The western blot (sometimes called

The western blot (sometimes called the protein immunoblot) is a widely used analytical technique used to detect specific proteins in a sample of tissue homogenate or extract. It uses gel electrophoresis to separate native proteins by 3-D structure or denatured proteins by the length of the polypeptide. The proteins are then transferred to a membrane (typically nitrocellulose or PVDF), where they are stained with antibodies specific to the target protein.[1][2] The gel electrophoresis step is included in western blot analysis to resolve the issue of the cross-reactivity of antibodies.

There are many reagent companies that specialize in providing antibodies (both monoclonal and polyclonal antibodies) against tens of thousands of different proteins.[3] Commercial antibodies can be expensive, although the unbound antibody can be reused between experiments. This method is used in the fields of molecular biology, immunogenetics and other molecular biology disciplines. A number of search engines, such as CiteAb, Antibodypedia, and SeekProducts, are available that can help researchers find suitable antibodies for use in western blotting.

Other related techniques include dot blot analysis, immunohistochemistry and immunocytochemistry where antibodies are used to detect proteins in tissues and cells by immunostaining, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

The method originated in the laboratory of Harry Towbin at the Friedrich Miescher Institute.[1] The name western blot was given to the technique by W. Neal Burnette[4] and is a play on the name Southern blot, a technique for DNA detection developed earlier by Edwin Southern. Detection of RNA is termed northern blot and was developed by George Stark at Stanford.[5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เวสเทิร์นคืนในตา (บางครั้งเรียกว่า immunoblot โปรตีน) คือ เทคนิควิเคราะห์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายใช้ในการตรวจหาโปรตีนเฉพาะในตัวอย่างของ homogenate เนื้อเยื่อ หรือแยก ใช้เจล electrophoresis เพื่อแยกโปรตีนดั้งเดิม โดยโครงสร้าง 3 มิติหรือโปรตีน denatured โดยความยาวของ polypeptide โปรตีนอยู่แล้วจะเมมเบรน (โดยทั่วไป nitrocellulose หรือ PVDF), ที่พวกเขาใช้สีกับแอนตี้เฉพาะโปรตีนเป้าหมาย [1] [2] ขั้นตอน electrophoresis เจลตั้งอยู่ในตะวันตกคืนในตาวิเคราะห์เพื่อแก้ไขปัญหาของ cross-reactivity ของแอนตี้มีหลายบริษัทรีเอเจนต์ที่มีความเชี่ยวชาญในการให้บริการแอนตี้ (แอนตี้ทั้งโมโน และ polyclonal) กับหมื่นโปรตีนแตกต่างกัน [3] แอนตี้ทางการค้าจะมีราคาสูง แม้ว่าสามารถนำแอนติบอดีที่ผูกระหว่างทดลอง ใช้วิธีการนี้ในฟิลด์ของอณูชีววิทยา immunogenetics และอื่น ๆ สาขาอณูชีววิทยา จำนวนเครื่องมือค้นหา CiteAb, Antibodypedia และ SeekProducts มีที่สามารถช่วยให้นักวิจัยค้นหาแอนตี้เหมาะสำหรับใช้ใน blotting วิธีเวสเทิร์นได้เทคนิคอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องได้แก่การวิเคราะห์จุดคืนในตา immunohistochemistry และ immunocytochemistry ที่จะใช้เพื่อตรวจหาโปรตีนในเนื้อเยื่อและเซลล์แอนตี้ immunostaining และเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay (ELISA)วิธีการเริ่มต้นในห้องปฏิบัติการของแฮร์รี่ Towbin สถาบัน Miescher ฟรีดริช [1] ตามชื่อตะวันตกคืนในตาให้เทคนิค โดยปริมาณนีล Burnette [4] และเป็นการเล่นในชื่อภาคใต้คืนในตา เทคนิคการตรวจดีเอ็นเอพัฒนาก่อนหน้านี้ โดยเอ็ดวินใต้ การตรวจหาอาร์เอ็นเอเรียกว่าคืนในตาเหนือ และได้รับการพัฒนา โดยสิ้นเชิงของจอร์จที่สแตนฟอร์ด [5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดวงตะวัน (บางครั้งเรียก immunoblot โปรตีน) เป็นเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิเคราะห์ใช้ในการตรวจหาโปรตีนที่เฉพาะเจาะจงในกลุ่มตัวอย่างของ homogenate เนื้อเยื่อหรือสารสกัดจาก มันใช้ข่าวคราวที่จะแยกโปรตีนพื้นเมืองโดย 3 มิติของโครงสร้างหรือโปรตีนแปลงสภาพโดยความยาวของ polypeptide โปรตีนจะถูกโอนไปแล้วเมมเบรน (ปกติ nitrocellulose หรือ PVDF) ที่พวกเขาจะย้อมด้วยแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงกับโปรตีนเป้าหมาย. [1] [2] ขั้นตอนข่าวคราวจะรวมอยู่ในการวิเคราะห์ดวงตะวันเพื่อแก้ไขปัญหาของการข้าม -reactivity ของแอนติบอดี. มีหลาย บริษัท ที่มีความเชี่ยวชาญน้ำยาในการให้แอนติบอดี (monoclonal ทั้งแอนติบอดีและโพลี) กับนับหมื่นของโปรตีนที่แตกต่างกัน. [3] แอนติบอดีพาณิชย์จะมีราคาแพง แต่ไม่ได้ผูกไว้แอนติบอดีที่สามารถนำกลับมาใช้ระหว่างการทดลอง วิธีการนี้ถูกนำมาใช้ในด้านของอณูชีววิทยาภูมิคุ้มกันและอื่น ๆ ที่สาขาวิชาชีววิทยาระดับโมเลกุล จำนวนของระบบค้นหาเช่น CiteAb, Antibodypedia และ SeekProducts มีอยู่ที่สามารถช่วยให้นักวิจัยพบว่าแอนติบอดีเหมาะสำหรับใช้ในซับตะวันตก. เทคนิคอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องรวมถึงการวิเคราะห์ blot จุด immunohistochemistry และ immunocytochemistry แอนติบอดีที่จะใช้ในการตรวจหาโปรตีนในเนื้อเยื่อ และเซลล์โดย immunostaining และเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน (ELISA). วิธีการที่เกิดขึ้นในห้องปฏิบัติการของแฮร์รี่ Towbin ที่ฟรีดริช Miescher สถาบัน. [1] ชื่อดวงตะวันได้รับเทคนิคโดยโอนีลดับบลิว Burnette [4] และเป็นผู้เล่นที่ชื่อภาคใต้ blot เทคนิคการตรวจหาดีเอ็นเอก่อนหน้านี้ได้รับการพัฒนาโดยเอ็ดวินภาคใต้ การตรวจสอบของอาร์เอ็นเอที่เรียกว่าดวงภาคเหนือและได้รับการพัฒนาโดยจอร์จสตาร์ที่ Stanford. [5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

blot ตะวันตก ( บางครั้งเรียกว่าโปรตีนมมูโนบล็ ) เป็นเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายวิเคราะห์เพื่อใช้ตรวจหาโปรตีนที่เฉพาะเจาะจงในตัวอย่างปริมาณเนื้อเยื่อหรือสารสกัด มันใช้ gel electrophoresis แยกโปรตีนหรือโปรตีนเกิดพื้นเมืองโดยโครงสร้าง 3 มิติ โดยความยาวของพอลิเพปไทด์ . โปรตีนนั้นจะถูกโอนไปยังเยื่อ ( โดยปกติไนโตรหรือ PVDF )ที่ย้อมด้วยแอนติบอดีต่อโปรตีนเป้าหมาย [ 1 ] [ 2 ] เจลขั้นตอนที่รวมอยู่ใน Western blot การวิเคราะห์เพื่อแก้ปัญหาของขอประทานแอนติบอดี .

มีหลายระดับ บริษัท ที่เชี่ยวชาญในการให้ภูมิคุ้มกัน ( โมโนโคลนอลแอนติบอดีและทั้งสองใช้ ) กับนับหมื่นของโปรตีน ที่แตกต่างกัน[ 3 ] พาณิชย์แอนติบอดีสามารถจะมีราคาแพง แต่จับกับแอนติบอดีสามารถแยกระหว่างการทดลอง วิธีนี้จะใช้ในด้านชีววิทยาระดับโมเลกุล immunogenetics และสาขาวิชาชีววิทยาระดับโมเลกุลอื่น ๆ จำนวนของเครื่องมือค้นหาเช่น citeab antibodypedia , และ seekproducts ที่มีอยู่ที่สามารถช่วยให้นักวิจัยพบแอนติบอดี เหมาะสําหรับใช้ใน Western blotting .

เทคนิคอื่น ๆที่เกี่ยวข้องรวม dot blot analysis และแอนติบอดี , immunocytochemistry หลอดที่ใช้ตรวจหาโปรตีนในเนื้อเยื่อและเซลล์ โดย immunostaining และ enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) .

วิธีมาจากห้องปฏิบัติการของแฮร์รี่ towbin ที่ฟรีดริช มีเชอร์สถาบัน [ 1 ] ชื่อ Western blot ให้เทคนิคโดยนีล เบอร์เนตต์ [ 4 ] และเป็นเล่นบนชื่อ Southern blot , เทคนิคสำหรับการตรวจดีเอ็นเอที่พัฒนาก่อนหน้านี้โดยเอ็ดวิน ภาคใต้ การตรวจหาอาร์เอ็นเอเป็น termed Northern blot และถูกพัฒนาขึ้นโดย จอร์จ สตาร์ค ที่สแตนฟอร์ด . [ 5 ]