1.5 mg of pcDNA3_GFP_PR-wt was used

1.5 mg of pcDNA3_GFP_PR-wt was used to transfect 3×105 293T cells at saquinavir concentrations ranging from 0 to 2 mM. In addition, an empty protease-recombinant vector was used as a negative control. Forty-eight hours post-transfection, cells were stained with annexin V (a marker of apoptosis) and 7-amino actinomycin D (7-AAD, an indicator of cellular necrosis). Staining was carried out according to general annexin V and 7-AAD staining procedures (BD Biosciences). The percentages of cells positive for annexin V and 7-AAD were determined by flow cytometry for GFP-positive cells.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1.5 มิลลิกรัมของ pcDNA3_GFP_PR wt ถูกใช้เพื่อ transfect 293T × 105 3 เซลล์ที่ความเข้มข้นซาควินาเวียร์ตั้งแต่ 0 ถึง 2 มม. นอกจากนี้ เวกเตอร์ recombinant โปรติเอสว่างที่ใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบ สี่สิบแปดชั่วโมงหลัง transfection เซลล์ถูกย้อม ด้วย annexin V (เครื่องหมายตาย) และอะมิโน 7 D actinomycin (7 AAD ตัวบ่งชี้ของเซลล์เนื้อร้าย) ย้อมสีดำเนินตามทั่วไป annexin V และขั้นตอนผม 7-AAD (BD ออก) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์บวก annexin V และ 7 AAD ดำเนินการ โดยการตรวจวิเคราะห์เซลล์ไหลสำหรับ GFP บวกเซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1.5 มิลลิกรัม pcDNA3_GFP_PR-WT ถูกใช้ในการ transfect 3 × 105 293T เซลล์ที่ระดับความเข้มข้น saquinavir ตั้งแต่ 0 ถึง 2 mm นอกจากนี้ยังมีที่ว่างเปล่าเวกเตอร์น้ำย่อย-recombinant ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ สี่สิบแปดชั่วโมงหลัง transfection เซลล์ถูกย้อมด้วยสี annexin V (เครื่องหมายของการตายของเซลล์) และ 7-Amino actinomycin D (7-อ๊าดตัวบ่งชี้ของเนื้อร้ายมือถือ) การย้อมสีได้ดำเนินการตาม annexin V ทั่วไปและอ๊าด 7 ขั้นตอนการย้อมสี (BD ชีววิทยาศาสตร์) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ในเชิงบวกสำหรับ annexin V และ 7-อ๊าดได้รับการพิจารณาโดย cytometry ไหลสำหรับเซลล์ GFP บวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1.5 มิลลิกรัม pcdna3_gfp_pr-wt ใช้ transfect 3 × 105 293t ซาควินาเวียร์เซลล์ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0 ถึง 2 มิลลิเมตร นอกจากนี้โปรตีนรีคอมบิแนนท์เวกเตอร์ที่ว่างเปล่าถูกใช้เป็นตัวควบคุมลบ สี่สิบแปดชั่วโมงโพสต์ transfection เซลล์ถูกย้อมด้วยสีของเซลล์ V ( เครื่องหมายของ apoptosis ) และ 7-amino แอกติโนมัยซินดี ( 7-aad , ตัวบ่งชี้ของเซลล์เนื้อร้าย ) การกระทำตามทั่วไปของเซลล์และ 7-aad staining ขั้นตอน ( BD BIOSCIENCES ) เปอร์เซ็นต์เซลล์บวกของเซลล์ V และ 7-aad ถูกกำหนดโดยเครื่องนับเซลล์สำหรับเซลล์บวก GFP .