2.3. Y. lipolytica XYL+ can produce

2.3. Y. lipolytica XYL+ can produce lipids from xylose as the sole carbon source

Once we had proved that Y. lipolytica strain XYL+ was able to efficiently consume xylose, we wanted to investigate its ability to produce lipids from this substrate. Because differences in the amounts of carbon and nitrogen sources are important in triggering lipid accumulation in this oleaginous yeast, we tested lipid production in four different media: YNB (2% xylose), YNB 30 (3% xylose), YNB 60 (6% xylose), and YNB 90 (9% xylose). As expected, lipid accumulation from xylose increased with higher amounts of xylose, reaching a fatty-acid content of 6% in YNB, 10.2% in YNB30, 13.3% in YNB60, and 16.9% in YNB90. Accordingly, the production yields increased with increased xylose content in the medium, from 0.03 to 0.04, 0.07, and 0.10 g fatty acids produced per gram of xylose consumed, respectively . These fatty acids were accumulated in lipid bodies, as observed by fluorescenc. The lipids synthetized from xylose were rich in 18:1, 16:0, 18:2, 18:0, and 16:1 fatty acids ; this profile was similar to one previously obtained from growing an engineered Y. lipolytica strain on starch, which was predicted to fit different biodiesel quality standards The final biomass produced was also correlated to the amount of xylose present in the media and ranged from 7.5 to 17.2 g/L. It was observed that, when its initial concentration was above 3%, the xylose was not completely consumed after 6 days. At the same time, the excess xylose also boosted byproduct formation during fermentation: when the initial substrate contained at least 6% xylose, xylitol and citric acid were produced in substantial amounts, ranging from 1.8 to 3.0 g/L and 6.3–7.5 g/L, respectively . We therefore prove here that metabolically engineered Y. lipolytica can produce lipids while using xylose as a carbon source. However, the relatively low lipid yield and the flux of the substrate towards fermentation products such as xylitol or citric acid prompted us to transfer the xylose utilization pathway into another modified strain that was able to overproduce lipids, in order to further increase bio-oil production.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. วาย lipolytica XYL + สามารถผลิตจากสารไขมันเป็นแหล่งคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียวเมื่อเราได้พิสูจน์ว่า วายสายพันธุ์ lipolytica XYL + ได้อย่างมีประสิทธิภาพใช้สาร เราต้องการตรวจสอบความสามารถในการผลิตไขมันจากพื้นผิวนี้ เนื่องจากความแตกต่างในจำนวนของแหล่งคาร์บอนและไนโตรเจนมีความสำคัญในการสะสมไขมันในยีสต์นี้ oleaginous เรียก เราทดสอบไขมันผลิตในสื่ออื่นที่สี่: YNB (xylose 2%), YNB 30 (xylose 3%), YNB 60 (xylose 6%), และ YNB 90 (xylose 9%) ตามที่คาดไว้ สะสมไขมันจากสารเพิ่มขึ้น ด้วยปริมาณที่สูงของสาร การเข้าถึงเนื้อหากรดไขมัน 6% ใน YNB, 10.2% ใน YNB30, 13.3% ใน YNB60 และ 16.9% ใน YNB90 ตามลำดับ อัตราผลตอบแทนการผลิตที่เพิ่มขึ้นพร้อมเพิ่มสารเนื้อหาในสื่อ จาก 0.03 0.04, 0.07, 0.10 กรัม และกรดไขมันที่ผลิตต่อกรัมของสารที่ใช้ ตามลำดับ กรดไขมันเหล่านี้ถูกสะสมในไขมันร่างกาย เป็นที่สังเกต โดย fluorescenc Synthetized ไขมันจากสารได้ 18:1, 16:0, 18:2, 18:0 และ กรดไขมัน 16:1 โพรไฟล์นี้เป็นคล้ายกับก่อนหน้านี้ ได้จากปลูกเป็นสายพันธุ์ lipolytica วายวิศวกรรมบนแป้ง ซึ่งก็คาดว่า จะพอดีกับไบโอดีเซลที่แตกต่างกันมาตรฐานคุณภาพผลิตชีวมวลสุดท้ายยังมีสหสัมพันธ์กับปริมาณของสารที่อยู่ในสื่อ และโจมตีระยะไกลจาก 7.5 17.2 g/l มันคือสังเกตว่า เมื่อความเข้มข้นเริ่มต้นสูงกว่า 3% สารที่ไม่สมบูรณ์ใช้หลัง 6 วัน ในเวลาเดียวกัน สารส่วนเกินรการก่อผลพลอยได้ระหว่างการหมัก: เมื่อเริ่มต้นพื้นผิวอยู่อย่างน้อย 6% สาร ไซลิทอล และกรดผลิตในปริมาณมาก ตั้งแต่ 1.8-3.0 g/L และ 6.3-7.5 g/L ตามลำดับ เราจึงพิสูจน์ที่นี่ lipolytica วายว่า metabolically วิศวกรรมสามารถผลิตไขมันในขณะที่ใช้สารเป็นแหล่งคาร์บอน อย่างไรก็ตาม ผลผลิตไขมันค่อนข้างต่ำและฟลักซ์ของพื้นผิวต่อผลิตภัณฑ์หมักเช่นไซลิทอลหรือกรดพร้อมท์การโอนทางเดินการใช้ประโยชน์ของสารเป็นสายพันธุ์อื่นแก้ไขที่สามารถ overproduce ไขมันเพื่อเพิ่มการผลิตน้ำมันชีวภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 วาย lipolytica XYL + สามารถผลิตไขมันจากไซโลสเป็นแหล่งคาร์บอน

เมื่อเราได้พิสูจน์ว่าวาย lipolytica ความเครียด XYL + ก็สามารถที่จะมีประสิทธิภาพกินไซโลเราต้องการที่จะตรวจสอบความสามารถในการผลิตไขมันจากพื้นผิวนี้ เพราะความแตกต่างในปริมาณของคาร์บอนและไนโตรเจนแหล่งที่มามีความสำคัญในการเรียกการสะสมไขมันในยีสต์น้ำมันนี้เราได้ทดสอบการผลิตไขมันในสี่ของสื่อที่แตกต่างกัน: YNB (2% ไซโล) YNB 30 (3% ไซโล) YNB 60 (6% ไซโลส) และ YNB 90 (9% ไซโลส) เป็นที่คาดหวังจากการสะสมของไขมันเพิ่มขึ้นไซโลที่มีจำนวนที่สูงขึ้นของไซโลถึงเนื้อหากรดไขมัน 6% ใน YNB 10.2% ใน YNB30 13.3% ใน YNB60 และ 16.9% ใน YNB90 ดังนั้นอัตราผลตอบแทนการผลิตเพิ่มขึ้นด้วยเนื้อหาไซโลสที่เพิ่มขึ้นในกลาง 0.03-0.04, 0.07, และกรดไขมัน 0.10 กรัมผลิตต่อกรัมของไซโลบริโภคตามลำดับ กรดไขมันเหล่านี้จะถูกสะสมในร่างกายไขมันเป็นที่สังเกตโดย fluorescenc ไขมัน synthetized จากไซโลสรวยใน 18: 1, 16: 0, 18: 2, 18: 0 และ 16: กรดไขมัน 1; โปรไฟล์นี้เป็นแบบเดียวกับที่ได้รับก่อนหน้านี้จากการเจริญเติบโตของการออกแบบสายพันธุ์ lipolytica วายในแป้งซึ่งเป็นที่คาดการณ์เพื่อให้พอดีกับมาตรฐานคุณภาพไบโอดีเซลที่แตกต่างกันชีวมวลผลิตขั้นสุดท้ายยังมีความสัมพันธ์กับปริมาณของไซโลสในปัจจุบันสื่อและอยู่ระหว่าง 7.5-17.2 กรัม / ลิตร มันถูกตั้งข้อสังเกตว่าเมื่อความเข้มข้นเริ่มต้นของมันอยู่เหนือ 3% ไซโลสที่ไม่ได้บริโภคอย่างสมบูรณ์หลังจาก 6 วัน ในเวลาเดียวกัน, ไซโลส่วนเกินเพิ่มขึ้นนอกจากนี้ยังก่อผลพลอยได้ระหว่างการหมัก: เมื่อสารตั้งต้นเริ่มต้นที่มีอยู่อย่างน้อย 6% ไซโลส, ไซลิทอลและกรดซิตริกมีการผลิตในจำนวนมากตั้งแต่ 1.8-3.0 กรัม / ลิตรและ 6.3-7.5 กรัม / ลิตรตามลำดับ ดังนั้นเราจึงพิสูจน์ได้ว่าที่นี่วิศวกรรมเมตาบอลิ lipolytica วายสามารถผลิตไขมันในขณะที่ใช้ไซโลสเป็นแหล่งคาร์บอน อย่างไรก็ตามอัตราผลตอบแทนไขมันค่อนข้างต่ำและฟลักซ์ของพื้นผิวต่อผลิตภัณฑ์หมักเช่นไซลิทอลหรือกรดซิตริกที่แจ้งให้เราโอนเส้นทางการใช้ไซโลสลงในอีกสายพันธุ์ที่มีการปรับเปลี่ยนที่สามารถ overproduce ไขมันในการสั่งซื้อที่จะเพิ่มการผลิตน้ำมันชีวภาพ .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 วาย lipolytica xyl + สามารถผลิตไขมันจากไซโลสเป็นแหล่งคาร์บอนเมื่อเราได้พิสูจน์แล้วว่า วาย lipolytica สายพันธุ์ xyl + สามารถใช้อย่างมีประสิทธิภาพไซโลส , เราต้องการที่จะตรวจสอบความสามารถในการผลิตลิพิดจากแผ่นนี้ เพราะความแตกต่างในปริมาณของแหล่งคาร์บอนและไนโตรเจนที่สำคัญในการสะสมไขมันในยีสต์ที่ผสมด้วยน้ำมันนี้เราทดสอบการผลิตไขมันใน 4 สื่อที่แตกต่างกัน : ynb ( 2 % B ) , 30 ynb ( 3 % B ) ynb 60 ( 6 % B ) และ ynb 90 ( 9 % B ) ตามที่คาดไว้ , ไขมันสะสมจากไซโลสเพิ่มขึ้น ด้วยยอดเงินที่สูงกว่า 6 , ถึง 6% ของปริมาณกรดไขมันใน ynb 10.2% ใน , ynb30 13.3 % ใน ynb60 และ 16.9% ใน ynb90 . ดังนั้น การผลิต ผลผลิตเพิ่มขึ้น เพิ่มขึ้น ไซโลส เนื้อหาในสื่อ จาก 0.03 0.04 , 0.08 , 0.10 กรัมต่อกรัมของกรดไขมันที่ผลิตเอนไซม์เผาผลาญ ตามลำดับ กรดไขมันเหล่านี้เป็นไขมันสะสมในร่างกาย เช่น สังเกตได้จาก fluorescenc . ไขมันทั่งจากไซโลส รวยใน 16:0 18 : 1 , 18:0 , 2 , 1 , และกรดไขมัน ; โปรไฟล์นี้คล้ายคลึงกับหนึ่งก่อนหน้านี้ที่ได้จากการวิศวกรรม . lipolytica เมื่อยแป้ง ซึ่งพบว่าพอดีกับมาตรฐานคุณภาพน้ำมันไบโอดีเซลสามารถผลิตแตกต่างกันสุดท้ายก็มีไซโลที่มีอยู่ในสื่อ อยู่ระหว่าง 7.5 ถึง 17.2 กรัม / ลิตร พบว่าเมื่อความเข้มข้นเริ่มต้นของมากกว่า 3 เปอร์เซ็นต์ ไซโลส คือไม่ได้ใช้อีก 6 วัน ในเวลาเดียวกัน , ไซโลสส่วนเกินเพิ่มขึ้นเกิดผลพลอยได้ระหว่างการหมัก เมื่อพื้นผิวเริ่มต้นที่มีอยู่อย่างน้อยร้อยละ 6 B , ไซลิทอล และกรดซิตริก มีการผลิตในปริมาณมากตั้งแต่ 1.8 ไป 3.0 กรัม / ลิตรและ 6.3 – 7.5 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ เราจึงพิสูจน์ว่า metabolically วิศวกรรม . lipolytica สามารถผลิตไขมันในขณะที่การใช้ไซโลสเป็นแหล่งคาร์บอน . แต่ไขมันค่อนข้างต่ำ ผลผลิตและฟลักซ์ของสารอาหารที่มีต่อผลิตภัณฑ์หมัก เช่น ไซลิทอลหรือกรดซิตริกแจ้งให้เราโอน B ใช้ทางเดินเข้าอีกปรับเปลี่ยนสายพันธุ์ที่สามารถผลิตมากเกินไปไขมัน เพื่อเพิ่มการผลิตน้ำมันไบโอ