radiative deactivation of the excit

radiative deactivation of the excited singlet state [38]. Therefore
the measurements were conducted at room temperature (about25 °C).
It was proposed that the reduced products of vitamin K
homologues are 1,4-dihydroxy-2-methylnaphthalene derivative
(Scheme1), by analogy with the products proposed by reports for
reduction of vitamin K3 by reduction with SnCl2 [37]. The excita-
tion and emission spectra showed two excitation maxima at 240
and 330 nm and one emission maximum at 430 nm. The highest
fluorescence intensities were obtained when measurements were
made at λex 240 nm and λem 430 nm.

3.2. Optimization of separation method

Vitamin K homologues are highly lipophilic compounds and
the separation on RP-C18 requires long retention times. In order to
reduce the retention times while maintaining resolution, a num-
ber of variables affecting the separation of vitamin K homologues
and I.S. were studied. Different types of organic modifiers or a
combination of organic modifiers were investigated for their ef-
fects on separation including; acetonitrile, ethanol, methanol or a
combination of them. Acetonitrile showed the best resolution and
peak symmetry therefore it was selected in our study. The effect of
different proportions of acetonitrile (60–98%) on the chromato-
graphic behavior of the eluted peaks was studied. It was observed
that the retention values of the studied compounds were extended
and peak resolution was distorted with decreasing acetonitrile
percentages as shown in Fig. 3. For better peak shape and re-
solution, 95% of acetonitrile was selected as the optimum.
The effect of buffer pH of the mobile phase on the separation of
vitamin K homologues was studied. Different buffers were tried
such as phosphate, acetate and formate buffer. It was found that
the presence of buffer in the mobile phase did not affect the se-
paration of vitamin K homologues. This was attributed to the ab-
sence of ionizable groups in the structures of vitamin K homo-
logues. However, the presence of acidic pH in the mobile phase
increase peak height and make the peaks sharper. Therefore, 0.1%
trifluoroacetic acid (TFA) was used in the mobile phase. Increasing
content of TFA in the mobile phase did not have additional effects.

3.3. Optimization of SALLE method

SALLE with water miscible organic solvent has shown its dis-
tinctive advantages in bioanalytical research [31]. However, there
have been limited reports on SALLE using water-miscible organic
solvents and inorganic salts as a salting-out mediator. The most
important variables that have to be optimized in SALLE are the
type and amount of salting-out mediator, type and volume of
extraction solvent. The first variable had to be tested is the type of
salting-out mediator. It was reported that magnesium chloride
(MgCl2), aluminum chloride (AlCl3), calcium chloride (CaCl2), so-
dium chloride (NaCl) and ammonium sulfate ((NH4)2SO4) were the
most efficient salting-out mediator. However, aluminum chloride
would be a poor choice due to its vigorous reaction in water [39].
The effects of different types of salting-out mediators on the ex-
traction efficiency of vitamin k homologues from spiked plasma
samples were investigated. Results were shown on Table 1. It was
found that the best extraction recoveries were obtained using
MgCl2. % recoveries were 97.4–100.5% with standard deviations of
19–2.7. Therefore, it was used for subsequent experiments. The
required amount of MgCl2 for salting-out of vitamin K homologues
from plasma samples was also investigated. It was found that 0.3 g
of MgCl2 gave the maximum extraction efficiency thus it was se-
lected for next experiments. In addition, the type of extraction
solvent was studied. Acetonitrile, methanol, ethanol and iso-
propanol were tested in this experiment for their effect on the
extraction of vitamin K homologues (Fig. 4). It was found that both
ethanol and acetonitrile resulted in the highest peak areas as
compared to methanol and isopropanol. However, the peaks ob-
tained using acetonitrile were better compared to ethanol in the

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปิดใช้งาน radiative ของรัฐตื่นเต้นเสื้อกล้าม [38] ดังนั้นมีดำเนินการวัดที่อุณหภูมิห้อง (about25 ° C) มันถูกนำเสนอที่ผลิตภัณฑ์ลดลงของวิตามิน Khomologues เป็นอนุพันธ์ของ 1,4-dihydroxy-2-methylnaphthalene(Scheme1), โดยเปรียบเทียบกับผลิตภัณฑ์ที่นำเสนอ โดยรายงานลดวิตามิน K3 โดยการลดกับ SnCl2 [37] Excita-สเตรชันและเล็ดรอดแรมสเป็คตราพบอโบไฟฟ้ารุ่นสองที่ 240nm และ 330 และหนึ่งปล่อยก๊าซสูงสุดที่ 430 nm สูงสุดปลดปล่อยก๊าซ fluorescence ได้รับเมื่อถูกประเมินทำที่ λex 240 nm และ λem 430 nm3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีการแยกHomologues วิตามิน K คือ สารประกอบ lipophilic สูง และแยกใน RP-C18 ต้องใช้เวลารักษานาน ในอันที่จะลดระยะเวลาเก็บข้อมูลขณะที่ยังคงความละเอียด num-ber ของตัวแปรที่ส่งผลกระทบต่อแยกของวิตามิน K homologuesและ I.S. ได้ศึกษา Modifiers อินทรีย์ชนิดต่าง ๆ หรือชุดของ modifiers อินทรีย์ถูกสอบสวนสำหรับของ effects แยกทั้ง acetonitrile เอทานอล เมทานอลหรือชุดของพวกเขา Acetonitrile แสดงให้เห็นว่าการแก้ปัญหาที่ดีที่สุด และสมมาตรสูงสุดดังนั้น จะถูกเลือกในการศึกษาของเรา ผลของการสัดส่วนที่แตกต่างกันของ acetonitrile (60-98%) ใน chromato-มีศึกษาลักษณะภาพของยอดเขา eluted จะถูกตรวจสอบค่าคงที่ของสาร studied ถูกขยายและความละเอียดสูงสุดผิดเพี้ยน ด้วย acetonitrile ลดลงเปอร์เซ็นต์มาก Fig. 3 รูปร่างดีสูงสุดและ re-เลือกโซลูชั่น 95% ของ acetonitrile เป็นมีประสิทธิภาพสูงสุดผลของ pH ของบัฟเฟอร์ของเฟสเคลื่อนที่แบ่งแยกเป็นศึกษาวิตามิน K homologues ข้อมูลต่าง ๆ ได้พยายามเช่นบัฟเฟอร์ฟอสเฟต acetate และรูปแบบเอกสาร จะพบว่าของบัฟเฟอร์ในเฟสเคลื่อนที่ได้ไม่มีผลกระทบต่อ se-paration ของวิตามิน K homologues นี้คือบันทึก ab-sence ของกลุ่ม ionizable ในโครงสร้างของวิตามิน K ตุ๊ด-โลกูส์ อย่างไรก็ตาม ของ pH กรดในระยะเคลื่อนเพิ่มความสูงสูงสุด และทำคมแห่ง ดังนั้น 0.1%กรด trifluoroacetic (TFA) ถูกใช้ในขั้นตอนการเคลื่อน เพิ่มขึ้นเนื้อหาของ TFA ในเฟสเคลื่อนที่ไม่ได้มีลักษณะพิเศษเพิ่มเติม3.3 การเพิ่มประสิทธิภาพของวิธี SALLEมีแสดง SALLE มีน้ำตัวทำละลายอินทรีย์ miscible โรคของ-ข้อดี tinctive bioanalytical วิจัย [31] อย่างไรก็ตาม มีการจำกัดรายงาน SALLE ใช้น้ำ miscible อินทรีย์หรือสารทำละลายและเกลืออนินทรีย์เป็นกลางออกมารีซอลทิง มากสุดเป็นตัวแปรสำคัญที่จะต้องปรับให้เหมาะใน SALLEชนิดและจำนวนของกลางออกมารีซอลทิง ชนิด และปริมาณของตัวทำละลายสกัด ตัวแปร first มีการทดสอบเป็นออกมารีซอลทิงผู้ไกล่เกลี่ย มีรายงานว่า แมกนีเซียมคลอไรด์(MgCl2), อลูมิเนียมคลอไรด์ (AlCl3), แคลเซียมคลอไรด์ (CaCl2), ดังนั้น -dium คลอไรด์ (NaCl) และแอมโมเนียซัลเฟต ((NH4) 2SO4) ได้กลางออกมารีซอลทิง efficient มากที่สุด อย่างไรก็ตาม อลูมิเนียมคลอไรด์จะเป็นทางเลือกดีเนื่องจากปฏิกิริยาที่คึกคักในน้ำ [39]ผลของการอักเสบออกมารีซอลทิงชนิดต่าง ๆ ในอดีต-efficiency ลากของวิตามิน k homologues จากพลาสมาถูกแทงตัวอย่างตรวจสอบ ผลลัพธ์ถูกแสดงในตารางที่ 1 มันเป็นพบ recoveries สกัดสุดได้รับมาใช้MgCl2. recoveries %ถูก% 97.4 – 100.5 ด้วยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของ19 – 2.7 ดังนั้น มันถูกใช้สำหรับการทดลองต่อไป ที่ยอดเงินที่ต้องของ MgCl2 มารีซอลทิงออกของวิตามิน K homologuesจากตัวอย่างพลาสม่ายังตรวจสอบ พบที่ 0.3 gของ MgCl2 ให้ efficiency สกัดสูงสุดดังนั้น มันเป็น se -lected สำหรับการทดลองต่อไป นอกจากนี้ ชนิดของสกัดมีศึกษาตัวทำละลาย Acetonitrile เมทานอล เอทานอล และ iso-อย่างไร propanol ทดสอบในการทดลองนี้ให้ผลที่เกิดขึ้นในการการสกัดวิตามิน K homologues (Fig. 4) พบว่าทั้งสองเอทานอลและ acetonitrile ผลในพื้นที่สูงสุดสูงสุดเมื่อเทียบกับเมทานอลและ isopropanol อย่างไรก็ตาม ob พีคส์ -tained ใช้ acetonitrile ได้ดีกว่าการเปรียบเทียบกับเอทานอลในการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เสื่อมรังสีของรัฐเสื้อกล้ามตื่นเต้น [38] ดังนั้นการวัดได้ดำเนินการที่อุณหภูมิห้อง (about25 ° C). มันก็เสนอว่าผลิตภัณฑ์ที่ลดลงของวิตามินเคhomologues มี 1,4-dihydroxy-2-methylnaphthalene อนุพันธ์(Scheme1) โดยการเปรียบเทียบกับผลิตภัณฑ์ที่เสนอโดยรายงานการลดลงวิตามิน K3 จากการลดลงด้วย SnCl2 [37] excita- การปล่อยก๊าซเรือนกระจกและสเปกตรัมแสดงให้เห็นว่าทั้งสองกระตุ้นสูงสุดที่ 240 และ 330 นาโนเมตรและสูงสุดปล่อยก๊าซเรือนกระจกที่หนึ่ง 430 นาโนเมตร สูงสุดเข้ม uorescence ชั้นที่ได้รับเมื่อวัดที่ได้รับการทำที่λex 240 นาโนเมตรและ 430 นาโนเมตรλem. 3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีการแยกhomologues วิตามิน K เป็นสารประกอบ lipophilic มากและแยกบนRP-C18 ต้องใช้เวลาการเก็บรักษานาน เพื่อที่จะลดเวลาในการเก็บรักษาในขณะที่รักษาความละเอียดเป็นจานวนเบอร์ของตัวแปรที่มีผลต่อการแยกของวิตามินเคhomologues และการศึกษา รูปแบบต่างๆของ ERS สาย Modi อินทรีย์หรือการรวมกันของสายERS Modi อินทรีย์ถูกตรวจสอบประสิทธิผลของพวกเขาสำหรับfects แยกรวมทั้ง; acetonitrile เอทานอลเมทานอลหรือการรวมกันของพวกเขา acetonitrile แสดงให้เห็นถึงความละเอียดที่ดีที่สุดและสัดส่วนสูงสุดจึงได้รับเลือกในการศึกษาของเรา ผลของสัดส่วนที่แตกต่างกันของ acetonitrile (60-98%) ใน chromato- พฤติกรรมกราฟิกของยอดเขาชะได้ศึกษา มันถูกตั้งข้อสังเกตว่าค่าการเก็บรักษาสารศึกษากำลังขยายและความละเอียดสูงสุดถูกบิดเบือนด้วยacetonitrile ลดลงร้อยละดังแสดงในรูป 3. สำหรับรูปร่างจุดสูงสุดใหม่ที่ดีขึ้นและวิธีการแก้ปัญหา95% ของ acetonitrile ได้รับเลือกเป็นที่ดีที่สุด. ผลกระทบของค่า pH บัฟเฟอร์ของเฟสมือถือในการแยกของวิตามินเคhomologues ศึกษา บัฟเฟอร์ที่แตกต่างกันกำลังพยายามเช่นฟอสเฟตบัฟเฟอร์อะซิเตทและรูปแบบ การศึกษาพบว่าการปรากฏตัวของบัฟเฟอร์ในเฟสเคลื่อนที่ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อ se- paration ของวิตามินเค homologues นี้ถูกประกอบกับ AB- รู้สึกของกลุ่มแตกในโครงสร้างของวิตามินเค homo- Logues แต่การปรากฏตัวของค่า pH ที่เป็นกรดในเฟสเคลื่อนที่เพิ่มขึ้นสูงสูงสุดและทำให้ยอดภาพที่คมชัด ดังนั้น 0.1% ไตรชั้นกรด uoroacetic (TFA) ถูกนำมาใช้ในขั้นตอนการมือถือ การเพิ่มเนื้อหาของ TFA ในเฟสเคลื่อนที่ไม่ได้มีผลกระทบเพิ่มเติม. 3.3 การเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีการ SALLE SALLE ด้วยตัวทำละลายอินทรีย์ละลายน้ำได้แสดงให้เห็นปรากฏของข้อได้เปรียบในการวิจัยtinctive Bioanalytical [31] แต่มีการรายงาน จำกัด SALLE ใช้อินทรีย์น้ำที่ละลายตัวทำละลายและเกลืออนินทรีเป็นคนกลางเกลือออก ส่วนใหญ่ตัวแปรสำคัญที่จะต้องมีการเพิ่มประสิทธิภาพใน SALLE เป็นชนิดและปริมาณของเกลือคนกลางออกชนิดและปริมาณของตัวทำละลายในการสกัด ไฟตัวแปรแรกจะต้องมีการทดสอบเป็นประเภทของคนกลางเกลือออก มีรายงานว่าแมกนีเซียมคลอไรด์(MgCl2) อลูมิเนียมคลอไรด์ (AlCl3), แคลเซียมคลอไรด์ (CaCl2) ทีเราคลอไรด์dium (โซเดียมคลอไรด์) และแอมโมเนียมซัลเฟต ((NH4) 2SO4) เป็นสายEF มากที่สุดเพียงพอคนกลางเกลือออก อย่างไรก็ตามอลูมิเนียมคลอไรด์จะเป็นทางเลือกที่น่าสงสารเพราะปฏิกิริยาแข็งแรงในน้ำ [39]. ผลกระทบที่แตกต่างกันของผู้ไกล่เกลี่ยเกลือออกในอดีตฉุดประสิทธิภาพการสายของ homologues วิตามิน k จากพลาสม่าถูกแทงตัวอย่างถูกตรวจสอบ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงไว้ในตารางที่ 1 มันก็พบว่าสิ่งที่ดีที่สุดกลับคืนสกัดที่ได้รับใช้MgCl2 กลับคืน% เป็น 97.4-100.5% และมีค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของ19-2.7 ดังนั้นจึงถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองที่ตามมา จำนวนเงินที่ต้อง MgCl2 สำหรับเกลือออกจากวิตามินเค homologues จากตัวอย่างพลาสมาถูกตรวจสอบยัง มันก็พบว่า 0.3 กรัมของMgCl2 ให้ประสิทธิภาพการสกัดไฟสูงสุดจึงได้รับการ se- การสนองสำหรับการทดลองต่อไป นอกจากนี้ประเภทของการสกัดด้วยตัวทำละลายได้ศึกษา acetonitrile, เมทานอลเอทานอลและ iso- โพรพานได้รับการทดสอบในการทดลองนี้ได้ผลของพวกเขาในการสกัด homologues วิตามินเค (รูปที่. 4) มันก็พบว่าทั้งเอทานอลและ acetonitrile ส่งผลให้ในพื้นที่ที่สูงที่สุดสูงสุดเป็นเมื่อเทียบกับเมทานอลและisopropanol อย่างไรก็ตามยอดเขาสังเกตtained ใช้ acetonitrile ถูกที่ดีกว่าเมื่อเทียบกับเอทานอลใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเสื่อมของตื่นเต้นเปลี่ยนเสื้อกล้ามรัฐ [ 38 ] ดังนั้น
วัด ได้ดำเนินการทดลองที่อุณหภูมิห้อง ( about25 ° C )
มันเสนอว่าลดลงผลิตภัณฑ์ของวิตามิน K

( 1,4-dihydroxy-2-methylnaphthalene ในเป็นอนุพันธ์ scheme1 ) โดยเปรียบเทียบกับผลิตภัณฑ์ที่นำเสนอโดยรายงาน
ลดวิตามิน K3 โดยลดกับ sncl2 [ 37 ] การ excita -
tion และการปล่อยสเปกตรัมพบสองกระตุ้น MAXIMA ที่ 240
330 nm และหนึ่งและปล่อยสูงสุด 430 nm . สูงสุด
fl uorescence เข้มได้เมื่อวัดถูก
ที่λอดีต 240 nm และλเอ็ม 430 nm .

. . การเพิ่มประสิทธิภาพของการแยกวิธี

วิตามิน K ในสูงลิโพฟิลิกสารประกอบ
แยก rp-c18 ที่ต้องใช้เวลานานในการเก็บรักษาครั้ง เพื่อ
ลดเวลากักในขณะที่รักษาความละเอียด , น้ำ -
เบอร์ของตัวแปรที่มีผลต่อการแยกของวิตามิน K
i.s. ในและเพื่อ ชนิดที่แตกต่างกันของอินทรีย์ Modi จึง ERS หรือการรวมกันของอินทรีย์
Modi ERS จึงศึกษาของ EF -
fects ในการแยกรวม ไน , เอทานอล , เมทานอลหรือ
การรวมกันของพวกเขา ไน พบความละเอียดที่ดีที่สุดและ
ยอดสมมาตร ดังนั้นจึงเลือกในการศึกษาของเรา ผลของสัดส่วนที่แตกต่างกันของไน
( 60 – 98% ) ใน chromato -
กราฟิกตัวอย่างพฤติกรรมของยอดศึกษา พบว่าค่าความคงทนของ

ศึกษาสารประกอบถูกขยายและบิดเบือนยอดละเอียดลดไน
เปอร์เซ็นต์ดังแสดงในรูปที่ 3 . ดียอดรูปร่างและ re -
, สารละลาย95% ของไน ถูกเลือกเป็นสูงสุด
ผลของบัฟเฟอร์ pH ของเฟสเคลื่อนที่ที่แยก
วิตามิน K ในดิน บัฟเฟอร์ที่แตกต่างกัน คือพยายาม
เช่นฟอสเฟต และรูปแบบอะซิเตตบัฟเฟอร์ พบว่า
สถานะของบัฟเฟอร์ในเฟสเคลื่อนที่ไม่มีผลต่อความเร็ว -
paration ของวิตามิน K ใน . นี้ประกอบกับ AB -
ความรู้สึกของกลุ่มไอออนไนซ์ได้อย่างในโครงสร้างของวิตามิน K โฮโม -
logues . อย่างไรก็ตาม การปรากฏตัวของ pH ที่เป็นกรดในเฟสเคลื่อนที่
เพิ่มความสูง สูงสุด และทำให้ยอดภาพที่คมชัด ดังนั้น , 0.1 %
ไตรfl uoroacetic acid ( กรดไขมัน ) ที่ถูกใช้ในเฟสเคลื่อนที่ การเพิ่มปริมาณของกรดไขมัน
ในเฟสเคลื่อนที่ไม่มีผลเพิ่มเติม

3 . การเพิ่มประสิทธิภาพของวิธี

ซาลซาลกับน้ำได้เป็นตัวทำละลายอินทรีย์ของ dis -
tinctive ข้อดีใน bioanalytical วิจัย [ 31 ] อย่างไรก็ตาม มีรายงานที่ จำกัด ใน ซาล

ใช้น้ำได้สารละลายเกลืออนินทรีย์และอินทรีย์สารออกมาเป็นคนกลาง ที่สุด
ตัวแปรสำคัญที่ต้องปรับในซาลเป็น
ชนิดและปริมาณของเกลือออกคนกลาง ชนิดและปริมาณของ
ตัวทำละลายในการสกัดจึงต้องมีการทดสอบตัวแปรแรกคือชนิดของ
salting out คนกลาง มีรายงานว่า แมกนีเซียมคลอไรด์
( MgCl2 ) , อลูมิเนียมคลอไรด์ ( alcl3 ) แคลเซียมคลอไรด์ ( CaCl2 ) ดังนั้น -
เดียมคลอไรด์ ( NaCl ) และแอมโมเนียซัลเฟต ( ( NH4 ) 2so4 )
ที่สุด EF จึง cient salting out คนกลาง อย่างไรก็ตาม อลูมิเนียมคลอไรด์
จะเป็นทางเลือกที่ดีเนื่องจากปฏิกิริยาแข็งแรงในน้ำ [ 39 ] .
ผลของชนิดที่แตกต่างกันของเกลือออกผู้ไกล่เกลี่ยใน EX -
EF จึงฉุดประสิทธิภาพของวิตามิน K ในเลือดจากหนาม
ตัวอย่างคือ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงในตารางที่ 1 ก็พบว่า การสกัดที่ดีที่สุด

เมื่อได้รับการใช้ไอโซโทป % ต่ำสุดคือเมื่อ– 100.5 กับส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของ
19 –ปี ดังนั้น มันถูกใช้ในการทดลองต่อไป
ต้องใช้ปริมาณไอโซโทปสำหรับ salting out ของวิตามิน K ใน
จากตัวอย่างพลาสมามีลักษณะ พบว่า 0.3 g
ไอโซโทปให้ประสิทธิภาพสูงสุดสกัด EF จึงจึงเป็นเซ -
lected สำหรับการทดลองต่อไป นอกจากนี้ ชนิดของตัวทำละลายการสกัด
ศึกษา ไน เมทานอล เอทานอล และไอโซโพรพานอล -
ถูกทดสอบในการทดลองนี้ สำหรับผลของพวกเขาใน
การสกัดวิตามิน K ใน ( รูปที่ 4 ) พบว่า ทั้งเอทานอลและไน
ส่งผลพื้นที่พีคสูงสุดเป็น
เมื่อเทียบกับเมทานอลและไอโซโพรพานอล . อย่างไรก็ตาม ยอด OB -
tained ใช้ไนได้ดีเมื่อเทียบกับเอทานอลใน