A protocol for regenerating and sub

A protocol for regenerating and subsequent
in vitro flowering of an economical important and endangered
medicinal orchid, Dendrobium huoshanense, was
established mainly via indirect protocorm-like body (PLB)
formation. A four-step method was developed to induce
successful plant regeneration on 1/2 MS medium supplemented
with suitable plant growth regulators (PGRs). Step
1 (callus induction): the root tip explants (1 cm long) were
cultured at 1 mg l-1 2,4-D ? 1 mg l-1 TDZ for 3 months.
Step 2 (callus proliferation): the calli were subcultured with
a 1-month interval at 1 mg l-1 2,4-D ? 1 mg l-1 TDZ.
Step 3 (PLB induction): the calli were cultured at 2 mg l-1
NAA ? 1 mg l-1 BA for 2 months. Step 4 (plantlet conversion):
the 2-month-old PLBs were cultured at
0.1 mg l-1 IBA for 4 months. It took at least 6 months to
produce well-rooted regenerated plantlets with an average
of 3.2 roots and 3.6 leaves from the initial callus. The
6-month-old rooted plantlets were transferred onto PGRfree
1/2 MS medium for 6 months, and then potted with
Sphagnum moss for acclimatization. After 2 month of
culture, the survival rate was 100 %. The in vitro flowers
were obtained on the 8-month-old plantlets at 1 mg l-1
IBA, 5 mg l-1 IBA and 0.1 mg l-1 NAA, but the flowers
showed a lack of the gynandrium. The abnormity was
overcome by the aid of 5 mg l-1 TDZ, and subsequently,
the capsules formed without artificial pollination. This
protocol provides the basis for further investigation on cell
suspension, micropropagation, in vitro flowering and
breeding programs in Dendrobium huoshanense.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โพรโทคอลที่สร้างใหม่ และต่อมาดอกในหลอดทดลองของประหยัดที่สำคัญ และใกล้สูญพันธุ์ยากล้วยไม้ สกุลหวาย huoshanense ถูกก่อตั้งส่วนใหญ่ผ่านทางร่างกายทางอ้อมเหมือน protocorm (PLB)การก่อ วิธีการขั้นตอนที่สี่ได้รับการพัฒนาเพื่อก่อให้เกิดฟื้นฟูพืชที่ประสบความสำเร็จบนกลาง 1/2 MS เสริมมีการควบคุมการเจริญเติบโตของพืชที่เหมาะสม (PGRs) ขั้นตอนที่1 (เหนี่ยวนำแคลลัส): ถูกเฌลปลายราก (ยาว 1 ซม.)ล้างที่ 1 มก. l-1 2, 4-D 1 มก. TDZ l-1 3 เดือนขั้นตอนที่ 2 (แคลลัสแพร่กระจาย): เอเรียถูก subcultured กับช่วง 1-เดือนที่ 1 มก. l-1 2, 4-D 1 มก. l-1 TDZขั้นตอนที่ 3 (เหนี่ยวนำ PLB): เอเรียถูกล้างที่ l-1 2 มิลลิกรัมราดหน้า 1 มก. l-1 BA 2 เดือน ขั้นตอนที่ 4 (plantlet แปลง):PLBs อายุ 2 เดือนถูกล้างที่0.1 มก. IBA l-1 4 เดือน มันต้องใช้เวลาอย่างน้อย 6 เดือนถึงผลิตดีรากอาศัย plantlets ซึ่งมีค่าเฉลี่ย3.2 รากและใบ 3.6 จากแคลลัสต้น การอายุ 6 เดือนราก plantlets ถูกโอนไปยัง PGRfreeกลาง 1/2 MS 6 เดือน และไม้กระถางแล้ว ด้วยฤาษีสำหรับ acclimatization หลังจาก 2 เดือนวัฒนธรรม อัตราการรอดตาย 100% ได้ ดอกไม้ในหลอดทดลองได้รับ plantlets อายุ 8 เดือนที่ 1 มก. l-1IBA, 5 มก. IBA l-1 และ 0.1 มก. l-1 ราดหน้า แต่ดอกไม้แสดงให้เห็นว่าการขาดของ gynandrium Abnormity การแก้ไขเอาชนะ by the aid of 5 mg l-1 TDZ แล้ว ก็แคปซูลที่เกิดขึ้นโดยไม่ต้องผสมเกสรประดิษฐ์ นี้โพรโทคอลให้ข้อมูลพื้นฐานสำหรับการสืบสวนเพิ่มเติมบนเซลล์ระงับ micropropagation ในดอกในหลอดทดลอง และโปรแกรมปรับปรุงพันธุ์ในสกุลหวาย huoshanense

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรโตคอลสำหรับการปฏิรูปและต่อมา
ออกดอกในหลอดทดลองที่มีความสำคัญและใกล้สูญพันธุ์ประหยัด
กล้วยไม้สมุนไพรกล้วยไม้สกุลหวาย huoshanense ได้รับการ
จัดตั้งขึ้นส่วนใหญ่ผ่านทางอ้อม protocorm เหมือนร่างกาย (PLB)
การก่อตัว วิธีการขั้นตอนที่สี่ได้รับการพัฒนาเพื่อก่อให้เกิด
การฟื้นฟูโรงงานที่ประสบความสำเร็จใน 1/2 สูตร MS เสริม
ด้วยการควบคุมการเจริญเติบโตของพืชที่เหมาะสม (PGRs) ขั้นตอนที่
1 (แคลลัสเหนี่ยวนำ): ผู้ชิ้นส่วนปลายราก (ยาวประมาณ 1 ซม.) ได้รับการ
เพาะเลี้ยงที่ L-1 2,4-D 1 มิลลิกรัม? 1 มิลลิกรัม L-1 TDZ 3 เดือน.
ขั้นตอนที่ 2 (การเพิ่มจำนวนแคลลัส): แคลลัสที่ถูกเลี้ยงด้วย
ช่วงเวลา 1 เดือนที่ L-1 2,4-D 1 มิลลิกรัม? 1 มิลลิกรัม L-1 TDZ.
ขั้นตอนที่ 3 (PLB เหนี่ยวนำ): แคลลัสที่ถูกเพาะเลี้ยงที่ 2 มิลลิกรัม L-1
NAA? 1 มิลลิกรัม L-1 บริติชแอร์เวย์เป็นเวลา 2 เดือน ขั้นตอนที่ 4 (แปลงต้น):
PLBs 2 เดือนเก่าถูกเพาะเลี้ยงที่
0.1 มิลลิกรัม L-1 IBA เป็นเวลา 4 เดือน มันต้องใช้เวลาอย่างน้อย 6 เดือนในการ
ผลิตที่ดีที่หยั่งรากต้นกล้าสร้างใหม่ที่มีค่าเฉลี่ย
3.2 และ 3.6 รากใบจากแคลลัสเริ่มต้น
ต้นราก 6 เดือนเก่าถูกโอนไปยัง PGRfree
1/2 MS กลางเป็นเวลา 6 เดือนแล้วกระถางกับ
มอสมอสสำหรับเคยชินกับสภาพ หลังจากนั้น 2 เดือน
วัฒนธรรมอัตราการรอดตายได้ 100% ในหลอดทดลองดอกไม้
ที่ได้รับในต้น 8 เดือนเก่าวันที่ 1 มก. L-1
IBA, 5 มิลลิกรัม L-1 IBA และ 0.1 mg L-1 NAA แต่ดอกไม้
ที่แสดงให้เห็นถึงการขาดความ gynandrium ผิดปกติถูก
ครอบงำโดยความช่วยเหลือของ 5 มิลลิกรัม L-1 TDZ และต่อมา
แคปซูลที่เกิดขึ้นโดยไม่ต้องผสมเกสรเทียม นี้
โปรโตคอลพื้นฐานสำหรับการตรวจสอบเพิ่มเติมเกี่ยวกับเซลล์
ระงับขยายพันธุ์ในหลอดทดลองการออกดอกและ
โปรแกรมการปรับปรุงพันธุ์กล้วยไม้ใน huoshanense

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรโตคอลสำหรับ regenerating และต่อการออกดอกของเศรษฐกิจที่สำคัญและอันตรายเป็นกล้วยไม้สกุลหวาย huoshanense ,ก่อตั้งขึ้นส่วนใหญ่ผ่านทางอ้อมต่อร่างกาย ( plb ) เช่นการสร้าง วิธีการสี่ขั้นตอนคือการพัฒนาเพื่อจูงการฟื้นฟูโรงงานที่ประสบความสำเร็จ ใน 1 / 2 MSเหมาะกับสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืช ( ของ ) ขั้นตอน1 ( ชักนำ ) : ปลายรากฟัน เลี้ยง ( ยาว 1 ซม. ) ได้แก่สูตรที่ 1 มก. L-1 ที่เติม 2 , 4-D ? 1 มก. L-1 TDZ สำหรับ 3 เดือนขั้นตอนที่ 2 ( เลี้ยงแคลลัส subcultured proliferation ) : กับเป็น 1 เดือน ช่วงที่ 1 มก. L-1 ที่เติม 2 , 4-D ? 1 มก. L-1 TDZ .ขั้นตอนที่ 3 ( plb induction ) : เพาะเลี้ยงแคลลัสที่ 2 มก. L-1นี่ ? L-1 BA 1 มิลลิกรัมเป็นเวลา 2 เดือน ขั้นตอนที่ 4 ( แปลงใหม่ )การ 2-month-old อาหารเพาะเลี้ยงที่0.1 L-1 มก. IBA เป็นเวลา 4 เดือน มันใช้เวลาอย่างน้อย 6 เดือนผลิตดี รากต้นเฉลี่ยได้3.2 ใบรากและ 3.6 จากแคลลัสเบื้องต้น ที่6 เดือน รากต้นเป็นโอนไปยัง pgrfree1 / 2 MS เป็นเวลา 6 เดือน แล้ว กระถางด้วยพืชมอสมอสสำหรับการ . หลังจาก 2 เดือนของวัฒนธรรม , อัตราการรอดตาย 100% ในหลอดทดลอง ดอกไม้ที่ได้รับใน 8-month-old ต้นที่ 1 มก. L-1IBA 5 มก. L-1 IBA และ NAA 0.1 มก. L-1 แต่ดอกไม้มีการขาดของ gynandrium . ที่พิกล คือเอาชนะด้วยความช่วยเหลือของ L-1 TDZ 5 มิลลิกรัม และต่อมาแคปซูลขึ้นโดยไม่มีการผสมเกสรดอกไม้ประดิษฐ์ นี้โปรโตคอลเป็นพื้นฐานสำหรับการสอบสวนเพิ่มเติมเกี่ยวกับเซลล์ช่วงล่าง การขยายพันธุ์ในหลอดทดลองและออกดอกโปรแกรมในกล้วยไม้สกุลหวายพันธุ์ huoshanense .