The quantitative measurements of th

The quantitative measurements of the three analytes were based on chromatographic peak area. Standard mixtures of creatinine, uric and ascorbic acid in the concentration range of 0.00–20.0 lgmL 1 were prepared for calibration graphs. Three replicate injections of standards at each concentration were performed. A good linearity was observed for each of the analytes examined as illustrated in Fig. 2. A typical calibration graph for creatinine followed the equation: y = 1.009x + 0.047, with the coefficients of determination, R2 = 1.000; for uric acid, y = 0.383x + 0.0173 with R2 = 1.000; and for ascorbic acid, y = 0.189x + 0.0444 with R2 = 0.999. The detection limits examined at three times of the background noise were 0.045, 0.10 and 0.18 lgmL 1 for creatinine, uric and ascorbic acid, respectively. The corresponding limits of quantification were 0.15 lgmL 1 for creatinine, 0.33 lgmL 1 for uric acid and 0.60 lgmL 1 ascorbic acid. The analytical recovery of the described method was tested by adding known amounts of analyte standards into the samples, and the percentage recoveries were found to be 93.4–103.4% for creatinine, 92.8–95.0% for uric acid and 92.2–97.3% for ascorbic acid as presented in Table 1. Day-to-day precision was evaluated by performing six injections of standard solutions and milk samples each day on five different days within a 2-week period. Inter-day precision (RSD) on the basis of retention time and peak area was better than 0.9% and 4.0%, respectively. Repeatability of the method was performed by three analysts (five determinations by each analysts) using the described method and the same instrument. The results shown no significant differences (RSD% < 3.5). The method described above has been applied to determine creatinine, uric and ascorbic acid in bovine milk and orange juice samples. As milk is a highly complex biological fluid, some pretreatment is mandatory to remove protein, simplify the matrix, protect the analytical column and facilitate unambiguous signal interpretation. Post-secretory enzymatic activity in milk, which can cause alteration in the concentration of target analytes, can be generally prevented by deproteinization with any of several recommended organic solvents and acids, such as methanol, acetonitrile, perchloric, trichloroacetic, or acetic acid, during sample preparation (Fritz & Zuo, 2007; Gill & Indyk, 2007; Hewavitharana & Bruce, 2003; Indyk &Woollard, 2004). In the present study, an acid precipitation of protein with acetic acid was employed, which could improve the specificity of the HILIC determination by removing protein-bound interferents, when compared with other organic solvents tested such as methanol and acetonitrile in the preliminary experiments in this study. Excellent selectivity and sensitivities were achieved for creatinine, uric and ascorbic acid for milk samples when this sample preparation technique was combined with the described HILIC procedures (Fig. 3). A typical chromatogram for an orange sample is illustrated in Fig. 4. Individual analytes were identified by matching the retention times against those of authentic standards, and by spiking the milk and orange juice samples with the standard of each analyte. The concentrations of creatinine, uric and ascorbic in examined milk and orange juice samples are presented in Table 2. The milk samples examined were found to contain UA and creatinine in the concentration range of 24.1–86.0 and 5.07–11.15 lg mL 1, respectively. The consumption of bovine milk may contribute to the increased concentration of uric acid and creatinine in body fluids in adults slightly but could significantly in children. No detectable amount of ascorbic acid was found in any of the tested milk samples. The orange juices contain AA over 212 lgmL 1. Our previous study has shown that consumption of antioxidant rich fruits can enhance the excretion of uric acid in urine (Zuo et al., 2011).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การประเมินเชิงปริมาณของ analytes สามได้ตามที่ตั้งสูงสุด chromatographic ส่วนผสมมาตรฐานของ creatinine, uric และกรดแอสคอร์บิคในช่วงความเข้มข้นของ 0.00 – 20.0 lgmL 1 เตรียมไว้สำหรับกราฟปรับเทียบ ดำเนินการฉีด replicate สามมาตรฐานที่แต่ละความเข้มข้น แบบดอกไม้ดีถูกสังเกตในแต่ละ analytes ตรวจสอบดังที่แสดงใน Fig. 2 กราฟเทียบทั่วไปสำหรับ creatinine ตามสมการ: y = 1.009 x + 0.047 มีสัมประสิทธิ์ของความมุ่งมั่น R2 = 1.000 สำหรับกรดยูริก y = 0.383 x + 0.0173 กับ R2 = 1.000 และ กรดแอสคอร์บิค y = 0.189 x + 0.0444 กับ R2 = 0.999 จำกัดตรวจสอบตรวจสอบในครั้งที่สามของเสียงรบกวนรอบข้างได้ 0.045, 0.10 และ lgmL 0.18 1 creatinine, uric และกรดแอสคอร์บิค ตามลำดับ ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องของนับได้ 0.15 lgmL 1 สำหรับ creatinine, lgmL 0.33 1 กรดยูริกและกรดแอสคอร์บิค lgmL 1 0.60 ทดสอบการกู้คืนการวิเคราะห์ของวิธีการอธิบาย โดยการเพิ่มจำนวนมาตรฐาน analyte ที่ทราบเป็นตัวอย่าง และ recoveries เปอร์เซ็นต์พบเป็น 93.4-103.4% สำหรับ creatinine, 92.8 – 95.0% กรดยูริก และ 92.2-97.3% สำหรับกรดแอสคอร์บิคตามที่แสดงในตารางที่ 1 ความแม่นยำในแต่ละวันถูกประเมิน โดยทำการฉีด 6 โซลูชั่นมาตรฐานและตัวอย่างน้ำนมแต่ละวันห้าวันอื่นภายในระยะเวลา 2 สัปดาห์ ระหว่างวันความแม่นยำ (RSD) โดยใช้เวลาเก็บข้อมูลและสูงสุด ที่ตั้งได้ดีกว่า 0.9% และ 4.0% ตามลำดับ ทำซ้ำในวิธีการที่ดำเนินการ โดยนักวิเคราะห์ 3 (โดยนักวิเคราะห์แต่ละห้า determinations) ใช้อธิบายวิธีการและเครื่องมือเดียวกัน ผลลัพธ์ที่แสดงไม่แตกต่างกัน (RSD % < 3.5) วิธีที่อธิบายข้างต้นได้ถูกใช้เพื่อกำหนด creatinine, uric และกรดแอสคอร์บิคในนมวัวและตัวอย่างน้ำส้ม เป็นน้ำนม ไหลชีวภาพสูงซับซ้อน pretreatment บางจะบังคับเอาโปรตีน เมตริกซ์ ป้องกันคอลัมน์วิเคราะห์ และช่วยในการตีความสัญญาณที่ชัดเจน กิจกรรมเอนไซม์ในระบบ post-secretory ในนม ซึ่งสามารถทำการแก้ไขในความเข้มข้นของเป้าหมาย analytes สามารถโดยทั่วไปป้องกัน โดย deproteinization ใด ๆ หรือสารทำละลายอินทรีย์แนะนำหลายและกรด เช่นเมทานอล acetonitrile, perchloric, trichloroacetic หรือ กรดน้ำส้ม ในระหว่างการเตรียมตัวอย่าง (ฟริทส์และซูยูเกธีม 2007 เหงือก & Indyk, 2007 Hewavitharana และบรูซ 2003 Indyk & Woollard, 2004) ในการศึกษาปัจจุบัน ฝนมีกรดโปรตีนที่มีกรดอะซิติกถูกจ้าง ซึ่งสามารถปรับปรุง specificity ของกำหนด HILIC ออกผูกกับโปรตีน interferents เมื่อเปรียบเทียบกับหรือสารทำละลายอื่น ๆ อินทรีย์ทดสอบเมทานอลและ acetonitrile ในการทดลองเบื้องต้นในการศึกษานี้ วิธีที่ดีและรัฐสำเร็จ creatinine, uric และกรดแอสคอร์บิคตัวอย่างนมเมื่อเทคนิคการเตรียมตัวอย่างนี้ถูกรวมเข้ากับขั้นตอน HILIC อธิบาย (Fig. 3) Chromatogram ทั่วไปสำหรับเป็นตัวอย่างสีส้มจะแสดงใน Fig. 4 แต่ละ analytes ได้ระบุ โดยตรงเวลารักษากับของแท้มาตรฐาน และตัวอย่างน้ำนมและสีส้มกับมาตรฐานของแต่ละ analyte spiking ความเข้มข้นของ creatinine, uric และแอสคอร์บิคกล่าวถึงนมและน้ำส้มมีแสดงตัวอย่างในตารางที่ 2 ตัวอย่างนมที่ตรวจสอบพบมี UA และ creatinine ในช่วงความเข้มข้นของ 24.1-86.0 และ 5.07 – 11.15 lg mL 1 ตามลำดับ ปริมาณของนมวัวอาจนำไปสู่การเพิ่มความเข้มข้นของกรดยูริกและ creatinine ในของเหลวของร่างกายในผู้ใหญ่เล็กน้อย แต่ได้มากในเด็ก จำนวนกรดแอสคอร์บิคไม่ตรวจพบในตัวอย่างนมที่ผ่านการทดสอบ น้ำส้มประกอบด้วย AA ผ่าน 212 lgmL 1 การศึกษาก่อนหน้านี้ของเราได้แสดงว่า ปริมาณของผลไม้ที่อุดมไปด้วยสารต้านอนุมูลอิสระสามารถเพิ่มประสิทธิภาพการขับถ่ายของกรดยูริกในปัสสาวะ (ซูยูเกธีม et al., 2011)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวัดเชิงปริมาณของสามวิเคราะห์ขึ้นอยู่กับพื้นที่สูงสุดสาร ผสมมาตรฐาน creatinine, ยูริคและวิตามินซีที่อยู่ในช่วงความเข้มข้นของ 0.00-20.0 lgmL 1 กำลังเตรียมพร้อมสำหรับการสอบเทียบกราฟ สามฉีดซ้ำของมาตรฐานในแต่ละความเข้มข้นได้ดำเนินการ เชิงเส้นที่ดีเป็นที่สังเกตสำหรับแต่ละวิเคราะห์ตรวจสอบดังแสดงในรูปที่ 2. กราฟมาตรฐานทั่วไปสำหรับ creatinine ตามสมการ Y = 1.009x + 0.047 มีค่าสัมประสิทธิ์ของความมุ่งมั่น, R2 = 1.000; สำหรับกรดยูริค, y = 0.383x + 0.0173 กับ R2 = 1.000; และวิตามินซี, y = 0.189x + 0.0444 กับ R2 = 0.999 ข้อ จำกัด ของการตรวจสอบการตรวจสอบที่สามครั้งของเสียงพื้นหลังเป็น 0.045, 0.10 และ 0.18 lgmL 1 สำหรับครี, ยูริคและวิตามินซีตามลำดับ ข้อ จำกัด ที่สอดคล้องกันของปริมาณเป็น 0.15 lgmL 1 สำหรับ creatinine 0.33 lgmL 1 สำหรับกรดยูริคและ 0.60 lgmL 1 วิตามินซี การกู้คืนการวิเคราะห์ของว​​ิธีการที่อธิบายได้รับการทดสอบโดยการเพิ่มจำนวนเงินที่เป็นที่รู้จักกันของมาตรฐานวิเคราะห์ลงไปในตัวอย่างและกลับคืนเปอร์เซ็นต์พบว่ามี 93.4-103.4% สำหรับครี, 92.8-95.0% สำหรับกรดยูริคและ 92.2-97.3% สำหรับวิตามินซี ที่แสดงในตารางที่ 1 ความแม่นยำวันต่อวันได้รับการประเมินโดยการดำเนินการฉีดหกของการแก้ปัญหามาตรฐานและตัวอย่างนมในแต่ละวันในห้าวันที่แตกต่างกันภายในระยะเวลา 2 สัปดาห์ ความแม่นยำอินเตอร์วัน (RSD) บนพื้นฐานของเวลาการเก็บรักษาและพื้นที่จุดสูงสุดก็ยังดีกว่า 0.9% และ 4.0% ตามลำดับ การทำซ้ำของวิธีการที่ได้ดำเนินการโดยสามนักวิเคราะห์ (ห้าพิจารณาโดยนักวิเคราะห์แต่ละคน) โดยใช้วิธีการอธิบายและเครื่องมือเดียวกัน ผลการแสดงไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (RSD% <3.5) วิธีการที่อธิบายข้างต้นได้ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบรี, กรดยูริคและวิตามินซีในนมวัวและตัวอย่างน้ำส้ม นมเป็นของเหลวทางชีวภาพที่มีความซับซ้อนสูงปรับสภาพบางส่วนมีผลบังคับใช้ในการลบโปรตีนลดความซับซ้อนของเมทริกซ์ปกป้องคอลัมน์วิเคราะห์และการอำนวยความสะดวกในการตีความสัญญาณที่ชัดเจน เอนไซม์โพสต์หลั่งในนมซึ่งอาจทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในความเข้มข้นของสารเป้าหมายที่สามารถป้องกันได้โดยทั่วไปการย่อยกับใด ๆ ของหลายแนะนำตัวทำละลายอินทรีย์และกรดเช่นเมทานอล acetonitrile, เปอร์คลอริก, ไตรคลอโรหรือกรดอะซิติกในช่วง การเตรียมสารตัวอย่าง (ฟริตซ์และ Zuo 2007; กิลล์และ Indyk 2007; Hewavitharana และบรูซ, 2003; & Indyk Woollard, 2004) ในการศึกษาปัจจุบัน, ฝนกรดของโปรตีนที่มีกรดอะซิติกเป็นลูกจ้างซึ่งสามารถปรับปรุงความจำเพาะของการกำหนด HILIC โดยการเอา interferents โปรตีนที่ถูกผูกไว้เมื่อเทียบกับตัวทำละลายอินทรีย์อื่น ๆ เช่นการทดสอบเมทานอลและ acetonitrile ในการทดลองเบื้องต้นในเรื่องนี้ การศึกษา การเลือกที่ดีเยี่ยมและความเปราะบางกำลังประสบความสำเร็จในการรี, ยูริคและวิตามินซีสำหรับตัวอย่างนมเมื่อเทคนิคการจัดทำตัวอย่างนี้ได้ร่วมกับที่อธิบายขั้นตอนการ HILIC (รูปที่. 3) chromatogram ปกติสำหรับตัวอย่างสีส้มจะแสดงในรูปที่ 4. วิเคราะห์ส่วนบุคคลที่ถูกระบุโดยการจับคู่ครั้งกับผู้เก็บรักษามาตรฐานของแท้และองศานมและน้ำผลไม้สีส้มตัวอย่างมาตรฐานของแต่ละวิเคราะห์ ความเข้มข้นของครี, ยูริคและวิตามินซีในนมและการตรวจสอบตัวอย่างน้ำผลไม้สีส้มจะแสดงในตารางที่ 2 ตัวอย่างนมการตรวจสอบพบว่ามี UA และ creatinine ในช่วงความเข้มข้นของ 24.1-86.0 และ 5.07-11.15 ๆ lg 1 มิลลิลิตรตามลำดับ การบริโภคนมวัวอาจนำไปสู่​​การเพิ่มความเข้มข้นของกรดยูริคและ creatinine ในของเหลวในร่างกายในผู้ใหญ่เล็กน้อย แต่จะทำได้อย่างมีนัยสำคัญในเด็ก ไม่มีการตรวจพบปริมาณของวิตามินซีที่พบในใด ๆ ของกลุ่มตัวอย่างนมที่ผ่านการทดสอบ น้ำผลไม้สีส้มมี AA มากกว่า 212 lgmL 1. ศึกษาก่อนหน้านี้ของเราได้แสดงให้เห็นการบริโภคผลไม้ที่อุดมไปด้วยสารต้านอนุมูลอิสระที่สามารถเพิ่มการขับถ่ายของกรดยูริคในปัสสาวะ (Zuo et al., 2011)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวัดเชิงปริมาณของทั้งสามกรณีตามบริเวณยอดเขาทางโครมาโทกราฟี ผสมมาตรฐานารยูริคและกรดแอสคอร์บิกในช่วงความเข้มข้น 0.00 - 20.0 lgml 1 เตรียมสำหรับกราฟปรับเทียบ 3 ทำซ้ำการฉีดในแต่ละความเข้มข้นมาตรฐานการวิจัย เป็นเส้นตรงดี พบว่าทั้งสารตรวจสอบตามที่แสดงในฟิค2 . กราฟการสอบเทียบทั่วไปหรือตามสมการ Y = 1.009x 0.047 , ค่าสัมประสิทธิ์ของความมุ่งมั่น , R2 = 1.000 ; กรดยูริก , Y = 0.383x 0.0173 กับ R2 = 1.000 ; และกรดแอสคอร์บิค , Y = 0.189x 0.0444 กับ R2 = 0.999 . การตรวจสอบที่ จำกัด ของเสียงพื้นหลังสามครั้งคือ 0.045 , 0.10 และ 0.18 lgml 1 ารยูริค และกรดแอสคอร์บิคตามลำดับ ขีดจำกัดของปริมาณที่สอดคล้องกันคือ 0.15 lgml 1 สำหรับครี , 0.33 lgml 1 สำหรับกรดยูริกและ 0.60 lgml 1 กรดแอสคอร์บิก . การกู้คืนข้อมูลเชิงวิเคราะห์ อธิบายวิธีการทดสอบ โดยการเพิ่มปริมาณของมาตรฐานครูรู้จักในตัวอย่าง และร้อยละต่ำสุดพบว่ามี 93.4 – 103.4 ) อยู่ร้อยละ 95.0 ารและกรดยูริกและอาจ– 97 .3 ) กรดแอสคอร์บิคที่นำเสนอในตารางที่ 1 วันที่แน่นอนที่ประเมินโดยการแสดงหกการฉีดโซลูชั่นมาตรฐาน และตัวอย่างนมในแต่ละวัน 5 วันต่าง ๆ ภายในระยะเวลา 2 . ระหว่างวันแน่นอน ( RSD ) บนพื้นฐานของเวลาการเก็บรักษาสูงสุด และพื้นที่กว่า 0.9% และ 4.0% ตามลำดับการของวิธีการทำโดยนักวิเคราะห์ ( ห้า ร้อยละ 3 โดยแต่ละนักวิเคราะห์ ) ใช้อธิบายวิธีการและอุปกรณ์เดียวกัน ผลลัพธ์ที่แสดงไม่แตกต่างกัน ( RSD % < 3 ) วิธีการที่อธิบายไว้ข้างต้นได้ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบารยูริคและกรดแอสคอร์บิก ในน้ำนมวัว และส้มอย่างน้ำผลไม้ นมเป็นอย่างสูงที่ซับซ้อนทางชีวภาพของเหลวมีการบังคับให้เอาโปรตีน , ลดความซับซ้อนของเมทริกซ์ , ปกป้องคอลัมน์วิเคราะห์และความสะดวกในการตีความสัญญาณชัดเจน . โพสต์เอนไซม์พบในนม ซึ่งสามารถก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในความเข้มข้นของสารที่วิเคราะห์เป้าหมาย สามารถป้องกันได้โดยการลดปริมาณโปรตีนโดยทั่วไปมีหลายที่แนะนำกรดและสารละลายอินทรีย์ เช่น เมทานอลไน perchloric กรดไตรคลอโรอะซิติก , หรือในการเตรียมสารตัวอย่าง ( Fritz &จั่ว , 2007 ; กิลล์&นไดก์ , 2007 ; hewavitharana &บรูซ , 2003 ; นไดก์& woollard , 2004 ) ในการศึกษาการตกตะกอนโปรตีนด้วยกรดเป็นกรดที่ใช้ ซึ่งสามารถเพิ่มความจำเพาะของการกำหนด hilic โดยเอาไว้ศึกษาโปรตีน ,เมื่อเทียบกับตัวทำละลายอินทรีย์อื่น ๆการทดสอบ เช่น เมทานอลและไนในการทดลองเบื้องต้นในการศึกษานี้ การเลือกสรรที่ยอดเยี่ยม และมีความอ่อนไหวต่อารยูริคและกรดแอสคอร์บิก สำหรับตัวอย่างนมเมื่อการเตรียมตัวเทคนิครวมกับอธิบายขั้นตอน hilic ( รูปที่ 3 )โครมาโตแกรมทั่วไปตัวอย่างสีส้มจะแสดงในรูปที่ 4 สารแต่ละตัวถูกระบุโดยการจับเวลากักกับบรรดามาตรฐานของแท้ และขึ้นตัวอย่างนมและน้ำส้มกับมาตรฐานของแต่ละครู . ความเข้มข้นของารยูริกวิตามินซีและนม และในการตรวจสอบตัวอย่างน้ำส้มจะแสดงในตารางที่ 2นมตัวอย่าง ตรวจพบว่ามีความเข้มข้นมากและครีในช่วงของอัตรา– 86.0 5.07 – 11.15 LG มิลลิลิตร และ 1 ตามลำดับ การบริโภคนมโค อาจช่วยเพิ่มความเข้มข้นของกรดยูริคและครีในของเหลวในร่างกายผู้ใหญ่เล็กน้อย แต่อาจแตกต่างกันในเด็กไม่ตรวจพบปริมาณของวิตามินซีที่พบในใด ๆของการทดสอบนมตัวอย่าง สีส้มน้ำผลไม้มี AA มากกว่า 212 lgml 1 การศึกษาของเราได้แสดงให้เห็นว่าการบริโภคผลไม้ที่อุดมไปด้วยสารต้านอนุมูลอิสระช่วยการขับถ่ายกรดยูริกในปัสสาวะ ( จั่ว et al . , 2011 )