาร หลังจากนั้น 14 วัน
หลังจากการใช้ความเครียด (21 วันหลังงอก) พร้อม
คลอโรฟิลเรืองแสง (PF) วัดได้ทำอย่างเต็มที่เมื่อวันที่ 9
ใบที่พัฒนาขึ้นสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง ในขั้นตอนนี้ (21 วันนับจากวัน
เกิด) อาการที่มองเห็นเพียงเล็กน้อยของการขาดสารอาหารที่
ถูกตั้งข้อสังเกต
2.2 การวัดการเรืองแสงคลอโรฟิล
ชั่วคราวภาพเหนี่ยวนำให้เกิดการเรืองแสงพร้อมในใบ
ถูกวัดโดย M-กฟภ. (มัลติฟังก์ชั่โรงงานประสิทธิภาพ Analyser,
Hansatech สหราชอาณาจักร) ในอีซีแอลที่ใช้ M-กฟภ. ความยาวคลื่น
ช่วงคือ (1) 635? 10 นาโนเมตรแสง actinic LED
(ไดโอดเปล่งแสง); (2) 820? 25 นาโนเมตรแสงปรับ
ไฟ LED และ (3) 735? 15 นาโนเมตรสำหรับไฟ LED สีแดงไกล; สำหรับหลัง
กรอง RG9 ยาวผ่านถูกใช้ในการลบแสงที่มองเห็น
ส่วนประกอบ (สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติมดูที่ Goltsev et al, 2009;. Strasser
et al., 2010) ก่อนที่จะวัดสัญญาณทดลองพืช
ถูกเก็บไว้ในที่มืดเป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาที วัดถูกพา
ออกมาบนพื้นผิว abaxial 3 ใบรับการพัฒนาอย่างเต็มที่ (บนกลาง
และล่างของพืช) ในส่วนตรงกลางของใบเลือก
คลอโรฟิล (Chl) เรืองแสงถูกบันทึกไว้หลังจากที่ส่องสว่าง
ด้วยแสง actinic สีแดง (635 นาโนเมตร 5000 มิลลิโมล HN ม. 2 หรือไม่ 1) DF มืด
จลนศาสตร์การพักผ่อนที่ถูกบันทึกไว้เป็นเวลา 3 หลังจากเปลี่ยน actinic
แสงออกจาก
สัญญาณที่วัดได้นำมาวิเคราะห์โดยการวิเคราะห์ M-กฟภ. ข้อมูล
รุ่น 5.4 ซอฟต์แวร์ (ซอฟต์แวร์นี้เป็นห้องปฏิบัติการที่ได้รับการออกแบบใน
ภาควิชาชีวฟิสิกส์และ Radiobiology, มหาวิทยาลัยโซเฟียโดย Petko
Chernev) .
2.3 ทดสอบ JIP พารามิเตอร์
จุดลักษณะของคลอโรฟิล photoinduced เรืองแสง
ชั่วคราวถูกนำมาใช้ในการคำนวณลักษณะเฉพาะของ
ขั้นตอนของการสังเคราะห์แสงให้เป็นไปตามขั้นตอนวิธี JIP ทดสอบ
อธิบายโดย Strasser et al, (2004, 2010) พารามิเตอร์วิเคราะห์
อธิบายไว้ในตารางที่ 3
2.4 การวิเคราะห์ทางสถิติ
การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการอย่างน้อย 9 ซ้ำและ
ข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์ทางสถิติ ไม่พารา Kruskale
วาลลิสหนึ่งในการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวโดยทหารถูกนำไปใช้โดยใช้ซอฟแวร์ v.3.5 Sigma สถิติ วิเคราะห์องค์ประกอบหลักได้ดำเนินการตามต่อ MatLab 7.5 กล่องเครื่องมือ
การแปล กรุณารอสักครู่..

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . พืชการเจริญเติบโตเงื่อนไข และข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ทดลองออกแบบ
( Zea mays L . ) พันธุ์ " มาริญอง " และมะเขือเทศ ( โซลานัม
lycopersicum L . ) พันธุ์ " มีว่า F1 " พืชปลูกในเรือนกระจกควบคุมด้วยคอมพิวเตอร์ 1 dm3 มืดแก้วหม้อเต็ม
กับการแก้ไขโฮกเลินสารละลายธาตุอาหาร ( ดูตารางที่ 1 และ 2
ส่วนประกอบของ uncompound สารละลาย A และ B ) โซลูชั่น
ถูกจัดโดยอากาศอย่างต่อเนื่อง และเปลี่ยนทุก 3 วัน
ปานกลาง pH ประมาณ 5.0 สำหรับโซลูชั่นทั้งหมดประเภท อุณหภูมิเฉลี่ย
วัน / คืน 26 / 18 องศาเซลเซียส ความชื้นสัมพัทธ์
คือ 50e60 % แสงในรอบวัน / คืน คือ 16 /
8 H , และสูงสุด photosynthetically ปราดเปรียวรังสีคือ
ประมาณ 1400 มิลลิโมล ( โฟตอน ) M 2 s 1 หลังจาก 7 วัน การเจริญเติบโต
ต้นกล้าถูกสารอาหารความเครียดขาด หลังจากนั้น 14 วัน
หลังจากความเครียดใบสมัคร ( 21 วันหลังงอก ) พร้อม
คลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์ ( PF ) วัดเสร็จในวันที่ 9 ครบ
พัฒนาใบสำหรับการรักษาแต่ละ ในขั้นตอนนี้ ( วัน 21
งอก ) อาการที่มองเห็นเพียงเล็กน้อยเท่านั้น สารอาหารที่พบข้อบกพร่อง
.
2.2 .
การวัดคลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์ภาพการชั่วคราวของการเรืองแสงในใบ
วัดจาก m-pea ( วิเคราะห์ประสิทธิภาพพืชอเนกประสงค์
hansatech , UK ) เครื่องมือใน m-pea อีซีความยาวคลื่น
ช่วงคือ ( 1 ) 635 10 นาโนเมตร สำหรับ LED ( ไดโอดเปล่งแสงแสง Actinic
) ; ( 2 ) 820 25 nm สำหรับปรับแสง
LED , และ ( 3 ) คุณ 15 nm สำหรับแสง LED สีแดงอยู่ เพราะหลัง
เป็น rg9 ยาวผ่านกรองใช้ลบองค์ประกอบแสง
มองเห็นใด ๆ ( รายละเอียดเพิ่มเติมดู goltsev et al . , 2009 ; สแตรสเซอร์
et al . , 2010 ) ก่อนวัดสัญญาณทดลองพืช
ถูกเก็บไว้ในที่มืด อย่างน้อย 30 นาที วัดได้กระทำ
ออกมาบนพื้นผิวที่อยู่ห่างจากแกน 3 การพัฒนาอย่างเต็มที่ใบ ( บน กลางและล่างของพืช
) ในส่วนตรงกลางของ
เลือกใบไม้คลอโรฟิลล์เอ ( CHL ) การบันทึกหลังจากไฟสีแดงอ่อน (
actinic 635 nm , 5000 มิลลิโมล HN M 2 s 1 ) DF มืด
ผ่อนคลายจลนศาสตร์ที่ถูกบันทึกไว้ 3 S หลังจากที่เปิดแสง Actinic
.
วัดสัญญาณ วิเคราะห์ข้อมูลโดยวิเคราะห์ m-pea-data
รุ่น 5.4 ซอฟต์แวร์ ซอฟต์แวร์นี้ออกแบบและฝ่ายห้องปฏิบัติการชีวฟิสิกส์
โคโยตี้ มหาวิทยาลัยโซเฟีย โดย petko
chernev )
23 . พารามิเตอร์การทดสอบจิ๊บ
ลักษณะจุด photoinduced คลอโรฟิลล์ฟลูออเรสเซนซ์
ชั่วคราวเพื่อใช้คำนวณลักษณะเฉพาะของ
เฟสแสงแสงตามไปจิบทดสอบขั้นตอนวิธี
อธิบายโดยสแตรสเซอร์ et al . ( ปี 2553 ) ทั้งหมดที่อธิบายไว้ใน ตารางที่ 3 ค่า
.
2.4 .
สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลทุกการทดลองอย่างน้อย 9
repetitions และวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติวิเคราะห์ ที่ไม่ใช้พารามิเตอร์ kruskale
วอลลิส การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว โดยตำแหน่งคือใช้ใช้ Sigma ซอฟต์แวร์ v.3.5 stat . การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักคือดำเนินการตามโปรแกรม 7.5 กล่องเครื่องมือ
การแปล กรุณารอสักครู่..
