The specific activity in the initia

The specific activity in the initial enzyme extract was 0.05 U/mg protein. After the final purification step, the trypsin was purified 16-fold, with a recovery of 20% and a specific activity of 0.8 U/mg protein, using BAPNA as a substrate (Table 1).

Purified trypsin from goby migrated as a single band in SDS-PAGE (Fig. 1a) and native PAGE (Fig. 1b), indicating the homogeneity of the enzyme and confirming that the purified trypsin had only one isoform. The molecular weight of trypsin was estimated to be 23.2 kDa based on SDS-PAGE (Fig. 1a), corresponding to that determined by gel filtration. Most of fish trypsins have been reported to have molecular weights in the range of 23–28 kDa. The molecular weight of
Z. ophiocephalus trypsin was similar to those from other fish species, such as walleye pollock (Theragra chalcogramma), true sardine (Sardinops melanostictus) and arabesque greenling (Pleuroprammus azonus) [23], Amazonian
fish tambaqui (C. macropomum), grey triggerfish (B. capriscus), and cuttlefish (S. officinalis) [7], and lower than those of
trypsins from zebra blenny (S. basilisca) , and silver mojarra (D. rhombeus).

Casein-zymogram staining, a very sensitive and rapid assay method that detects nanograms of protein, revealed a unique clear zone of proteolytic activity against the blue background of the gel, indicating the purity of the trypsin (Fig. 1b).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรมในสารสกัดเอนไซม์เริ่มต้น 0.05 U/มิลลิกรัม โปรตีน หลังจากขั้นตอนสุดท้ายฟอก ทริปซินจะได้บริสุทธิ์ 16-fold กู้คืน 20% พร้อมกิจกรรม 0.8 U/มิลลิกรัม โปรตีน ใช้ BAPNA เป็นพื้นผิว (ตารางที่ 1) ทริปซินบริสุทธิ์จากบู่ย้ายเป็นวงเดียวใน SDS-เพ (Fig. 1a) และพื้นหน้า (Fig. 1b), ระบุ homogeneity ของเอนไซม์นี้และยืนยันว่า ทริปซินบริสุทธิ์มี isoform ที่เดียวเท่านั้น น้ำหนักโมเลกุลของทริปซินได้ประมาณ 23.2 kDa ตามหน้า (Fig. 1a), องค์กรที่เกี่ยวข้องที่กำหนด โดยเครื่องกรองเจ มีการรายงานของ trypsins ปลา มีน้ำหนักโมเลกุลในช่วง 23 – 28 kDa น้ำหนักโมเลกุลของ ทริปซิน ophiocephalus z.ผู้จากพันธุ์ปลาอื่น ๆ เช่น pollock walleye (Theragra chalcogramma), ปลาซาร์ดีนจริง (บ้าน Sardinops) และแปลก greenling (Pleuroprammus azonus) [23], แอมะซอนปลา tambaqui (C. macropomum), ปลาวัวลายสีเทา (เกิด capriscus), และปลาหมึก (S. officinalis) [7], และต่ำกว่าของtrypsins จากตั๊กแตนหินม้าลาย (S. basilisca), และเงิน mojarra (D. rhombeus) การย้อมสี วิธีการวิเคราะห์อย่างรวดเร็ว และมีความสำคัญมากที่ตรวจพบ nanograms ของโปรตีน zymogram เคซีนเปิดเผยชัดเจนโซนเฉพาะของกิจกรรม proteolytic กับพื้นหลังสีฟ้าของเจ แสดงความบริสุทธิ์ของทริปซิน (Fig. 1b)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมที่ระบุในสารสกัดเอนไซม์เริ่มต้น 0.05 U / มก. โปรตีน หลังจากขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์สุดท้าย trypsin ถูกบริสุทธิ์ 16 เท่าที่มีการกู้คืน 20% และเป็นกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ 0.8 U / มก. โปรตีนโดยใช้ BAPNA เป็นสารตั้งต้น (ตารางที่ 1). trypsin บริสุทธิ์จากปลาบู่อพยพเป็นวงเดียว ใน SDS-PAGE (รูป. 1a) และหน้าพื้นเมือง (รูป. 1 ข) แสดงให้เห็นความเป็นเนื้อเดียวกันของเอนไซม์และยืนยันว่า trypsin บริสุทธิ์มีเพียงหนึ่งไอโซฟอร์ม น้ำหนักโมเลกุลของ trypsin ก็จะประมาณ 23.2 กิโลดาลตันขึ้นอยู่กับระบบ SDS-PAGE (รูป. 1a) สอดคล้องกับที่กำหนดโดยการกรองเจล ส่วนใหญ่ trypsins ปลาได้รับรายงานว่าจะมีน้ำหนักโมเลกุลอยู่ในช่วง 23-28 kDa น้ำหนักโมเลกุลของซี ophiocephalus trypsin ก็คล้ายคลึงกับผู้ที่มาจากปลาชนิดอื่น ๆ เช่นตาล Pollock (Theragra chalcogramma) ปลาซาร์ดีนที่แท้จริง (Sardinops melanostictus) และอาหรับ greenling (Pleuroprammus azonus) [23], อเมซอนtambaqui ปลา (ค macropomum) กวางสีเทา (B . capriscus) และปลาหมึก (เอส officinalis) [7] และต่ำกว่าtrypsins จากม้าลายตีน (เอส basilisca) และเงินกระโดง (d rhombeus). การย้อมสีเคซีน-zymogram การทดสอบความสำคัญมากและอย่างรวดเร็ว วิธีการที่ตรวจพบนาโนของโปรตีนเปิดเผยโซนที่ชัดเจนที่ไม่ซ้ำกันของกิจกรรมโปรตีนกับพื้นหลังสีฟ้าของเจลแสดงให้เห็นความบริสุทธิ์ของ trypsin (รูป. 1b)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงในการแยกเอนไซม์เริ่มต้น 0.05 U / mg โปรตีน หลังจากขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์สุดท้าย ทริป 16 พับบริสุทธิ์ กับการกู้คืน 20% และกิจกรรมเฉพาะของ 0.8 U / mg protein โดยใช้ bapna เป็นสารตั้งต้น ( ตารางที่ 1 ) .

บริสุทธิ์เอนไซม์จากปลาบู่อพยพเป็นวงเดียวในการแก้ปัญหา ( รูปที่ 1A ) และพื้นเมือง ( รูปที่ 1A ) หน้า ,แสดงความเป็นเอกพันธ์ของเอนไซม์บริสุทธิ์เอนไซม์ และยืนยันว่ามีเพียงหนึ่งไอโซฟอร์ม . น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์ประมาณจะ 23.2 kDa จากการศึกษา ( รูปที่ 1 ) ซึ่งสอดคล้องกับที่กำหนดโดยการกรองเจล ที่สุดของ trypsins ปลาได้รับรายงานว่ามีน้ำหนักโมเลกุลในช่วง 23 – 28 กิโลดาลตัน น้ำหนักโมเลกุลของ
Zophiocephalus ซินก็คล้ายกับจากปลาอื่น ๆเช่น ตาลอ พอลล็อก ( theragra chalcogramma ) ปลาซาร์ดีน ( sardinops จริงน้อย ) และอาสาสมัคร greenling ( pleuroprammus azonus ) [ 23 ] , Amazonian
ปลาสาโท ( C . macropomum ) ปลาวัวสีเทา ( พ. capriscus ) และปลาหมึก ( S . officinalis ) [ 7 ] และ ต่ํากว่า
trypsins จากม้าลายตีน ( S . basilisca )วงศ์ปลาดอกหมากและเงิน ( D . rhombeus )

โดยทดลองการย้อมสีอ่อนไหวง่าย และวิธีวิเคราะห์อย่างรวดเร็วที่ตรวจจับนาโนกรัมของโปรตีน , เปิดเผยเอกลักษณ์ชัดเจน โซนกิจกรรมระกับพื้นหลังสีฟ้าของเจล บ่งบอกถึงความบริสุทธิ์ของเอนไซม์ ( รูปที่ 1A )