Fig. 1. Multiplex PCR results using

Fig. 1. Multiplex PCR results using Listeria species type strains. M: 100-bp DNA ladder,
lane 1: L. grayi ATCC 19120, L. welshimeri ATCC 35897, L. ivanovii ATCC 19119,
L. monocytogenes ATCC 19115, L. seeligeri ATCC 35967, and L. innocua ATCC 33090, lane
2: L. grayi ATCC 19120, lane 3: L. welshimeri ATCC 35897, lane 4: L. ivanovii ATCC 19119,
lane 5: L. monocytogenes ATCC 19111, lane 6: L. monocytogenes ATCC 19113, lane
7: L. monocytogenes ATCC 19115, lane 8: L. monocytogenes ATCC 15313, lane
9: L. seeligeri ATCC 35967, lane 10: L. innocua ATCC 33090, lane 11: Negative control.
Table 2
Primer pairs sequence, target gene and source for multiplex PCR used in this study.
Species Gene Primer Sequences (50-30) PCR product size (bp) Primer concentration (mM) Reference
Listeria genus prs prs-F GCTGAAGAGATTGCGAAAGAAG 370 0.2 Doumith et al., 2004
prs-R CAAAGAAACCTTGGATTTGCGG
L. grayi Oxidoreductase JOgrayi-F GCGGATAAAGGTGTTCGGGTCAA 201 0.24 In this study
JOgrayi-R ATTTGCTATCGTCCGAGGCTAGG
L. innocua lin0464 lin0464-F CGCATTTATCGCCAAAACTC 749 1.2 Liu et al., 2003
lin0464-R TCGTGACATAGACGCGATTG
L. ivanovii namA liv22-228-F CGAATTCCTTATTCACTTGAGC 463 0.52 Liu et al., 2004b
liv22-228-R GGTGCTGCGAACTTAACTCA
L. monocytogenes lmo1030 lmo1030-F GCTTGTATTCACTTGGATTTGTCTGG 509 0.56 In this study
lmo1030-R ACCATCCGCATATCTCAGCCAACT
L. seeligeri lmo0333 lseelin-F GTACCTGCTGGGAGTACATA 673 1.36 In this study
lseelin-R CTGTCTCCATATCCGTACAG
L. welshimeri scrA lwe1801-F CGTGGCACAATAGCAATCTG 281 0.96 In this study
lwe1801-R GACATGCCTGCTGAACTAGA

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รูปที่ 1 Multiplex PCR ผลใช้ Listeria พันธุ์ชนิดสายพันธุ์ M: 100-bp บันได DNAเลน 1: L. grayi ATCC 19120, L. welshimeri ATCC 35897, L. ivanovii ATCC 19119สมอง L. ATCC 19115, L. seeligeri ATCC 35967 และ L. innocua ATCC 33090 เลน2: L. grayi ATCC 19120 เลน 3: L. welshimeri ATCC 35897 เลน 4: L. ivanovii ATCC 19119เลน 5: L. สมอง ATCC 19111 เลน 6: L. สมอง ATCC 19113 เลน7: L. สมอง ATCC 19115 เลน 8: L. สมอง ATCC 15313 เลน9: L. seeligeri ATCC 35967 เลน 10: L. innocua ATCC 33090 เลน 11: ลบควบคุมตารางที่ 2ลำดับคู่ไพรเมอร์ ยีนเป้าหมาย และแหล่งสำหรับมัลติเพล็กซ์ PCR ที่ใช้ในการศึกษานี้ขนาดผลิตภัณฑ์ PCR ลำดับยีนสีรองพื้น (50-30) สายพันธุ์ (bp) ความเข้มข้นของสีรองพื้น (มม.) อ้างอิงเช่นสกุลพีอาร์เอสพีอาร์เอส-F GCTGAAGAGATTGCGAAAGAAG 370 0.2 Doumith et al. 2004พีอาร์เอส-R CAAAGAAACCTTGGATTTGCGGL. grayi GCGGATAAAGGTGTTCGGGTCAA JOgrayi-F Oxidoreductase 201 0.24 ในการศึกษานี้JOgrayi R ATTTGCTATCGTCCGAGGCTAGGL. innocua lin0464 lin0464 F CGCATTTATCGCCAAAACTC 749 1.2 Liu et al. 2003lin0464 R TCGTGACATAGACGCGATTGL. ivanovii namA liv22-228-F CGAATTCCTTATTCACTTGAGC 463 0.52 Liu et al. 2004bliv22-228-R GGTGCTGCGAACTTAACTCAสมอง L. lmo1030 lmo1030 F GCTTGTATTCACTTGGATTTGTCTGG 509 0.56 ในการศึกษานี้lmo1030 R ACCATCCGCATATCTCAGCCAACTL. seeligeri GTACCTGCTGGGAGTACATA lmo0333 lseelin-F 673 1.36 ในการศึกษานี้lseelin R CTGTCTCCATATCCGTACAGL. welshimeri scrA CGTGGCACAATAGCAATCTG lwe1801-F 281 0.96 ในการศึกษานี้lwe1801 R GACATGCCTGCTGAACTAGA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มะเดื่อ. 1. ผล PCR Multiplex ใช้ชนิดพันธุ์เชื้อ Listeria สายพันธุ์ M: 100 bp บันไดดีเอ็นเอ
เลนที่ 1: ลิตร grayi ATCC 19120, L. welshimeri ATCC 35897, L. ivanovii ATCC 19119,
ลิตร monocytogenes ATCC 19115, L. seeligeri ATCC 35967 ลิตรและ innocua ATCC 33090 เลน
ที่ 2: ลิตร grayi ATCC 19120 เลน 3: แอล welshimeri ATCC 35897 เลนที่ 4: แอล ivanovii ATCC 19119,
เลนที่ 5: L. monocytogenes ATCC 19111 เลน 6: L. monocytogenes ATCC 19113 เลน
7: L. monocytogenes ATCC 19115 เลน 8: L. monocytogenes ATCC 15313 เลน
9: ลิตร seeligeri ATCC 35967 เลน 10: ลิตร innocua ATCC 33090 เลน 11 :. การควบคุมเชิงลบ
ตารางที่ 2
รองพื้นคู่ลำดับยีนเป้าหมายและแหล่งที่มาสำหรับ multiplex PCR ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้.
สปีชี่ยีนรองพื้นลำดับ (50-30) PCR ขนาดสินค้า (BP) ความเข้มข้นของไพรเมอร์ (mm) อ้างอิง
Listeria สกุล PRS PRS-F GCTGAAGAGATTGCGAAAGAAG 370 0.2 Doumith, et al., 2004
PRS-R CAAAGAAACCTTGGATTTGCGG
ลิตร grayi oxidoreductase JOgrayi-F 201 GCGGATAAAGGTGTTCGGGTCAA 0.24 ในการศึกษานี้
JOgrayi-R ATTTGCTATCGTCCGAGGCTAGG
ลิตร innocua lin0464 lin0464-F 749 CGCATTTATCGCCAAAACTC 1.2 หลิว, et al., 2003
lin0464-R TCGTGACATAGACGCGATTG
ลิตร ivanovii Nama liv22-228-F 463 CGAATTCCTTATTCACTTGAGC 0.52 หลิว et al., 2004b
liv22-228-R GGTGCTGCGAACTTAACTCA
ลิตร monocytogenes lmo1030 lmo1030-F 509 GCTTGTATTCACTTGGATTTGTCTGG 0.56 ในการศึกษานี้
lmo1030-R ACCATCCGCATATCTCAGCCAACT
ลิตร lmo0333 seeligeri lseelin-F 673 GTACCTGCTGGGAGTACATA 1.36 ในการศึกษานี้
lseelin-R CTGTCTCCATATCCGTACAG
ลิตร welshimeri SCRA lwe1801-F 281 CGTGGCACAATAGCAATCTG 0.96 ในการศึกษานี้
lwe1801-R GACATGCCTGCTGAACTAGA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูปที่ 1 ผลเทคนิค multoplex PCR ใช้ Listeria ชนิดชนิดสายพันธุ์ M : 100 คู่เบสดีเอ็นเอบันไดช่องที่ 1 : L grayi ATCC 19120 L welshimeri ATCC 35897 L ivanovii 19119 ) ,ฉัน monocytogenes ATCC 19115 L seeligeri ATCC 35967 และ L . innocua ATCC 33090 เลน2 . grayi ATCC 19120 เลน 3 : L welshimeri ATCC 35897 ซอย 4 : L ivanovii 19119 ) ,ช่องที่ 5 : L monocytogenes ATCC 19111 เลน 6 : L monocytogenes ATCC 19113 เลน7 : L monocytogenes ATCC 19115 ซอย 8 : L monocytogenes ATCC 15313 เลน9 . seeligeri ATCC 35967 ซอย 10 : L innocua ATCC 33090 ซอย 11 : ควบคุมลบตารางที่ 2ไพรเมอร์คู่ลำดับยีนเป้าหมายและแหล่งที่มาสำหรับ multiplex PCR ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ชนิดรองพื้นลำดับยีน ( 50-30 ) ขนาดผลิตภัณฑ์ PCR ไพรเมอร์ ( BP ) สมาธิ ( มม. ) อ้างอิงListeria สกุล PRS prs-f gctgaagagattgcgaaagaag 370 0.2 doumith et al . , 2547prs-r caaagaaaccttggatttgcggในการศึกษานี้ grayi อ ซิโดรีดักเทส jograyi-f gcggataaaggtgttcgggtcaa 201 0.24 Ljograyi-r atttgctatcgtccgaggctaggฉัน innocua lin0464 lin0464-f cgcatttatcgccaaaactc 749 1.2 Liu et al . , 2003lin0464-r tcgtgacatagacgcgattgฉัน ivanovii ชื่อ liv22-228-f cgaattccttattcacttgagc 463 0.52 Liu et al . , 2004bliv22-228-r ggtgctgcgaacttaactcaฉัน monocytogenes lmo1030 lmo1030-f gcttgtattcacttggatttgtctgg 509 515 ในการศึกษานี้lmo1030-r accatccgcatatctcagccaactฉัน seeligeri lmo0333 lseelin-f gtacctgctgggagtacata 673 , ในการศึกษานี้lseelin-r ctgtctccatatccgtacagฉัน welshimeri scra lwe1801-f cgtggcacaatagcaatctg 281 0.96 ในการศึกษานี้lwe1801-r gacatgcctgctgaactaga