AbstractThe objective of this study

Abstract
The objective of this study was to develop a rapid multiplex PCR (m-PCR) method using pure bacterial cultures and pork that would allow the simultaneous detection of five major foodborne pathogens likely to be found in pork (Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7, Salmonella and Yersinia enterocolitica). Five pairs of primers were designed to identify invA gene, hlyA gene, rfbE gene, nuc gene and ail gene for Salmonella, L. monocytogenes, E. coli O157:H7, S. aureus and Y. enterocolitica, respectively. On the basis of determining specificity of the m-PCR, sensitivity was performed an overnight enrichment step in culture media and pork. The 16S rRNA gene was targeted as an internal control gene of the presence of bacterial DNA. The results suggested that the m-PCR was an effective procedure
having high specificity for the simultaneous detection of the five target pathogens. After overnight culture, the detection
limit was 103 cfu/mL for the simultaneous detection of the five target pathogens and less than 10 cfu/mL for detection
of a single pathogen. The m-PCR protocol successfully detected all five organisms inoculated overnight together on
pork. Salmonella, S. aureus, L. monocytogenes, Y. enterocolitca and E. coli O157:H7 were detected at levels of 142,
51, 9, 33 and 670 cfu/mL, respectively, in the pork. The m-PCR assay developed in this study could provide an
effective and informative supplement for routine monitoring for pork safety.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อวัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือการ พัฒนาอย่างรวดเร็ว multiplex PCR (m-PCR) วิธีใช้วัฒนธรรมเชื้อแบคทีเรียบริสุทธิ์และหมูที่จะช่วยให้การตรวจพบโรค foodborne หลักห้าโอกาสที่จะพบในหมู (Staphylococcus หมอเทศข้างลาย ออลิ monocytogenes, Escherichia coli O157:H7 ซัล และ Yersinia enterocolitica) พร้อมกัน 5 คู่ไพรเมอร์ออกแบบมาเพื่อระบุ invA ยีน ยีน hlyA, rfbE ยีน ยีน nuc และ ail ยีนสำหรับซัล L. monocytogenes, O157:H7 E. coli, S. หมอเทศข้างลาย และ Y. enterocolitica ตามลำดับ ตามกำหนด specificity ของ m-PCR ทำความไวขอค้างคืนมีขั้นตอนในสื่อวัฒนธรรมและหมู 16S rRNA ยีนถูกเป้าหมายเป็นยีนการควบคุมภายในของของดีเอ็นเอจากแบคทีเรีย ผลแนะนำว่า m-PCR คือ กระบวนการที่มีประสิทธิภาพมี specificity สูงสำหรับการตรวจพบโรคเป้าหมายห้าพร้อม หลังจากค้างคืนวัฒนธรรม การตรวจพบวงเงิน 103 cfu/mL การตรวจโรคเป้าหมายห้าพร้อมและน้อยกว่า 10 cfu/mL สำหรับตรวจสอบของการศึกษาเดียวกัน โพรโทคอล m-PCR ตรวจพบทั้งหมด 5 ชีวิต inoculated ค้างคืนกันบนเรียบร้อยแล้วหมู ซัล S. หมอเทศข้างลาย L. monocytogenes, Y. enterocolitca และ O157:H7 E. coli พบระดับของ 14251, 9, 33 และ 670 cfu/mL ตามลำดับ ในเนื้อหมู ทดสอบ m-PCR การพัฒนาในการศึกษานี้สามารถให้การอาหารเสริมมีประสิทธิภาพ และข้อมูลสำหรับการตรวจสอบเป็นประจำเพื่อความปลอดภัยของหมู

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ
วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาเทคนิค multiplex PCR อย่างรวดเร็ว (M-PCR) วิธีการใช้วัฒนธรรมแบคทีเรียบริสุทธิ์และเนื้อหมูที่จะช่วยให้การตรวจสอบพร้อมกันในห้าของเชื้อโรคที่เกิดจากอาหารที่สำคัญที่มีแนวโน้มที่จะพบในหมู (Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157: H7, Salmonella และ Yersinia enterocolitica) ห้าคู่ของไพรเมอร์ได้รับการออกแบบมาเพื่อระบุยีน Inva ยีน hlya ยีน rfbE ยีน NUC และยีน Ail สำหรับเชื้อ Salmonella, L. monocytogenes, เชื้อ E. coli O157: H7, S. aureus และ Y. enterocolitica ตามลำดับ บนพื้นฐานของการกำหนดความจำเพาะของ M-PCR ไวได้ดำเนินการขั้นตอนการตกแต่งค้างคืนในสื่อวัฒนธรรมและเนื้อหมู 16S rRNA ยีนเป็นเป้าหมายเป็นยีนควบคุมภายในการปรากฏตัวของดีเอ็นเอของแบคทีเรีย ผลการชี้ให้เห็นว่า M-PCR เป็นขั้นตอนที่มีประสิทธิภาพ
มีความจำเพาะสูงสำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของห้าเชื้อโรคเป้าหมาย หลังจากวัฒนธรรมข้ามคืนการตรวจสอบ
วงเงิน 103 โคโลนี / มิลลิลิตรสำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของห้าเชื้อโรคเป้าหมายและน้อยกว่า 10 โคโลนี / มิลลิลิตรสำหรับการตรวจสอบ
ของเชื้อโรคเดียว โปรโตคอล M-PCR ตรวจพบประสบความสำเร็จทั้งห้าชีวิตเชื้อค้างคืนร่วมกันใน
หมู เชื้อ Salmonella, S. aureus, monocytogenes ลิตร enterocolitca วายและเชื้อ E. coli O157: H7 ถูกตรวจพบในระดับ 142,
51, 9, 33 และ 670 โคโลนี / มิลลิลิตรตามลำดับในเนื้อหมู ทดสอบ M-PCR การพัฒนาในการศึกษาครั้งนี้สามารถให้
อาหารเสริมที่มีประสิทธิภาพและให้ข้อมูลสำหรับการตรวจสอบตามปกติเพื่อความปลอดภัยของเนื้อหมู

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Abstract
The objective of this study was to develop a rapid multiplex PCR (m-PCR) method using pure bacterial cultures and pork that would allow the simultaneous detection of five major foodborne pathogens likely to be found in pork (Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli O157:H7, Salmonella and Yersinia enterocolitica). Five pairs of primers were designed to identify invA gene, hlyA gene, rfbE gene, nuc gene and ail gene for Salmonella, L. monocytogenes, E. coli O157:H7, S. aureus and Y. enterocolitica, respectively. On the basis of determining specificity of the m-PCR, sensitivity was performed an overnight enrichment step in culture media and pork.ส่วนเบส 16S rRNA ยีนเป็นยีนเป้าหมายการควบคุมภายในของตนจากดีเอ็นเอ ผลการศึกษาพบว่า m-pcr เป็นที่มีประสิทธิภาพขั้นตอน
มีความจำเพาะสูงในการตรวจหาพร้อมกันห้าเป้าหมายสูงขึ้น หลังจากการตรวจสอบ
วัฒนธรรมค้างคืนlimit was 103 cfu/mL for the simultaneous detection of the five target pathogens and less than 10 cfu/mL for detection
of a single pathogen. The m-PCR protocol successfully detected all five organisms inoculated overnight together on
pork. Salmonella, S. aureus, L. monocytogenes, Y. enterocolitca and E. coli O157:H7 were detected at levels of 142,
51, 9, 33 and 670 cfu/mL, respectively, in the pork. The m-PCR assay developed in this study could provide an
effective and informative supplement for routine monitoring for pork safety.