- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
2.4. Antioxidant activities of the
2.4. Antioxidant activities of the white tea extract (WTE)
2.4.1. Ferric reducing antioxidant power
The FRAP assay measures the reducing potential of antioxidants by reaction with the ferric tripyridyltriazine (Fe3+–TPTZ) complex,producing a blue colour from the ferrous form that can be detected by absorbance at 593 nm. Antioxidant compounds that act as reducing agents exert their effect by donating a hydrogen atom to the ferric complex, thus breaking the radical chain reaction.
The Fe3+ reducing power (FRAP) of the extract was determined by the method of with slight modifications. The volumes were scaled down to accommodate microtiter plate volumes. The FRAP reagent was prepared by mixing 10 ml of 300 mM acetate buffer with 1 ml of 10 mM TPTZ (2,4,6 tripyridyl-S-triazine) in 40 mM of HCl and 1 ml of 20 mM of FeCl3.6H2O. Then 3 ll of tea extract, standard or positive control and 9 ll of water were added to 90 ll of FRAP reagent. Absorbance readings were measured instantly upon addition of the FRAP reagent at 593 nm every 10 s for 4 min. The ferric reducing activity was determined by plotting a standard curve of FeSO4.7H2O (0–1000 lmol/ l). Results were expressed as mmol ferric reducing activity of theextracts per g of dried extract.
2.4.2. DPPH radical scavenging activity
Antioxidant activities of the white tea extracts (WTE) were estimated by measuring their scavenging capacity against the DPPH radical Tea extract (20 ll) was added to 120 ll of a 0.004% MeOH solution of DPPH. Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid) was used as standard. Absorbance at 517 nm was determined after 30 min incubation
in dark at room temperature, and the percentage of inhibitionwas calculated as [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples. A graph of the DPPH radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted. The IC50 value denotes the effective concentration of sample used to reduce 50% of available DPPH radicals. In the DPPH radical scavenging assay, the deep violet colour of DPPH is reduced to a light yellow colour due to the abstraction of hydrogen atoms from the antioxidant compound
2.4.3. Hydroxyl radical scavenging activity
The effect of hydroxyl radicals was estimated by using the 2- deoxy-D-ribose oxidation method according to the modified
method established by The hydroxyl radical assay is based on the principle that H2O2 in the presence of Fe+3–EDTA, at pH 7.4, generates free radicals which can be measured by using deoxyribose. The following reagents were mixed with 200 ll of sample solution of various concentrations in the stated order: 200 ll of FeCl3 100 Mm, 200 ll of 1.25 mM H2O2, 200 ll of 2-deoxy D-ribose, 2.5 mM, and 200 ll of 100 mM vitamin C. The reaction mixture was incubated at 37 _C for 1 h. Then, 100 ll of a 0.5% TBA (thiobarbituric acid) diluted with NaOH (0.025 M) and 100 ll of a 2.8% TCA (trichloroacetic acid) were added and the mixtures were placed into a temperature-controlled water bath at 100 _C for 30 min. This was followed by cooling in ice to room temperature,and then absorbance at 532 nm was measured. All values were determined in triplicate. The percentage of hydroxyl radical scavenging activity was calculated using the following equation: [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples.
2.4.4. Nitric oxide radical scavenging activity
Nitric oxide radical scavenging activity was determined according to the method described by For the estimation, 50 ll of sodium nitroprusside (SNP, 5 mM) was added to 50 ll of various concentrations of the samples. Mixtures were incubated under visible polychromatic light for 1 h, and then 100 ll of Griess reagent was added to the mixtures and incubated for a further 5 min and the absorbance measured at 532 nm. Trolox was used as the standard. To prepare Griess reagent an equal amount of SA (1% sulphanilamide, 5% H3PO4) and NED (0.1%N-(1-naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (NED)) were mixed. The nitric oxide scavenged (%) was calculated using following formula: Nitric oxide radical scavenged; % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard. A graph of nitric oxide radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted.
2.4.5. Superoxide anion radical scavenging activity
The superoxide anion radical scavenging activity of the sample was investigated by the method of .In this estimation, 50 ll of NADH (468 lM), 50 ll NBT (150 lM) and 50 ll phenazine methasulphate (PMS, 60 lM) were added to the various concentrations of the samples. All the above reagents were diluted in PBS (pH 7.4). The mixtures were incubated for 15 min in the dark and the absorbance measured at 560 nm. Trolox was used as standard and catechin was used as positive control. The superoxide anion radical scavenging capacity was calculated using the following equation: Superoxide anions scavenging activity % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard.
2.4.1. Ferric reducing antioxidant power
The FRAP assay measures the reducing potential of antioxidants by reaction with the ferric tripyridyltriazine (Fe3+–TPTZ) complex,producing a blue colour from the ferrous form that can be detected by absorbance at 593 nm. Antioxidant compounds that act as reducing agents exert their effect by donating a hydrogen atom to the ferric complex, thus breaking the radical chain reaction.
The Fe3+ reducing power (FRAP) of the extract was determined by the method of with slight modifications. The volumes were scaled down to accommodate microtiter plate volumes. The FRAP reagent was prepared by mixing 10 ml of 300 mM acetate buffer with 1 ml of 10 mM TPTZ (2,4,6 tripyridyl-S-triazine) in 40 mM of HCl and 1 ml of 20 mM of FeCl3.6H2O. Then 3 ll of tea extract, standard or positive control and 9 ll of water were added to 90 ll of FRAP reagent. Absorbance readings were measured instantly upon addition of the FRAP reagent at 593 nm every 10 s for 4 min. The ferric reducing activity was determined by plotting a standard curve of FeSO4.7H2O (0–1000 lmol/ l). Results were expressed as mmol ferric reducing activity of theextracts per g of dried extract.
2.4.2. DPPH radical scavenging activity
Antioxidant activities of the white tea extracts (WTE) were estimated by measuring their scavenging capacity against the DPPH radical Tea extract (20 ll) was added to 120 ll of a 0.004% MeOH solution of DPPH. Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid) was used as standard. Absorbance at 517 nm was determined after 30 min incubation
in dark at room temperature, and the percentage of inhibitionwas calculated as [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples. A graph of the DPPH radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted. The IC50 value denotes the effective concentration of sample used to reduce 50% of available DPPH radicals. In the DPPH radical scavenging assay, the deep violet colour of DPPH is reduced to a light yellow colour due to the abstraction of hydrogen atoms from the antioxidant compound
2.4.3. Hydroxyl radical scavenging activity
The effect of hydroxyl radicals was estimated by using the 2- deoxy-D-ribose oxidation method according to the modified
method established by The hydroxyl radical assay is based on the principle that H2O2 in the presence of Fe+3–EDTA, at pH 7.4, generates free radicals which can be measured by using deoxyribose. The following reagents were mixed with 200 ll of sample solution of various concentrations in the stated order: 200 ll of FeCl3 100 Mm, 200 ll of 1.25 mM H2O2, 200 ll of 2-deoxy D-ribose, 2.5 mM, and 200 ll of 100 mM vitamin C. The reaction mixture was incubated at 37 _C for 1 h. Then, 100 ll of a 0.5% TBA (thiobarbituric acid) diluted with NaOH (0.025 M) and 100 ll of a 2.8% TCA (trichloroacetic acid) were added and the mixtures were placed into a temperature-controlled water bath at 100 _C for 30 min. This was followed by cooling in ice to room temperature,and then absorbance at 532 nm was measured. All values were determined in triplicate. The percentage of hydroxyl radical scavenging activity was calculated using the following equation: [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples.
2.4.4. Nitric oxide radical scavenging activity
Nitric oxide radical scavenging activity was determined according to the method described by For the estimation, 50 ll of sodium nitroprusside (SNP, 5 mM) was added to 50 ll of various concentrations of the samples. Mixtures were incubated under visible polychromatic light for 1 h, and then 100 ll of Griess reagent was added to the mixtures and incubated for a further 5 min and the absorbance measured at 532 nm. Trolox was used as the standard. To prepare Griess reagent an equal amount of SA (1% sulphanilamide, 5% H3PO4) and NED (0.1%N-(1-naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (NED)) were mixed. The nitric oxide scavenged (%) was calculated using following formula: Nitric oxide radical scavenged; % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard. A graph of nitric oxide radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted.
2.4.5. Superoxide anion radical scavenging activity
The superoxide anion radical scavenging activity of the sample was investigated by the method of .In this estimation, 50 ll of NADH (468 lM), 50 ll NBT (150 lM) and 50 ll phenazine methasulphate (PMS, 60 lM) were added to the various concentrations of the samples. All the above reagents were diluted in PBS (pH 7.4). The mixtures were incubated for 15 min in the dark and the absorbance measured at 560 nm. Trolox was used as standard and catechin was used as positive control. The superoxide anion radical scavenging capacity was calculated using the following equation: Superoxide anions scavenging activity % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard.
0/5000
2.4 การกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของชาขาวสกัด (WTE)2.4.1. เฟอร์ลดอนุมูลอิสระทดสอบ FRAP วัดศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระลดลง โดยปฏิกิริยากับ tripyridyltriazine เฟอร์ (Fe3 + -TPTZ) คอมเพล็กซ์ ผลิตสีน้ำเงินจากแบบเหล็กที่สามารถตรวจพบ โดย absorbance ที่ 593 nm สารต้านอนุมูลอิสระที่ทำหน้าที่เป็นตัวแทนลดลงแรงผลที่เกิดขึ้น โดยบริจาคอะตอมไฮโดรเจนจะซับซ้อนเฟอร์ จึง ทำลายปฏิกิริยาลูกโซ่รุนแรง Fe3 + ลดลงอำนาจ (FRAP) ของการดึงข้อมูลที่ถูกกำหนด โดยวิธีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยด้วย ไดรฟ์ข้อมูลถูกปรับลงเพื่อรองรับปริมาณจาน microtiter รีเอเจนต์ FRAP ถูกเตรียม โดยผสม 10 ml ของบัฟเฟอร์ acetate 300 มม.กับ 1 ml 10 มม. TPTZ (2,4,6 tripyridyl-S-triazine) ใน HCl และ 1 ml ของของ FeCl3.6H2O 20 มม. 40 มม. 3 แล้วจะชาแยก ควบคุมมาตรฐาน หรือค่าบวกและ 9 น้ำจะถูกเพิ่มให้จะของรีเอเจนต์ FRAP อ่าน absorbance ที่วัดทันทีเมื่อมีการเพิ่มของรีเอเจนต์ FRAP ที่ 593 nm ทุก 10 s สำหรับ 4 min กิจกรรมลดลงเฟอร์ถูกกำหนด โดยการพล็อตเส้นโค้งมาตรฐานของ FeSO4.7H2O (0-1000 lmol / l) ผลลัพธ์ที่แสดงเป็น mmol เฟอร์ลดกิจกรรมของ theextracts ต่อกรัมของสารสกัดแห้ง2.4.2. DPPH รุนแรง scavenging กิจกรรมกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากชาขาว (WTE) ถูกประเมิน โดยการวัดกำลังการผลิต scavenging กับสารสกัดใบชารุนแรงของ DPPH (20 จะ) ถูกเพิ่ม 120 จะของโซลูชันทานอ 0.004% ของ DPPH Trolox (กรด 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic) ถูกใช้เป็นมาตรฐาน Absorbance ที่ 517 nm กำหนดหลังจากฟักตัว 30 นาทีในความมืดที่อุณหภูมิห้อง และเปอร์เซ็นต์ของ inhibitionwas ที่คำนวณเป็น [(A0 – A1)/A0] _ 100 ที่ A0 absorbance ของตัวควบคุม (dH2O), และ A1 absorbance ของตัวอย่าง ถูกพล็อตกราฟของ DPPH รัศมี scavenged (%) เทียบกับความเข้มข้นของตัวอย่าง ค่า IC50 แสดงผลความเข้มข้นของตัวอย่างที่ใช้ในการลด 50% ของอนุมูล DPPH ว่าง ใน DPPH scavenging assay รุนแรง สีอมม่วงลึกของ DPPH ลดลงจะมีสีเหลืองอ่อนเนื่องจาก abstraction ของอะตอมไฮโดรเจนจากสารต้านอนุมูลอิสระผสม 2.4.3 กิจกรรม scavenging รุนแรงไฮดรอกซิลผลของอนุมูลไฮดรอกซิลถูกประเมิน โดยใช้วิธี 2-deoxy-D-ribose ออกซิเดชันตามที่แก้ไขวิธีก่อตั้ง โดยไฮดรการวิเคราะห์จะยึดตามหลักว่า H2O2 ในต่อหน้าของ Fe + 3 – EDTA ที่ pH 7.4 สร้างอนุมูลอิสระซึ่งสามารถวัด โดยใช้ deoxyribose Reagents ดังต่อไปนี้ถูกผสมกับ 200 จะของตัวอย่างของความเข้มข้นต่าง ๆ ตามลำดับที่ระบุ: 200 จะ FeCl3 100 มม. 200 จะ 1.25 มม. H2O2, 200 จะ 2 deoxy D-ribose, 2.5 mM และ 200 จะ 100 มม. C. วิตามิน ผสมปฏิกิริยาถูก incubated ที่ _C 37 สำหรับ 1 h 100 แล้ว จะของ TBA 0.5% (กรด thiobarbituric) ผสมกับ NaOH (0.025 M) และ 100 จะ 2.8% TCA (trichloroacetic กรด) ถูกเพิ่มเข้ามาและส่วนผสมถูกวางลงในอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิที่ 100 _C ใน 30 นาที นี้ถูกตาม ด้วยการทำความเย็นในน้ำแข็งให้อุณหภูมิห้อง และ absorbance ที่ 532 nm ที่วัด มีกำหนดค่าทั้งหมดใน triplicate เปอร์เซ็นต์ของไฮดรอกซิลกิจกรรม scavenging รุนแรงถูกคำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้: [(A0 – A1)/A0] _ 100 ที่ A0 absorbance ของตัวควบคุม (dH2O), และ A1 absorbance ของตัวอย่าง2.4.4 การไนตริกออกไซด์รุนแรง scavenging กิจกรรมกิจกรรม scavenging รุนแรงไนตริกออกไซด์ได้กำหนดตามวิธีการอธิบายไว้โดยในการประเมิน 50 จะ nitroprusside โซเดียม (SNP, 5 มม.) ถูกเพิ่ม 50 จะของความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง ส่วนผสมที่ incubated ภายใต้แสงเห็น polychromatic เพิ่มส่วนผสม 1 h และ 100 แล้วจะของรีเอเจนต์ Griess และ incubated สำหรับเพิ่มเติม 5 นาที และวัด absorbance ที่ 532 nm Trolox ถูกใช้เป็นมาตรฐาน เตรียมรีเอเจนต์ Griess จำนวนเท่าของ SA (sulphanilamide 1%, 5% H3PO4) และเน็ด (0.1%N-(1-naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (NED)) รวม ไนตริกออกไซด์ scavenged (%) ถูกคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้: รัศมีไนตริกออกไซด์ scavenged %ผ ฝ๐A0 _ A1 = A0_ _ 100 ที่ A0 absorbance ของตัวควบคุม (dH2O), และ A1 absorbance ของสารสกัด/มาตรฐาน ถูกพล็อตกราฟของไนตริกออกไซด์รุนแรง scavenged (%) เทียบกับความเข้มข้นของตัวอย่าง2.4.5. ซูเปอร์ออกไซด์ anion รุนแรง scavenging กิจกรรมซูเปอร์ออกไซด์ anion รุนแรง scavenging กิจกรรมของตัวอย่างถูกตรวจสอบ โดยวิธีการในการประเมินนี้ 50 จะของ NADH (468 lM), 50 จะเอ็นบีที (150 lM) และ 50 จะ phenazine methasulphate (PMS, 60 lM) ได้เพิ่มความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง Reagents ข้างต้นทั้งหมดถูกทำให้เจือจางใน PBS (pH 7.4) น้ำยาผสมจะถูก incubated สำหรับ 15 นาทีในมืดและ absorbance วัดที่ 560 nm ใช้ Trolox เป็นมาตรฐาน และใช้เป็นตัวควบคุมบวกสารสกัดจาก ซูเปอร์ออกไซด์ anion รุนแรง scavenging กำลังการผลิตถูกคำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้: ซูเปอร์ออกไซด์ anions scavenging กิจกรรม%ผ ฝ๐A0 _ A1 _ A0_ 100 = ที่ A0 absorbance ของตัวควบคุม (dH2O), และ A1 absorbance ของสารสกัด/มาตรฐาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4. Antioxidant activities of the white tea extract (WTE)
2.4.1. Ferric reducing antioxidant power
The FRAP assay measures the reducing potential of antioxidants by reaction with the ferric tripyridyltriazine (Fe3+–TPTZ) complex,producing a blue colour from the ferrous form that can be detected by absorbance at 593 nm. Antioxidant compounds that act as reducing agents exert their effect by donating a hydrogen atom to the ferric complex, thus breaking the radical chain reaction.
The Fe3+ reducing power (FRAP) of the extract was determined by the method of with slight modifications. The volumes were scaled down to accommodate microtiter plate volumes. The FRAP reagent was prepared by mixing 10 ml of 300 mM acetate buffer with 1 ml of 10 mM TPTZ (2,4,6 tripyridyl-S-triazine) in 40 mM of HCl and 1 ml of 20 mM of FeCl3.6H2O. Then 3 ll of tea extract, standard or positive control and 9 ll of water were added to 90 ll of FRAP reagent. Absorbance readings were measured instantly upon addition of the FRAP reagent at 593 nm every 10 s for 4 min. The ferric reducing activity was determined by plotting a standard curve of FeSO4.7H2O (0–1000 lmol/ l). Results were expressed as mmol ferric reducing activity of theextracts per g of dried extract.
2.4.2. DPPH radical scavenging activity
Antioxidant activities of the white tea extracts (WTE) were estimated by measuring their scavenging capacity against the DPPH radical Tea extract (20 ll) was added to 120 ll of a 0.004% MeOH solution of DPPH. Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid) was used as standard. Absorbance at 517 nm was determined after 30 min incubation
in dark at room temperature, and the percentage of inhibitionwas calculated as [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples. A graph of the DPPH radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted. The IC50 value denotes the effective concentration of sample used to reduce 50% of available DPPH radicals. In the DPPH radical scavenging assay, the deep violet colour of DPPH is reduced to a light yellow colour due to the abstraction of hydrogen atoms from the antioxidant compound
2.4.3. Hydroxyl radical scavenging activity
The effect of hydroxyl radicals was estimated by using the 2- deoxy-D-ribose oxidation method according to the modified
method established by The hydroxyl radical assay is based on the principle that H2O2 in the presence of Fe+3–EDTA, at pH 7.4, generates free radicals which can be measured by using deoxyribose. The following reagents were mixed with 200 ll of sample solution of various concentrations in the stated order: 200 ll of FeCl3 100 Mm, 200 ll of 1.25 mM H2O2, 200 ll of 2-deoxy D-ribose, 2.5 mM, and 200 ll of 100 mM vitamin C. The reaction mixture was incubated at 37 _C for 1 h. Then, 100 ll of a 0.5% TBA (thiobarbituric acid) diluted with NaOH (0.025 M) and 100 ll of a 2.8% TCA (trichloroacetic acid) were added and the mixtures were placed into a temperature-controlled water bath at 100 _C for 30 min. This was followed by cooling in ice to room temperature,and then absorbance at 532 nm was measured. All values were determined in triplicate. The percentage of hydroxyl radical scavenging activity was calculated using the following equation: [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples.
2.4.4. Nitric oxide radical scavenging activity
Nitric oxide radical scavenging activity was determined according to the method described by For the estimation, 50 ll of sodium nitroprusside (SNP, 5 mM) was added to 50 ll of various concentrations of the samples. Mixtures were incubated under visible polychromatic light for 1 h, and then 100 ll of Griess reagent was added to the mixtures and incubated for a further 5 min and the absorbance measured at 532 nm. Trolox was used as the standard. To prepare Griess reagent an equal amount of SA (1% sulphanilamide, 5% H3PO4) and NED (0.1%N-(1-naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (NED)) were mixed. The nitric oxide scavenged (%) was calculated using following formula: Nitric oxide radical scavenged; % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard. A graph of nitric oxide radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted.
2.4.5. Superoxide anion radical scavenging activity
The superoxide anion radical scavenging activity of the sample was investigated by the method of .In this estimation, 50 ll of NADH (468 lM), 50 ll NBT (150 lM) and 50 ll phenazine methasulphate (PMS, 60 lM) were added to the various concentrations of the samples. All the above reagents were diluted in PBS (pH 7.4). The mixtures were incubated for 15 min in the dark and the absorbance measured at 560 nm. Trolox was used as standard and catechin was used as positive control. The superoxide anion radical scavenging capacity was calculated using the following equation: Superoxide anions scavenging activity % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard.
2.4.1. Ferric reducing antioxidant power
The FRAP assay measures the reducing potential of antioxidants by reaction with the ferric tripyridyltriazine (Fe3+–TPTZ) complex,producing a blue colour from the ferrous form that can be detected by absorbance at 593 nm. Antioxidant compounds that act as reducing agents exert their effect by donating a hydrogen atom to the ferric complex, thus breaking the radical chain reaction.
The Fe3+ reducing power (FRAP) of the extract was determined by the method of with slight modifications. The volumes were scaled down to accommodate microtiter plate volumes. The FRAP reagent was prepared by mixing 10 ml of 300 mM acetate buffer with 1 ml of 10 mM TPTZ (2,4,6 tripyridyl-S-triazine) in 40 mM of HCl and 1 ml of 20 mM of FeCl3.6H2O. Then 3 ll of tea extract, standard or positive control and 9 ll of water were added to 90 ll of FRAP reagent. Absorbance readings were measured instantly upon addition of the FRAP reagent at 593 nm every 10 s for 4 min. The ferric reducing activity was determined by plotting a standard curve of FeSO4.7H2O (0–1000 lmol/ l). Results were expressed as mmol ferric reducing activity of theextracts per g of dried extract.
2.4.2. DPPH radical scavenging activity
Antioxidant activities of the white tea extracts (WTE) were estimated by measuring their scavenging capacity against the DPPH radical Tea extract (20 ll) was added to 120 ll of a 0.004% MeOH solution of DPPH. Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid) was used as standard. Absorbance at 517 nm was determined after 30 min incubation
in dark at room temperature, and the percentage of inhibitionwas calculated as [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples. A graph of the DPPH radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted. The IC50 value denotes the effective concentration of sample used to reduce 50% of available DPPH radicals. In the DPPH radical scavenging assay, the deep violet colour of DPPH is reduced to a light yellow colour due to the abstraction of hydrogen atoms from the antioxidant compound
2.4.3. Hydroxyl radical scavenging activity
The effect of hydroxyl radicals was estimated by using the 2- deoxy-D-ribose oxidation method according to the modified
method established by The hydroxyl radical assay is based on the principle that H2O2 in the presence of Fe+3–EDTA, at pH 7.4, generates free radicals which can be measured by using deoxyribose. The following reagents were mixed with 200 ll of sample solution of various concentrations in the stated order: 200 ll of FeCl3 100 Mm, 200 ll of 1.25 mM H2O2, 200 ll of 2-deoxy D-ribose, 2.5 mM, and 200 ll of 100 mM vitamin C. The reaction mixture was incubated at 37 _C for 1 h. Then, 100 ll of a 0.5% TBA (thiobarbituric acid) diluted with NaOH (0.025 M) and 100 ll of a 2.8% TCA (trichloroacetic acid) were added and the mixtures were placed into a temperature-controlled water bath at 100 _C for 30 min. This was followed by cooling in ice to room temperature,and then absorbance at 532 nm was measured. All values were determined in triplicate. The percentage of hydroxyl radical scavenging activity was calculated using the following equation: [(A0 – A1)/A0] _ 100, where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the samples.
2.4.4. Nitric oxide radical scavenging activity
Nitric oxide radical scavenging activity was determined according to the method described by For the estimation, 50 ll of sodium nitroprusside (SNP, 5 mM) was added to 50 ll of various concentrations of the samples. Mixtures were incubated under visible polychromatic light for 1 h, and then 100 ll of Griess reagent was added to the mixtures and incubated for a further 5 min and the absorbance measured at 532 nm. Trolox was used as the standard. To prepare Griess reagent an equal amount of SA (1% sulphanilamide, 5% H3PO4) and NED (0.1%N-(1-naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (NED)) were mixed. The nitric oxide scavenged (%) was calculated using following formula: Nitric oxide radical scavenged; % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard. A graph of nitric oxide radical scavenged (%) vs. concentration of sample was plotted.
2.4.5. Superoxide anion radical scavenging activity
The superoxide anion radical scavenging activity of the sample was investigated by the method of .In this estimation, 50 ll of NADH (468 lM), 50 ll NBT (150 lM) and 50 ll phenazine methasulphate (PMS, 60 lM) were added to the various concentrations of the samples. All the above reagents were diluted in PBS (pH 7.4). The mixtures were incubated for 15 min in the dark and the absorbance measured at 560 nm. Trolox was used as standard and catechin was used as positive control. The superoxide anion radical scavenging capacity was calculated using the following equation: Superoxide anions scavenging activity % ผ ฝ๐A0 _ A1=A0_ _ 100; where A0 is the absorbance of the control (dH2O), and A1 is the absorbance of the extract/standard.
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4 . กิจกรรมต้านออกซิเดชันของสารสกัดชาขาว ( wte )
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . เฟอริคลดสารต้านอนุมูลอิสระพลังงานมาตรการลดใช้ Frap
ศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระโดยปฏิกิริยากับ tripyridyltriazine เฟอร์ ( fe3 – tptz ) ที่ผลิตจากเหล็กสีฟ้าแบบที่สามารถตรวจพบได้ด้วยการดูดกลืนแสงที่ 593 nm .สารประกอบสารต้านอนุมูลอิสระที่ทำหน้าที่ลดตัวแทนออกแรงผลกระทบโดยบริจาคเป็นอะตอมไฮโดรเจนที่ซับซ้อน เฟอริคจึงทำลายปฏิกิริยาลูกโซ่อนุมูลอิสระ .
fe3 ลดพลังงาน ( VDO ) สารสกัดถูกกำหนดโดยวิธีกับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ปริมาณถูกลดขนาดลง เพื่อรองรับปริมาณไมโครเพลทใช้ Frap รีเอเจนต์ถูกเตรียมโดยผสม 10 ml ของบัฟเฟอร์อะซิเตท 300 มม. 1 มิลลิลิตร tptz 10 มม. ( 2,4,6 tripyridyl-s-triazine ) 40 mm ของ HCl และ 1 มล. 20 มม. fecl3.6h2o จากนั้น 3 จะสารสกัดจากชา , มาตรฐานหรือบวกการควบคุมและ 9 จะน้ำเพิ่ม 90 จะใช้ Frap . การอ่านค่าการวัดได้ทันทีเมื่อเพิ่มของ VDO รีเอเจนต์ที่ 593 nm ทุก 4 นาที 10 วินาทีการลดกิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยเฟอร์พล็อตเส้นโค้งมาตรฐานของ feso4.7h2o ( 0 – 1000 lmol / L ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นมิลลิโมลเฟอร์ลดกิจกรรมจากนั้นต่อกรัมสารสกัดแห้ง
2.4.2 . กิจกรรม
dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรมต้านออกซิเดชันของสารสกัดชาขาว ( wte ) โดยประเมินโดยการวัดความจุของการต่อต้านอนุมูลอิสระ สารสกัดจากชา dpph ( 20 จะเพิ่มถึง 120 จะของ 0.004 % ปริมาณสารละลาย dpph . สาร ( 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid ) ที่ใช้เป็นมาตรฐาน การดูดกลืนแสงที่ 517 nm ตั้งใจหลังจาก 30 นาทีบ่ม
ในที่มืดที่อุณหภูมิ ห้องและคำนวณเป็นร้อยละของ inhibitionwas [ ( A0 และ A1 ) / A0 ] _ 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o ) และ A1 มีการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง กราฟของ dpph รุนแรงคือ ( % ) และความเข้มข้นของตัวอย่างที่ถูกวางแผน ค่า ic50 แสดงความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพของเครื่องมือที่ใช้ในการลด 50 % ของอนุมูล dpph ใช้ได้ ใน dpph scavenging assay รุนแรง ,ลึกสีม่วงสี dpph ลดไฟสีเหลืองสีเนื่องจากการนามธรรมของอะตอมไฮโดรเจนจากสารต้านอนุมูลอิสระสาร
2.4.3 . เอชทีทีพีการกิจกรรม
ผลของไฮดรอกซิลอิสระประมาณ 2 - deoxy-d-ribose ออกซิเดชันโดยใช้วิธีตามแบบ
วิธีการสร้างโดยเอชทีทีพีทดสอบบนพื้นฐานของหลักการที่ H2O2 ในการแสดงตนของ Fe 3 – EDTA ที่ pH 7.4 สร้างอนุมูลอิสระซึ่งสามารถวัดโดยใช้ ดีออกซีไรโบส . ที่ผสมกับสารเคมีต่อไปนี้ 200 จะของสารละลายตัวอย่างความเข้มข้นต่าง ๆ ในระบุคำสั่ง : 200 จะ FeCl3 100 มม. , 200 จะของ H2O2 1.25 มม. 200 จะ 2-deoxy d-ribose 2.5 มม.และ 200 จะวิตามิน 100 mm . ปฏิกิริยาผสมบ่มที่ 37 _c เป็นเวลา 1 ชั่วโมงแล้ว 100 จะเป็น 0.5% TBA ( เท่ากับกรดเจือจางด้วย NaOH ( 0.025 m ) และ 100 จะเป็น 2.8 % TCA ( กรดไตรคลอโรอะซิติก ) เพิ่มส่วนผสมถูกวางลงในอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิที่ 100 _c เป็นเวลา 30 นาที นี้ตามด้วยน้ำแข็งเย็นในอุณหภูมิห้องแล้วที่วัดการดูดกลืนแสง 532 nm . ค่าทั้งหมดที่ถูกกำหนดทั้งสามใบ เปอร์เซ็นต์ของเอชทีทีพี scavenging activity คำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้ : [ ( A0 และ A1 ) / A0 ] _ 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o ) และ A1 มีการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง .
2.4.4 . ไนตริกออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรม
ไนตริกออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาได้กำหนดกิจกรรมตามวิธีการที่อธิบายไว้โดยค่าของโซเดียม nitroprusside ( SNP 50 จะ 5 มม. ) คือเพิ่ม 50 จะความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง ผสมถูกบ่มภายใต้แสงที่มองเห็น polychromatic เป็นเวลา 1 ชั่วโมงแล้ว 100 จะ griess รีเอเจนต์ถูกเพิ่มเข้าไปผสมบ่มสำหรับอีก 5 นาทีและค่าวัดที่ 532 นาโนเมตร สาร ที่ใช้เป็นมาตรฐาน เตรียม griess รีเอเจนต์เป็นจํานวนเท่าของซา ( 1% sulphanilamide , 5% H3PO4 ) และเน็ด ( 0.1% - ( 1-naphthyl ลลีนไดแอม ) - : ( เน็ต ) ) ผสม ไนตริก ออกไซด์ ( % ) คือคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้ :ไนตริก ออกไซด์ Radical คือ ; % ผฝ๐ A0 A1 a0_ _ _ = 100 ; A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o ) และ A1 เป็นค่ามาตรฐานสกัด / กราฟของอนุมูลอิสระไนตริกออกไซด์คือ ( % ) และความเข้มข้นของตัวอย่าง คือ วางแผน 2.4.5
. Superoxide anion กิจกรรม
เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาไอออนออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา กิจกรรม ของตัวอย่าง โดยวิธีการ ในการประมาณ นี้ 50 จะของ NADH ( 468 LM ) , 50 จะ NBT ( 150 Lm ) และ 50 จะ phenazine methasulphate ( PMS , 60 LM ) เพิ่มความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง ทั้งหมดข้างต้นสามารถลดใน PBS ( pH 7.4 )ส่วนผสมถูกบ่มเป็นเวลา 15 นาที ในที่มืด และค่าวัดที่ 560 นาโนเมตร ใช้เป็นสารมาตรฐานและ Catechin ใช้เป็นตัวควบคุมบวก เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาออกไซด์แอนไอออนความจุถูกคำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้ : ซูเปอร์ออกไซด์แอนการกิจกรรมผฝ๐ _ A0 A1 a0_ _ = 100 ; A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o )และ A1 เป็นค่ามาตรฐานสกัด
/
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . เฟอริคลดสารต้านอนุมูลอิสระพลังงานมาตรการลดใช้ Frap
ศักยภาพของสารต้านอนุมูลอิสระโดยปฏิกิริยากับ tripyridyltriazine เฟอร์ ( fe3 – tptz ) ที่ผลิตจากเหล็กสีฟ้าแบบที่สามารถตรวจพบได้ด้วยการดูดกลืนแสงที่ 593 nm .สารประกอบสารต้านอนุมูลอิสระที่ทำหน้าที่ลดตัวแทนออกแรงผลกระทบโดยบริจาคเป็นอะตอมไฮโดรเจนที่ซับซ้อน เฟอริคจึงทำลายปฏิกิริยาลูกโซ่อนุมูลอิสระ .
fe3 ลดพลังงาน ( VDO ) สารสกัดถูกกำหนดโดยวิธีกับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ปริมาณถูกลดขนาดลง เพื่อรองรับปริมาณไมโครเพลทใช้ Frap รีเอเจนต์ถูกเตรียมโดยผสม 10 ml ของบัฟเฟอร์อะซิเตท 300 มม. 1 มิลลิลิตร tptz 10 มม. ( 2,4,6 tripyridyl-s-triazine ) 40 mm ของ HCl และ 1 มล. 20 มม. fecl3.6h2o จากนั้น 3 จะสารสกัดจากชา , มาตรฐานหรือบวกการควบคุมและ 9 จะน้ำเพิ่ม 90 จะใช้ Frap . การอ่านค่าการวัดได้ทันทีเมื่อเพิ่มของ VDO รีเอเจนต์ที่ 593 nm ทุก 4 นาที 10 วินาทีการลดกิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยเฟอร์พล็อตเส้นโค้งมาตรฐานของ feso4.7h2o ( 0 – 1000 lmol / L ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นมิลลิโมลเฟอร์ลดกิจกรรมจากนั้นต่อกรัมสารสกัดแห้ง
2.4.2 . กิจกรรม
dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรมต้านออกซิเดชันของสารสกัดชาขาว ( wte ) โดยประเมินโดยการวัดความจุของการต่อต้านอนุมูลอิสระ สารสกัดจากชา dpph ( 20 จะเพิ่มถึง 120 จะของ 0.004 % ปริมาณสารละลาย dpph . สาร ( 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid ) ที่ใช้เป็นมาตรฐาน การดูดกลืนแสงที่ 517 nm ตั้งใจหลังจาก 30 นาทีบ่ม
ในที่มืดที่อุณหภูมิ ห้องและคำนวณเป็นร้อยละของ inhibitionwas [ ( A0 และ A1 ) / A0 ] _ 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o ) และ A1 มีการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง กราฟของ dpph รุนแรงคือ ( % ) และความเข้มข้นของตัวอย่างที่ถูกวางแผน ค่า ic50 แสดงความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพของเครื่องมือที่ใช้ในการลด 50 % ของอนุมูล dpph ใช้ได้ ใน dpph scavenging assay รุนแรง ,ลึกสีม่วงสี dpph ลดไฟสีเหลืองสีเนื่องจากการนามธรรมของอะตอมไฮโดรเจนจากสารต้านอนุมูลอิสระสาร
2.4.3 . เอชทีทีพีการกิจกรรม
ผลของไฮดรอกซิลอิสระประมาณ 2 - deoxy-d-ribose ออกซิเดชันโดยใช้วิธีตามแบบ
วิธีการสร้างโดยเอชทีทีพีทดสอบบนพื้นฐานของหลักการที่ H2O2 ในการแสดงตนของ Fe 3 – EDTA ที่ pH 7.4 สร้างอนุมูลอิสระซึ่งสามารถวัดโดยใช้ ดีออกซีไรโบส . ที่ผสมกับสารเคมีต่อไปนี้ 200 จะของสารละลายตัวอย่างความเข้มข้นต่าง ๆ ในระบุคำสั่ง : 200 จะ FeCl3 100 มม. , 200 จะของ H2O2 1.25 มม. 200 จะ 2-deoxy d-ribose 2.5 มม.และ 200 จะวิตามิน 100 mm . ปฏิกิริยาผสมบ่มที่ 37 _c เป็นเวลา 1 ชั่วโมงแล้ว 100 จะเป็น 0.5% TBA ( เท่ากับกรดเจือจางด้วย NaOH ( 0.025 m ) และ 100 จะเป็น 2.8 % TCA ( กรดไตรคลอโรอะซิติก ) เพิ่มส่วนผสมถูกวางลงในอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิที่ 100 _c เป็นเวลา 30 นาที นี้ตามด้วยน้ำแข็งเย็นในอุณหภูมิห้องแล้วที่วัดการดูดกลืนแสง 532 nm . ค่าทั้งหมดที่ถูกกำหนดทั้งสามใบ เปอร์เซ็นต์ของเอชทีทีพี scavenging activity คำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้ : [ ( A0 และ A1 ) / A0 ] _ 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o ) และ A1 มีการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง .
2.4.4 . ไนตริกออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรม
ไนตริกออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาได้กำหนดกิจกรรมตามวิธีการที่อธิบายไว้โดยค่าของโซเดียม nitroprusside ( SNP 50 จะ 5 มม. ) คือเพิ่ม 50 จะความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง ผสมถูกบ่มภายใต้แสงที่มองเห็น polychromatic เป็นเวลา 1 ชั่วโมงแล้ว 100 จะ griess รีเอเจนต์ถูกเพิ่มเข้าไปผสมบ่มสำหรับอีก 5 นาทีและค่าวัดที่ 532 นาโนเมตร สาร ที่ใช้เป็นมาตรฐาน เตรียม griess รีเอเจนต์เป็นจํานวนเท่าของซา ( 1% sulphanilamide , 5% H3PO4 ) และเน็ด ( 0.1% - ( 1-naphthyl ลลีนไดแอม ) - : ( เน็ต ) ) ผสม ไนตริก ออกไซด์ ( % ) คือคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้ :ไนตริก ออกไซด์ Radical คือ ; % ผฝ๐ A0 A1 a0_ _ _ = 100 ; A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o ) และ A1 เป็นค่ามาตรฐานสกัด / กราฟของอนุมูลอิสระไนตริกออกไซด์คือ ( % ) และความเข้มข้นของตัวอย่าง คือ วางแผน 2.4.5
. Superoxide anion กิจกรรม
เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาไอออนออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา กิจกรรม ของตัวอย่าง โดยวิธีการ ในการประมาณ นี้ 50 จะของ NADH ( 468 LM ) , 50 จะ NBT ( 150 Lm ) และ 50 จะ phenazine methasulphate ( PMS , 60 LM ) เพิ่มความเข้มข้นต่าง ๆ ของตัวอย่าง ทั้งหมดข้างต้นสามารถลดใน PBS ( pH 7.4 )ส่วนผสมถูกบ่มเป็นเวลา 15 นาที ในที่มืด และค่าวัดที่ 560 นาโนเมตร ใช้เป็นสารมาตรฐานและ Catechin ใช้เป็นตัวควบคุมบวก เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาออกไซด์แอนไอออนความจุถูกคำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้ : ซูเปอร์ออกไซด์แอนการกิจกรรมผฝ๐ _ A0 A1 a0_ _ = 100 ; A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม ( dh2o )และ A1 เป็นค่ามาตรฐานสกัด
/
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- Yes, we can, however, I would like to as
- ยุ่งไหมวันนี้
- เครื่องเจาะ
- We will get doctor
- Your mood can change very quickly.
- จน
- Animals move and feed Caring for animals
- Bone fluoride content (BFC) was measured
- kam Pang Tee Sa Ad Muk Ja Pen Kra Dad Ha
- ยุ่งไหมวันนี้
- สะกดช้าๆ
- Dear Sir Now we want add the machine n
- ฉันนึกว่ามีใครบางคนแกล้งเรา
- เหมือนนรุธ
- ชื่อบริษัท :: ประสิทธิ์ เอ็นเตอร์ไพรส แอ
- ต้มข่าไก่
- ชมพูผู้พิชิต
- Customer service comes in contact with t
- soon we might be able to send
- Friends and relatives
- heat
- Friends and relatives also
- สวยเป็นบางคน
- หกหมื่นหนึ่งพันหกร้อยบาทถ้วน
